改进铜皂-分光光度法测定脂肪酶活力

建立了一种改进的脂肪酶活力的检测方法.以乳化橄榄油为底物,用乙醇和盐酸终止酶反应,并使底物乳液破乳,用异辛烷萃取生成的脂肪酸,并用醋酸铜显色.通过铜皂的吸光度来测定生成的脂肪酸的量而得到脂肪酶的活力.主要研究了异辛烷萃取乳化体系中脂肪酸的条件,测定了脂肪酸的萃取百分率和该方法检测的线性范围.用改进的方法对两种脂肪酶的活力进行了检测,并与传统的滴定法进行了对比.结果表明,在优化的萃取条件下脂肪酸的回收率为83.68%,该方法的线性范围为吸光度(OD值)0.154～0.291.改进的铜皂-分光光度法测定结果的重复性优于滴定法.由于该方法的测定不受反应体系的缓冲性的影响,测得的酶活力-pH曲线更准确.