实验室生物安全培训课件丨40页pptx

实验室生物安全培训微生物I病毒I细菌I病原体对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。Laboratory biosafety 目录1.病源微生物与危险品管理2.实验室生物安全危害3.实验室生物安全防护4.实验室生物安全基本操作规程5.实验室手卫生contents病源微生物与危险品管理第一部分对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。生物危害程度的分级根据对个体和群体的危害性分四级：Ⅰ级指危害性最低的病毒、细菌、真菌和寄生虫等生物因子；Ⅱ级指中等危害的生物因子，多为条件致病菌或机会致病菌；Ⅲ级指能引起个体的严重感染，但不易在人群中传播扩散的生物因子；可用抗生素治疗Ⅳ级指能引起个体和群体严重感染，难治疗根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫学病原体筛检的防护标准应该是生物危害程度的分级危险物品共分为九大类第1类 爆炸品 第2类 气体 第3类 易燃液体 第4类 易燃固体 第5类 氧化剂和有机过氧化物 第6类 毒害品和感染性物质 第7类 放射性物品 第8类 腐蚀品 第9类 杂项危险品实验室生物安全危害第二部分对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。相关文献报道：对3921例实验室相关感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染只占全部感染的18％，不明原因的实验室感染却高达82％。对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。气溶胶与实验室感染气溶胶的特点生物气溶胶无色无味、无孔不入，不易发现，实验人员在自然呼吸中不知不觉吸入而造成感染。若治疗控制不及时会造成严重后果。 呼吸道传播的传染病的微生物特别是高致病性病毒常常发生变异，尤其是其抗原性、致病性都可能发生改变，在空气中存活力增强。 可以远距离或较远距离传播，这是其与其他传播途径的显著区别，也是气溶胶传播难以预防的另一重要原因。气溶胶与实验室感染可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作 气溶胶与实验室感染微生物气溶胶的控制实验室空气传播与感染主要有三个过程：因此，要控制或减少实验室空气传播和感染，要有相应得生物安全措施，以控制实验室微生物气溶胶感染的三个过程。各种产生感染性气溶胶的操作尽量在生物安全柜内操作。正确使用生物安全柜，以有效地减少实验室获得性感染和由于气溶胶暴露而导致的培养物的交叉感染，并能保护环境。使用生物安全柜微生物气溶胶的控制规范和改进操作过程和操作技术，尽量避免操作失误。 例如：用冷却接种环沾取菌液进行接种------气溶胶减少效果可达91%。气溶胶与实验室感染安全操作实验室生物安全防护第三部分对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。（一）不同生物安全等级实验室的介绍（二）安全防护的基本要求在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。 在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。 在处理完感染性实验材料后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。 为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。 严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。 不得在实验室内穿露脚趾的鞋。 禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。 禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。 在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。（三）防护设备设施生物安全柜压力蒸汽灭菌器可移动紫外灯红外加热灭菌器酒精灯洗眼冲淋装置主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸. 保护操作人员-负压 保护周边环境-HEPA 可以保护样品-层流（三）防护设备设施生物安全柜实验室操作都可能产生感染性气溶胶。 直径小于5μm的气溶胶、直径为5～100μm的微小液滴亦可能产生吸入或交叉污染工作台面的其他材料。 正确使用生物安全柜—将有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。（三）防护设备设施CLASS II 二级生物安全柜CLASSII级生物安全柜适用于1、2、3级生物安全水平的实验。它们可以安全的保护样品、人员和环境。CLASS II 级生物安全柜根据结构以及气流分配的不同，主要是外排气流，分为：A型（30%排在实验室内 ） B型 B1 （70%接管道外排） B2 （100%接管道外排） B3 （30% 接管道外排） HEPA（高效微粒子空气，能99.99%地去除0.3微米以上颗粒（三）防护设备设施在生物安全柜上工作摆放原则在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行 操作要点避免使用明火，用适当的灭菌措施 避免使用干扰安全柜内层流的实验手段 如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理 安全柜必须处于操作状态时，才能彻底消毒内壁禁用明火使用明火会对气流产生影响 特别在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险 在对接种环进行灭菌时，可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使用明火。 （三）防护设备设施淋浴装置和应急消毒喷淋装置管理规定BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置。 BSL-3实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区 设置应急消毒喷淋装置。管理要求保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒。 喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。 应急消毒喷淋装置 。 在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要20分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。 当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导 。（三）防护设备设施个体防护的配备原则BSL－1实验室生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护 。BSL－2实验室在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒，然后统一洗涤或丢弃。 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。 一次性手套不得清洗和再次使用。 除符合BSL－1的要求外，还应该符合下列条件：一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1实验室） 若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2和BSL-3实验室）应该佩戴两副手套。 在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。 戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖。（三）防护设备设施正确使用手套1、手套的选择工作人员在实验时应穿工作服，戴医用口罩。 工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。 2、手套的检查在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可以通过充气试验，将其浸入水中观察是否有汽泡来检查手套的质量。3、手套的使用（三）防护设备设施正确使用手套4、手套的清洗和更换使用一次性手套，不可再次使用。用后立即进行 高压灭菌消毒然后丢弃。 不得戴着手套离开实验室区域。戴手套注意要点在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套； 将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;手套的手要远离面部脱手套过程及注意要点用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内； 用戴着手套的手拿住该手套； 用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面； 脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状； 丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。（五）医疗垃圾处置黄色垃圾袋 医疗垃圾黑色垃圾袋 生活垃圾红色垃圾袋 放射性垃圾黄色锐器盒 损伤性垃圾（五）医疗垃圾处置医疗废物分类感 染 性 废 物病 理 性 废 物损 伤 性 废 物药 物 性 废 物化 学 性 废 物（五）医疗垃圾处置损伤性废物特征：能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。 常见： 被病人血液。体液。排泄物污染的物品，包括：棉球、棉签、引流面条、纱布及其他各种敷料；一次性使用卫生用品、一次性使用医疗用品；一次性医疗器械；废弃的被服；其它被病人血液、体液、排泄物污染的物品。 医疗机构收治的隔离传染病病人或者疑似传染病病人产生的生活垃圾。 病原体的培养基、标本和菌种保存液。 各种废弃的医学标本。 废弃的血液、血清。（五）医疗垃圾处置病理性废物特征：诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。 常见： 手术及其它诊疗过程中产生的废弃的人体组织、器官等。 医学实验动物的组织、尸体。 病理切片后废弃的人体组织、病理腊块等。（五）医疗垃圾处置感染性废物特征：携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物。 常见： 医用针头、缝合针。 各类医用锐器，包括：解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯等。 载玻片、玻璃试管、玻璃安瓿等。（五）医疗垃圾处置药物性废物特征：过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。 常见： 废弃的一般性药物，如：抗生素、非处方类药品等。 废弃的细胞毒性药物和遗传毒性药物，包括:致癌性药物，如环孢霉素、环磷酰胺等；可疑致癌性药物，如:顺铂、丝裂霉素、阿霉素等；免疫抑制剂等。 废弃的疫苗、血液制品等。（五）医疗垃圾处置化学性废物特征：具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品。 常见：医学影像室、实验室废弃的化学试剂。 废弃的过氧乙酸、戊二醛等化学消毒剂。 