利用聚乙二醇提取山核桃外壳单宁的研究

利用聚乙二醇提取山核桃外壳单宁的研究口方苗利【内容摘要】单宁是一类应用广泛的医药中间体。山核桃外壳是山区的一种可再生资源。为了有效地使山核桃外壳变废为宝本文研究了利用聚乙二醇400从山核桃外壳中提取单宁的方法。讨论了不同的温度,不同的提取时间,不同质剂比对单宁提取率的影响,并采用正交实验,锌离子络合滴定法測定提取液中的单宁含量,得到了最佳浸提条件:提取剂为25%聚乙二醇400,时间为8小时,温度为80℃,溶剂与溶质比为6:1【关键词】山核桃外壳;单宁提取;聚乙二醇【基金项目】本文为浙江省医药卫生一般研究计划(编号:2012KYA055)项目成果【作者简介】方苗利(1966~),女,浙江诸暨人;浙江医学高等专科学校高级实验师;研究方向:化学实验技术、卫生检验技术单宁是一类广泛存在于植物叶、果实、根及树皮等部位醋酸锌为络合沉淀剂加到植物多酚溶液内,在pH=10,温度的多元酚化合物。多元酚结构赋予单宁一系列独特的化学35℃下反应30分钟,溶剂内多余的Zn2以乙二胺四乙酸二性质,能与蛋白质、生物碱和多糖结合,在物理和化学行为钠滴定。lmL(lmol/L)醋酸锌消耗0.1556g上发生变化,能与多种金属离子发生络合或产生静电作用植物多酚含量W%=0.1556×V/G×100%具有还原性、捕捉自由基的活性、以及两亲结构和诸多衍生其中:0.1556为实验常数;Ⅴ为1M醋酸锌标准液的络合化反应活性等。因此,单宁在医药、食品、化工、农业、材料等沉淀消耗量;G为样品重量。领域应用广泛。在生理活性方面用于止血、抑制微生物、抗具体步骤:取分析溶液倒入500mL烧杯中,加水至约过敏、抗突变、抗癌、抗肿瘤和抗衰老等活性也在近年来逐渐300mL。置(35±2)℃水浴中预热。精确量取20 mL Imol/L被人们所认识和关注醋酸锌溶液于500mL容量瓶中,加14mL氨水,摇匀使白色山核桃是福建、浙江、安徽等南方山区盛产的特优产品,沉淀溶解,缓慢定量移入预热溶液,边移人边振荡,移毕继续每年的产量几十万吨,产生大量的山核桃外壳,污染环境、危振摇1分钟,置水浴保温30分钟,间歇振摇数次。待反应完害动植物的生存。而山核桃外壳含有酚类化合物、鞣质、有毕,冷水冷却至水槽(20±1)℃,定容,摇匀。取反应溶液离机酸、生物碱、氨基酸、肽、蛋白质、糖、多糖、配糖(甙)、皂甙、心5分钟,取上清液精确量取20mlL,加300mL水、25mL氯甾体、黄酮体、香豆素、萜类内脂化合物和蒽醌类九大类化合化铵-氨水缓冲液(pH=10)和mL铬黑T,以0.05mo/物。如果将这些废弃的山核桃外壳进行综合利用,既保护了EDA·2Na滴定至溶液由酒红色变成暗蓝色,并用空白校人们生存的生态环境,也为地方经济创造了良好的经济效正益。聚乙二醇(PEG)结构式为CHOH-(CH2CH20)表1单宁提取的因素水平CH0H,是一种易溶于水、生物相容性好、无毒副作用且价格水平溶剂时间温度质剂比低廉的高分子聚合物。PEG自身及其衍生物可以广泛应用25%聚乙二醇400在修饰蛋白、包裹药物等生物医学领域。因此,本文通过利50%聚乙二醇400用聚乙二醇作为提取剂对山核桃外壳提取单宁进行研究,并通过正交实验确定最佳的工艺条件。实验部分表2单宁提取的正交方案(-)仅器试剂和原料。试剂:乙二胺四乙酸二钠,乙水平溶剂时间温度质剂比醇,氨水,氯化铵,醋酸锌,铬黑T,聚乙二醇400;仪器:SSW125%聚乙二醇型电热恒温水槽、PHSJ-3F型实验室pH计、电热恒温鼓风25%聚乙二醇干燥箱、TDL-40B离心机、BYY-300药品冷菌箱。