河南省蝙蝠科2种蝙蝠的核型研究

贵州农业科学2006 34(6)16~18Guizhou Agricultural Sciences[文章编号]1001 -3601( 2006 )06-0303-0016-03河南省蝙蝠科2种蝙蝠的核型研究余燕'2,马金友' ,牛红星’( 1.河南科技学院动物科学系,新乡453003 ;2.河南师范大学生命科学学院,新乡453007 )[摘要]采用取骨髓蒸汽固定法对河南省蝙蝠科2种蝙蝠的核型进行了研究。结果:东亚蝙蝠的染色体数为2n=38,N.F=50与国外的研究一致而与金清波的研究迥异。东亚伏翼的染色体数为2n=26 N.F =44与印度小伏翼、伏翼及印度伏翼的核型非常相似属于伏翼属较为进化的类群。[关键词]核型;蝙蝠科;蝙蝠;河南[中图分类号] 0Q959. 833[文献标识码]AKaryotypes of V. superans and P. abramus in HenanYU Yan'2 , MA Jin-you' , NIU Hong-xing2( 1. Department of Animal Sciences , Henan Science and Technology College , Xinxiang 453003 ;2. College of LifeSciences , Henan Normal University , Xinxiang 453007 , China )Abstract : The karyotypes of V. superans and P. abramus in Henan were studied by the bone marrow cell and steam-fixationmethod. The results show that the diploid chromosome number of V. superans is 38 , which is the same as the results studied by foreignresearches and different from that reported by JIN Qing-bo , and the diploid chromosome number of P. abramus is 26 , which is similarwith the karyotypes of P. mimus P. pipistrellus and P. coromandra and belongs to a more developed group in Pipitrellus.Key words : karyotype ; vespertilionidae ; bat ; Henan蝙蝠是翼手目( Chirptera )动物的俗称是哺乳而且还减少了由于使用大量农药所造成的环境污类中分布最广、数量 最多的动物之一。绝大多数蝙染。另外;蝙蝠的排泄物还是-种经济、优质的农业蝠捕食昆虫,它们是数量巨大的夜行性昆虫(包括肥料。对河南省蝙蝠的研究除周家兴等31、金蚊、蛾及许多鞘翅目害虫)最重要的控制者。研清波等4]、宋朝枢和瞿文元等S]在相关论文和调究表明,1只蝙蝠每个夜晚能吃掉相当于自身重量查集里零星报道外至今尚无人对其进行专门研究。1/3的昆虫,即1只20g的蝙蝠1夜可吃掉200~为此,1000只昆虫[2。这不仅有利于农林业的健康发展，[收稿日期] 2006-05-09 ; 2006-08-28 修回[基金项目]河南省科技攻关项目资助0224070051 )河南省动物学省级重点学科资助[作者简介]余燕( 1972- )女硕士,讲师从事动物学研究。*通讯作者不发达我们认为输卵管腺与分泌细胞所分泌的输blastocyst stage with oviductal tssue or in conditioned medium卵管液有限。除为受精卵提供少量的营养物质外,[ J ]. Reprod Fertil ,1989( 85 ) 715-720.主要是为受精卵的分裂、发育和运行创造一个适宜[ 6 ] Hadj K ,Abdelhaq A ,Ahmed T. Production of dromedary embryosby IVM and IVF and co-culture with oviductal or gmulosa cells的微环境。[ J] Theriogenology 2004( 62 ) 1175-1185..[7]北京农业大学.家畜组织学与胚胎学[M]北京:中国农业出[参考文献]版社,1982 234-235.[1]成勇鞠辉明李峰等.新鲜山羊输卵管液对体细胞克[8]沈霞芬.家畜组织学与胚胎学[M]北京:中国农业出版社,隆和转基因胚胎体外发育的影响J].扬州大学学报(农业与2001 209-210.生命科学版) 2005 26(2)37-40.[9]中国农业大学.