【干货】滴定仪的十大常见问题
【干货】滴定仪的十大常见问题
PREP_2019
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在滴定终点附近，被测离子浓度发生突变，引起 电极电位的突跃 。因此，根据电极电位的突跃可确定滴定终点。
01、
什么是等当点（EQP）滴定？
当样品中不断加入滴定剂，达到按照化学反应方程式的反应比例的摩尔量时，被测样品完全与滴定剂反应完全，反应终止。等当点即我们平时说的
“
拐点
”
、
“
突越点
”
或
“
转折点
”
。
以往来看，大多数精确的滴定测试原理为等当点 (EQP) 滴定。逐渐添加滴定剂的同时，根据电势和体积来绘制滴定曲线，并绘制出 一阶导数曲线。通过算法确定出一阶导数曲线的最大峰值，该点即是滴定和样品反应完全的等当点，如图1 ：
02、什么是终点（EP）滴定？
当样品中不断加入滴定剂，滴定到某一 pH 或 mv 值时，反应终止。如图 2 ：
03、电极应该保存在什么溶液中？
当存放一支复合电极时，理想的情况是保持电极的平衡。这个原理通常应用于有电解液流动的电极的参比部分。通常情况下，最好的保存介质是参比系统的电解液。
对于半电极而言，目前使用的主要有三种类型。
一种是通常的
pH
半电极，它的最佳存储介质是
pH=7
的缓冲液。常使用的半电极的第二种类型是
离子选择性电极
(ISE)
。多数
ISE
短时间的保持液通常是被测离子的稀释液
(0.001M)
，这可以保证电极随时可用；多数
ISE
长期的保存是干放。
第三个半电极类型是双接合部
(
或单接合部
)
的参比电极，它短时间的保持液是盐桥电解液，长期的保持是倒空电解液后干放。
04、为什么测量结果是估计结果的一半或2倍？
这种现象有二个主要的原因。一个是滴定管的大小没有被正确定义，如自动电位滴定仪中定义的是
10mL
滴定管，而实际使用的滴定管是
20mL
的。在这种情况下得到的结果将是估计值的一半。第二种可能性是计算公式中
z
（等量数或者化合价）的设置值的问题。这种情况，您应该知道滴定的真实等当点。最典型的例子是
HCl
滴定碳酸钠的含量。如果它的滴定在第一等当点以后结束，那么应该为碳酸盐的反应，对应的当量数应该是
1
而不是在写化学方程式时表示的
2
。这是因为这个反应是二步反应，碳酸盐首先反应生成重碳酸盐
(
碳酸氢盐
)
，然后只有继续反应才能生产二氧化碳、氯化钠和水。如果滴定一直继续到发现有气泡产生
(
有二氧化碳产生
)
，那么对应的
z
的确是
2
。
05、滴定曲线上有明显的突越，为什么我却得不到结果或结果为0？
这种形象有很多的原因，但最常见的原因是该方法中设置的阈值（
Threshold
）太高。将本次滴定的测量表格（
table of measured values
）打印出来，从一阶导数中查找最大的值。这个方法的阈值（
Threshold
）设置应该小于这个值。通常建议的阈值（
Threshold
）设置是陡峭曲线一阶导数最大值的
50
％，平坦曲线一阶导数最大值的
80
％。请记住阈值（
Threshold
）设置的主要目的是消除杂峰或不正确的等当点。没有结果的其他原因还包括但不仅仅是不正确的趋势（
Tendency
）设置、等当点的范围（
Range
）设置太小。
06、采用
自动电位滴定仪
的等当点滴定的结果为什么会与我采用指示剂颜色变化的手工滴定的结果不同呢？
当用
pH
指示剂进行酸碱滴定时时，这种结果上的差异通常是明显的。这种现象的第一个原因是这些
pH
值指示剂的颜色变化是有一定的
pH
范围，而非一个固定的
pH
值。实际的指示剂颜色的突变与被测样品密切相关，并且可能不与化学反应的等当点相符。这可以通过采用与样品测试同样的方法进行滴定剂浓度的标定的措施来尽可能降低这种差异。这个差异的第二个原因主要是人眼对颜色突变判断的敏感性。当颜色突变已经发生时，人眼可能仍未发现任何变化。这可以通过一个光度电极来演示这种变化。使用光度电极就能在人眼发现颜色突变之前轻易地发现在光度电极的透射率上有非常清晰的变化。在用光度电极代替
pH
电极监控典型的酸
/
碱滴定过程中，在信号上急剧的变化发生在极少一点过量的酸
(
或碱
)
添加后的那一刻，因此它正确地判断了一个更加真实的滴定终点。
07、当我用氢氧化钠(NaOH)进行滴定时，为什么有时会出现2个等当点？
氢氧化钠
NaOH(
或氢氧化钾
KOH)
有吸收二氧化碳形成碳酸钠的，生成的碳酸盐在样品滴定过程中也会与酸起反应。这导致有
2
