测定蛋白质的四溴荧光素分光光度法

在pH=2.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲液中,牛血清白蛋白(BSA)与四溴荧光素(TBF)形成复合物,在波长540 nm处有最大吸收,比四溴荧光素本身的最大吸收红移25 nm.对不同pH值及离子强度对其结合作用的影响进行了探讨,并研究了各种实验条件对反应体系的影响,确定了最佳反应条件,制订出BSA测定标准曲线.在四溴荧光素浓度为1×10-5 mol·L-1时,其线性范围为0.05～12 mg·L-1,检出限为23 μg·L-1(S/N=3),方法稳定性好,检测灵敏度高.该方法用于实际样品的测定,结果令人满意.