废弃的汞血压计、汞温度计。（五）医疗垃圾处置医疗废物严格按照分类分别置于黄色有警示标识的防渗漏、防破裂、防穿孔的专用垃圾袋/盒中，并贴好标签。医疗垃圾的收集处置医疗垃圾由卫生员收集，并填写相应医疗垃圾收集处置登记本，再由指定的人员转运至医院医疗垃圾储存处。 微生物培养基、鉴定药敏卡、菌毒株等医疗垃圾移交前需进行预处理（高压灭菌） 血液、血清以及体液等标本移交前需用有效氯2000mg/L的消毒液浸泡30分钟以上。 针头、玻片等损伤性垃圾要放入黄色锐器盒中。实验室生物安全基本操作规程第四部分对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。一、实验室工作人员的资格和培训 二、Ⅰ级生物安全防护实验室安全操作规程禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入。 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 以移液器吸取液体，禁止口吸。 制定尖锐器具的安全操作规程。 按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒。 所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭容器内。 制定有效的防鼠防虫措施。安全操作规程四、 Ⅱ级生物安全防护实验室特殊的安全操作规程进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室或动物房内工作。 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、需要的免疫、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。 并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理。 将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按照规范要求操作。 工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。安全操作规程五、样本运送非高致病性的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送应由专人负责，专车运送，运送人员应经过培训取得相关资质，不得通过公共交通工具运送，运送过程应采取相应的防护措施。运输过程中发生意外状况，运送单位、运送人、接受机构应按国家有关规定，采取必要的应急措施。注意事项六、生物安全柜操作注意事项生物安全柜运行正常时才能使用。 生物安全柜在使用中打开的玻璃观察挡板不能超过规定高度。 安全柜内应尽量少放器材或标本，不能影响后部压力排风系统的气流循环。 安全柜内不能使用明火，否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。 所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。 尽量减少操作者身后的人员活动。 操作者不应反复移出或伸进手臂以免干扰气流。 不要使实验记录本、移液器以及其它物品阻挡空气格栅 。 在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行2～3分钟。 在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。注意事项七、离心机内破损样本的处理若离心时发生试管破损，应立即关掉离心机电源开关，三十分钟后打开离心机盖。 如在离心机停止时才发现试管破损，亦需再关闭离心机盖三十分钟。 必须穿工作服，戴口罩、乳胶手套，小心把破损试管移出离心机，可用镊子检起破碎的玻璃。 破裂试管、玻璃碎片、离心机室，必须用75%的酒精消毒，离心机消毒不可用次氯酸盐溶液，以免造成离心机损坏。 注意事项八、暴露事件的紧急处理 “暴露事件”是实验室人员在执行本职工作时与潜在传染性物质的接触（眼、嘴、其它黏膜、经吸入方式进入呼吸道、破损皮肤、或非肠道）。遭到已知的或潜在暴露事件的工作人员必须按照以下相应暴露事件的处理措施，尽快脱去手套并处理被污染部位。 “暴露事件”的定义用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。 必要时进行医学处理。1、皮肤感染 用冲眼器冲洗或温水冲洗感染部位15分钟。 必要时进行医学处理。2、眼、面部飞溅 屏住呼吸迅速离开房间，小心脱去个人防护用品。 当脱去个人防护用品时必须确保个人防护用品暴露面朝里，用皂液和水仔细洗手，实验室排风（通风）至少1小时。 3、气溶胶暴露 通知在这一区域的其他人预防污染。穿戴手套、实验衣和面罩，用纸巾覆盖溢出物，把浓缩的消毒剂倒在溢出物区域周围并与溢出物混和，并维持适当的接触时间。4、Ⅰ级生物安全实验室溢出八、暴露事件的紧急处理 迅速离开房间，避免吸入经空气传播的物质。通知其他的人离开。 关门并贴上警告标签。 移去污染的衣物，放在生物危害袋内。 用肥皂和水清洗所有暴露的皮肤。 报告实验室生物安全负责人，如果需要帮助，请咨询生物安全委员会。 在进入实验室所前，使气溶胶弥散至少30分钟。备齐处理物（消毒剂，纸巾，生物危害袋和镊子）。 穿上防护衣（实验外套，面罩，实验手套，必要时穿上长统靴）。按溢出物的状态，可以戴一个HEPA过滤呼吸罩以代替外科面罩。 用消毒湿巾覆盖污染区域，然后，小心地倒上消毒剂在溢出物的周围。避免扩大污染区域。因为要被溢出物稀释所以要用更浓缩的消毒剂。允许至少20分钟的接触反应时间。 用镊子捡起一些尖锐的物品丢弃在一个尖锐物存放器皿内，用消毒剂浸泡。 用消毒剂擦净溢出物可能飞溅到的周围区域。 用消毒剂浸泡溢出物，并放在一个生物危害袋内。 用10％家用漂白液喷雾这个区域和并空气干燥，或在接触反应10分钟后用消毒湿巾擦掉。 用消毒剂或抗菌皂和水清洗手和暴露的皮肤部分。5、II级生物安全实验室溢出的处理