个等当点的发生。新配制的氢氧化钠溶液经常会发现这种现象。此中的原因是用于配制溶液的固体氢氧化钠
(
经常是颗粒状
)
的表面也会吸收二氧化碳，形成碳酸盐薄层。要制备新鲜的没有碳酸盐的氢氧化钠溶液，唯一可行的方法是预先冲洗一下固体
NaOH
或使用新鲜制备的固体
NaOH
，同时需要用刚煮沸的去离子水
(
或蒸馏水
)
。一旦配好了这种溶液，您需要在试剂瓶上加一个充满
NaOH
固体的干燥管来保护溶液免受二氧化碳影响。一旦您用氢氧化钠
(
或氢氧化钾
)
滴定时发现有
2
个等当点的现象，建议您废弃这个溶液，重新配制新鲜的滴定剂。对废弃溶液的一种处理方法是将这个溶液煮沸，冷却后再用非常精细的滤纸进行过滤。
08、如何在自动电位滴定仪上进行方法的认证？
在自动电位滴定仪上认证滴定方法时，你需要检查的事项包括准确性、精度、可重复性、线性、系统误差、耐用性，以及检测极限。需要得到如何进行这种认证的更详细介绍，建议您参考网站的
“
质量控制（
Quality Control
）
”
下的
“
认证（
Validation
）
”
部分的内容。
09、进行TAN（总酸值）或TBN（总碱值）滴定时，随着样品的测量发现滴定的速度越来越慢，同时滴定曲线弯曲越来越平坦，最后我甚至都无法得到结果。这会是什么错误呢?
TAN
（总酸值）和
TBN
（总碱值）的滴定是用玻璃
pH
电极进行非水的酸碱滴定。为了保证玻璃
pH
电极工作正常，有必要保证电极底部的球状玻璃膜表面有一薄层水化
“
胶体
”
层。这种水化作用是将电极浸泡在水中一段时间而实现的。在非水酸碱滴定的过程中，水化色胶体层会慢慢地被脱水而导致电极得到较弱和较不稳定的测量信号。较弱的信号意味着信号的突越会比较小，同时取决于自动电位滴定仪的设置，可能会导致自动电位滴定仪无法正确识别这个突越。这个问题的解决方法是将电极在每个样品之间重新水化处理，同时这实际上也是由
ASTM
方法中测定
TAN/TBN
所要求的。这可以通过将电极用溶解样品的溶剂冲洗后再浸泡在水中
2
到
3
分钟来解决。
10、采用自动电位滴定仪进行EDTA或EGTA滴定时，为什么我还要调节被测样品的pH值或添加pH缓冲液？
多数采用 EDTA 和 EGTA 滴定剂的络合滴定的成功或失败主要取决于反应后稳定络合物的生成和指示剂的颜色变化 ( 如果采用颜色变化来指示滴定终点 ) 。金属 -EDTA 和 EGTA 络合物的稳定常数完全取决于溶液的 pH 值，因为 pH 值会影响生成的颜色指示的络合物的稳定性。因此，对大多数的络合滴定而言，调节溶液的 pH 值是非常重要的。除了 pH 值调节外，有时候需要添加 pH 缓冲液的原因是在生成金属配合基络合物的同时会伴随着质子（ H+ ）的生产，这会导致 pH 值的降低。
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基于中美药典及ICH指导原则的药品质量标准建立与分析方法开发验证培训班
时间： 11月10日-12日
地点：南京市
课程概述
药物分析方法的建立和应用是药物研发和质量控制分析的核心内容。伴随着法规对产品及其生产工艺生命周期管理的要求，制药企业如何从分析方法生命周期的角度开发高效的分析方法并应用于质量控制分析，是摆在全球制药行业研发和质量管理层面前的重要问题。为 此， 我们定于 202 3 年 11 月 10 日 -12 日 在 南京市 举办 “ 基于中美药典及 ICH 指导原则的药品质量标准建立与分析方法开发验证培训班 ”，
课程时间安排
11月11日
9:00-12:00 13:30-16:30
基于中美药典与
ICH
指导原则的药品质量标准建立规范化过程解析
一、如何依据中美欧药典及
ICH
指导原则确定质量标准研究内容
1
制剂通则规定及制剂特性要求
2
质量研究与制备工艺研究、稳定性研究之间的关系
二、如何依据中美药典与
ICH
指导原则建立分析方法
1
根据选定的研究项目及试验目的确认被选择分析方法所要达到的目标
2
原料药及制剂生产分析方法选择及质量控制
3QbD
分析方法设计与产品质量控制
4
原料药和制剂特性品质的建立
三、如何依据中美药典与
ICH
指导原则确定质量标准的项目及限度
1
残留溶剂限度控制及限度制定依据
2
杂质和降解产物的控制及限度设置
3
举例说明：①原料药的进厂检验标准的制定；②进口药品注册标准的起草；③放行标准与货架期标准的比较等
四、如何撰写符合中国药典格式的质量标准
1.
不同研发阶段的质量标准制订关注点
2.
