液相色谱流动相使用时的10个坏习惯,你中招了吗?
液相色谱流动相使用时的10个坏习惯,你中招了吗?
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我们在以前的文章中给大家讲过在流动相使用过程中应该做的事情,除了有所为,还要有所不为,那有哪些习惯是需要避免的呢?
通常情况下测量流动相的PH值,是测量 水相中的PH值 参数。有机相加入之后PH值参数的测量就和之前有误差。
PS:但如果能保证每次测量都是加入相同量的有机相之后得到的PH值,虽然这不能保证精确度,但是这能保证前后一致的测量结果,所以这样也没有问题。
缓冲盐的加入是用来 控制和修正流动相中PH值的改变 的。
样品基质、空气中的CO2、水中的杂质都会造成流动相PH值的改变,而PH值的改变会影响样品的保留、峰形、峰面积参数。
每个缓冲盐都有一定的缓冲范围,在此范围内它提供了最佳的pH稳定性。在这个范围外,缓冲盐在抵抗pH值变化方面是无效的。
所以要么 在正确的范围内使用缓冲盐 ,要么选择一个 缓冲范围覆盖所需pH值的缓冲盐 。
如果将水相的缓冲溶液加入到有机相中,会大大增加缓冲盐析出的风险。
缓冲盐的析出在初期可能并不明显,但会对仪器的各个部件都会产生一定影响。
(延伸阅读:做完样品记得移除系统中的缓冲盐哦!)
现在的液相色谱能够非常高效的进行在线脱气和流动相混合。但是将梯度洗脱比例从0%开始,会有比较大的 出现气泡和沉淀 的风险。
(延伸阅读:深度剖析等度洗脱和梯度洗脱的适用范围和方法设置)
缓冲溶液的修饰酸或碱,只使用 生成缓冲盐的酸或碱 。例如,磷酸钠缓冲液只能用磷酸或氢氧化钠调节。
例如只在方法中写“称5克磷酸钠溶入1000毫升水”。
缓冲盐的类型决定其pH缓冲范围,而 缓冲盐中所需物质的 浓度 决定了缓冲强度 。例如:5g的无水磷酸钠和5g的一水磷酸钠具有不同的缓冲强度,会影响保留率。
如果之前的方法在B通道使用缓冲溶液,而这次没有经过调查就直接在B通道使用了纯的有机溶剂,那么就会造成该通道 缓冲盐析出、出现堵塞 等风险。
溶剂瓶中的流动相如果用干,会导致仪器中 出现气泡 等问题。
超声脱气有一定的脱气作用,但完全脱气的效果并不理想。
所以在此建议使用 真空脱气机 进行在线脱气。
在使用流动相时,还有哪些坏习惯需要避免呢?欢迎大家分享自己的经验哦!
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