试剂均二醇为市购化学纯50%聚二醇二)单宁的提取。将30℃烘干除杂质的核桃外壳10g345650%聚乙二醇40002802100粉碎,装入25mL的锥形瓶中,在不同温度、不同时间和不同%聚乙体积的提取剂中,搅拌浸提后,趁热过滤,洗涤,用络合滴定789中国煤化工法测定单宁含量(三)单宁含量的测定。本文采用络合滴定法测定CNMHG2含量。Zn2有较好的选择性,只与植物多酚络合。以过量的四)正交实验方案。确定了对提取率有较大影响的溶03剂(A);浸提时间(B);浸提温度(C);溶质与溶剂比(D)4个因素。每个因素选择3个水平,按正交设计[L2(42)]法寻找最佳工艺条件。因素水平表和正交方案设计表分别见表1和表2。二、结果与讨论y98表3单宁提取条件的正交实验方案及其结果因素试验号单宁单宁编号溶剂时间温度固液含量率/%提取时间h25%聚乙二醇8501:58.460.10331.033图2时间-提取率效应曲线25%聚乙二醇10801:68.330.107210.72三)提取温度对单宁提取率的影响。结果表明,当温325%聚乙二醇121001:78.50.060.06度为80℃时提取率高于其他水平但是随着温度升高单宁的450%聚乙二醇8801:78.620.097987提取率又会出现降低,因此选择浸提温度为80℃为宜50%聚乙二醇101001:58830.09179.17650%聚乙二醇12501:68.770.09369.367聚乙二醇4081001:68.770.09369.368聚乙二醇40010501:78.720.09569.569聚乙二醇40012801:58.880.08978.97总和K因子水平1水平2水平3溶剂31.128.4027.84506取盈A00时间图3温度-提取率效应曲线温度(四)质剂比对单宁提取率的影响。从结果分析,液料质剂比2847294429,49配比为1:7时单宁的提取率仍有上升趋势,但是从上升的趋均值k因子水平1水平2水平3势来看不是很明显,而且从成本考虑不实用,因此,质剂比选溶剂10.37947930择1:6较为合适时间9859.8294630.0温度9759.859.53质剂比9,49.819.8329.5因子极小值极大值差值R调整R溶剂9.3010.371.070.97时间9.469.850.390.35哥285温度质剂比949.830.340.30(一)提取溶剂对单宁提取率的影响。结果表明溶剂对提取率的影响程度次序为:1(25%聚乙二醇400)>2(50%聚图4质剂比一提取率效应曲线乙二醇400水溶液)>3(聚乙二醇400),从效应曲线可以看结论出,25%聚乙二醇400是提取单宁得率最高的溶剂。通过以上正交实验研究可知,从山核桃外壳中提取单宁的最佳工艺条件为:提取溶剂为25%聚乙二醇400,浸提时间为8h,温度为80℃,溶剂与溶质比为6:1。该方法简单易行提取率高,特别是利用聚乙二醇做提取剂,是一条安全无毒适合工业化生产的绿色提取方法。【参考文献】1.张建,李宝坤,毛晓英.超声波提取葡萄梗中单宁的硏究[J].安徽农业科学,2008提取剂2.胡永祥,牛津梁,张文博.聚乙二醇修饰药物技术的研究进图1溶剂-提取率效应曲线展[J].中国生化药物杂志,2004(二)提取时间对单宁提取率的影响。结果表明,随着时3.曹中国煤化工工艺条件研究[]江西林间的增加,提取率呈现下降的趋势,当浸提时间为8h时提取业科THCNMHG率最高,时间增加单宁的提取率反而下降