酚氧化酶活力测定方法中关于测定时间的研究

以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)血清酚氧化酶为材料,采用Ashida的分光光度法测定了不同活力酚氧化酶与L-DOPA在60 min内每2 min生成物的吸光度以及计算了不同时间的酚氧化酶活力.结果显示,当测定时间为60 min时,随着酚氧化酶活力升高,吸光度与测定时间的直线相关系数逐渐降低,反映了测定的酚氧化酶活力准确性也越差,与其他已报道的南美白对虾(Penaeus vannamei)、中国对虾(Penaeus chinesis)和中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)等虾蟹类及昆虫(Pieris rapae)的酚氧化酶活力测定结果相似.与6 min时的相关系数和酶活力计算结果相比,当测定时间长于12 min时相关系数显著变小(P﹤0.05),而短于6 min时也有变小的趋势;当测定时间长于10 min时酚氧化酶活力计算结果显著变小(P﹤0.05).通过不同测定时长的相关系数以及酚氧化酶活力计算结果的差异性比较,得出酚氧化酶活力测定最为准确的测定时长(t)为6 min≤t＜10 min,最佳时长为6 min.