依据中国药典的规范用语及格式制订出合理、可行的质量标准
3.2020
版药典中关于色谱法新体例格式解读等
4.
实例说明质量标准叙述中应注意的问题
主讲人：张老师 北京市药品审评专家，北京药监局新药研制现场核查专家， CFDA 高级研修学院客座讲师。在北京市药品检验所任职近 30 年，主要负责药典标准的起草和复核、国内新药的审批以及进口药品的质量标准复核工作。
11月12日
9:00-12:00 13:30-16:30
基于
ICH
指导原则
的分析方法
开发
验证
一、
ICHQ14分析方法开发要求细读与启示
1）
引言
-Q14背景、关键原则、指南目的、期望的获益
；
2）分析方法目标配置文件(ATP)研究；
3）分析方法开发和持续改进的知识和风险管理 ；
4）分析方法耐用性和参数范围的评价 ；
5）分析方法控制策略-分析方法既定条件；
6）分析方法生命周期管理和批准后的变更；
7）开发多变量分析方法
8）开发实时放行检测分析方法-特殊考虑
9）分析方法相关信息的提交
10）实例分析
例
1 小分子药物中作为特定工艺有关杂质的异构体测量
例
2 抗肿瘤坏死因子 α 单克隆抗体的效价测量
二
、基于
USP与ICH的分析方法验证
1)
方法验证基本要求
1 分析方法验证适用范围 2.分析方法的生命周期管理
3 可报告范围确定 4 稳定性指示方法 5 多变量分析方法
2)
分析方法验证的主要内容及关键要点
1专属性评估，多种方法验证方法的专属性
2准确度实验设计原则和可接受标准
3精密度实验设计原则和可接受标准
4 工作范围确定
4.1 校准模型建立 线性或非线性和范围设计的基本原则
4.2 低范围限的验证，检测限和定量限的评估
5方法耐用性的设计和评价
6 系统适用性试验的选择
3）
《分析方法确认指导原则》解读
4）
《分析方法转移指导原则》解读
主讲人：王老师 原省药检验院副院长、主任药师
会务费
培训报名联系人 ： 王老师
微信/手机：15506140531（微信同号）
报名参加此培训课程单位赠送 中国药典格式质量标准撰写实操及案例分析课程 （共计 6课时）
一、 《 质量标准通用格式和撰写指南 》 (2021 第 32 号 ) 解读
二、中国药典格式的质量标准的主要内容
1. 体例格式要求（编排顺序、段落、字体、行间距等方面的要求）
2. 符合“凡例”规定的文字术语、计量单位和数字符号
3. 检测方法叙述注意事项举例说明及与试验方案在行文表述上的区别
三、中国药典格式质量标准撰写要求详解
1. 药品名称、结构式、分子式与分子量的格式要求
2. 化学命名的要求与常见错误
3. 含量（或效价）的限度规定规范书写要求
4. 如何撰写药品的性状要求，包括外观、臭、味以及物理常数等；
5. 色谱法、光谱法等鉴别试验撰写的要点分析
6. 有关物质与残留溶剂检测项溶液制备、色谱条件、系统适用性要求、测定法、限度撰写要求与常见错误分析；不同计算方法的表述差异对比
7.AAS 法检测元素杂质检测项撰写要求
8. 溶出度、含量均匀度项下检测方法与含量测定一致或不一致的撰写对比分析
9. 微生物限度、内毒素、无菌等生物安全性检测项撰写要素分析
10. 容量法、色谱法、效价等不同检测技术的含量测定撰写对比分析
11. 纯度测定与纯度项规范撰写要求
12. 类别、规格、贮藏、有效期的规范格式与常见错误分析
三、质量标准起草说明包括哪些内容及注意事项
会议培训汇总
| 地点 | 时间 | 会议主题（如需了解详情请点击文字链接查看） |
| 南京 | 11 月10-12日 | 【南京】符合ICH与药典的质量标准建立与分析方法开发验证转移确认 |
| 杭州 | 11 月16-18日 | 【杭州】 中外新版指南的制药厂维护管理与实操 |
| 上海 | 11 月16-18日 | 【上海】 医学监查的高效管理与实施要点案例分析及实操 |
| 线上 | 11 月18-19日 | 【线上】 2023注册经理能力全面提升实战 |
| 线上 | 11 月18-19日 | 【线上】 蛋白纯化工艺开发及放大要点与工艺验证和保存稳定性策略与应用 |
| 南京 | 11 月24-26日 | 【南京】 质量负责人/质量受权人（QP） |
| 南京 | 11 月24-26日 | 【南京】 药理模型建立及方法学研究 |
| 线上 | 11 月25-26日 | 【线上】 抗体类药物制剂开发全流程精讲 |
| 线上 | 11 月28-29日 | 【线上】 制药高活性产品共线的风险挑战及关键要点案例分析 |
| 南京 | 11 月30-12月2日 | 【南京】 立项信息解读和科研成果转化 |
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