JACS|模块化重氮化合物对蛋白质的生物可逆后期修饰

图 1. (A) 重氮化合物 1 的设计，其三个部分以不同的颜色突出显示。 (B) 蛋白质羧基的生物可逆后期修饰方案。

图 2. (A) 1 和 HS-cR10 的模型蛋白和结构。 (B,C) 不含和含活性 Cys 残基蛋白的标记策略。相应的 Q-TOF MS 数据如图所示。数字 +1 等表示标签数量 ; “ max x ”为最大标签数 ; “ WT ”指的是天然蛋白。

图 3. 酯酶的剪切。 (A)PLE 介导的 MGA − 1 裂解的 LC-MS 分析。 (B − D) 与 PLE 孵育前后 GFP − 1 − TAT 、 Cyt c − 1 − cR10 和 Cyt c − 2 − cR10 的 Q-TOF MS 数据。“ WT ”指的是天然蛋白

图 4. 蛋白质的细胞递送。 (A) 通过生物可逆性修饰 cR10 的细胞质内蛋白递送的推测机制。 N 为羧基总数 ;X 为酯标签数。 (B) 5 μ M 的荧光图像 (i) GFP ， (ii) GFP − 1 − cR10 ， (iii) Cyt c − F ， (iv) Cyt c − F − 1 − cR10 与活 HeLa 细胞孵育 1.5 小时 (i,ii) 或 M21 细胞孵育 2.5 小时 (iii,iv) 在 FBS 补充的 DMEM 存在下。λ ex = 488 nm ， λ em = 500 nm 。比例尺 :50 μ m 。 (C) 用 Cyt C( 浅灰色 ) 、 Cyt C − BCN − cR10( 深灰色，如图所示 ) 或 Cyt C − 1 − cR10( 红色 ) 处理 41 小时后 M21 细胞的活力。数值为平均值± SD;***p ≤ 0.001 。