家畜繁殖学[M]北京:中国农业出版社,[ 2 ] Abe H Sendai Y SatohT et al. Secretory products of bovine ovi-2000 17-18.ductal epithelial cells support viability and mortality of bovine[ 10] Horst-Dieter Dellmann ,Esther M. Brown. Textbook of Veterinaryspermatozoa in culture in vitnc[ J] Exp Zool 199( 272 ) 54-61.Histology[ M ] United States of America 1981 322 -324.[ 3 ] KimN H Funahashi H Abeydeera L R et al. 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Co-culture of early cattle embryos to the第6期余燕等河南省蝙蝠科2种蝙蝠的核型研究7.作者对河南省蝙蝠科2种蝙蝠即东亚蝙蝠(Vesper-固定液I加入新鲜固定液II(无水乙醇:冰醋酸tilio superans )东亚伏翼( Pipistellus abramus )的核=1: 2) ,固定15 ~ 30min。 ( 6 )取出载玻片,用新型进行了研究。配的固定液II轻轻冲掉低渗液放置在空气中干燥,以5%的Giemsa( 0. 2 mol/L磷酸缓冲液配制,pH 6.1材料与方法8 )染色8 min蒸馏水冲洗晾干。1.1材料在显微镜下选取染色体分散好的细胞100个以东亚蝙蝠1雄于2003年7月采自河南科技学上统计染色体数目确定2众数。每种选10个着院院内东亚伏翼2雌于2004年8月采自信阳县丝粒清晰、分散好、背景清晰、染色体平直的中期分农家屋檐下。以上个体均为性成熟个体。裂相拍照后放大并测量,计算出每- -染色体的相对1.2方法长度和臂比根据Levan等81的标准进行染色体分染色体制备参考吴政安的蒸汽固定法7]并作类依染色体的长度和着丝粒位置将染色体配对、编适当改进。( 1 )蝙蝠采回后立即将每只蝙蝠按号得到核型图。2μg/g的剂量腹腔注射0.02%秋水仙素4h后取蝙2结果蝠前臂长骨。(2)在培养皿中放入玻璃棒,在玻璃棒上放洁净的载玻片。( 3 )用蒸馏水冲去长骨上附观察蝙蝠科2种蝙蝠骨髓细胞中期分裂相统着的血液,吸低渗液将长骨骨髓吹散于载玻片上。计结果(表1)2种蝙蝠的染色体测量数据见表2,(4)向培养皿中加新鲜的固定液I(无水乙醇:冰核型见图示。醋酸:蒸馏水=1:2:3),固定2~3h。(5)吸出表12 种蝙蝠的染色体数目Table 1 The diploid chronomne number of two bats .种名观察细胞数二倍染色体数No. of diploid chromosome染色体众数% )Specifie nameNo. of cells observed:38=38>38<26=26> 26Model counts东亚蝙蝠 V. superans10r8东亚伏翼P. abramus888》888能裁88888..BA.东亚蝙蝠中期分裂相B.东亚蝙蝠核型图箭头所示为次缢痕A.东亚伏翼中期分裂相B.东亚伏翼核型图.A. The metaphase of V. superans B. The karyotype of of V. super-A. The metaphase of P. abramus ，ans , Secondary constriction is indicated by the arrow.B. The karyotype of P. abramus图示东亚蝙蝠和东亚伏翼的中期分裂相及核型图rig. The melaphase and the karyotype of V. supeans and P. bramus东亚蝙蝠:观察统计了东亚蝙蝠132个中期分( 图示右)。参考同属的其它蝙蝠推断X染色体是裂细胞其中108个细胞有38条染色体即2n众数较大的端着丝粒染色体。是38( 108/132 x100% =82% )故该种蝙蝠的染色体数是2n=38。在18对常染色体中,有6对大型3讨论中部着丝粒染色体,-对小型亚中部着丝粒染色体,东亚蝙蝠(V.superans)的染色体数2n=38其余为大小依次递减的端部着丝粒染色体,N.F=N.F=50与Oh[9]报道的同种蝙蝠的核型相同,即50(图示左)其中,No.8有明显的次缢痕,X染色体在18对常染色体中,有6对大型中部着丝粒染色为-中等大小的中部着丝粒染色体,Y染色体为一体,-对小型亚中部着丝粒染色体其余为大小依次小的端部着丝粒染色体。递减的端部着丝粒染色体。其中,No.8有明显的次东亚伏翼:共观察统计了110个中期分裂细胞,缢痕中国煤化工的中部着丝粒染色体,其中98个细胞有26条染色体,即2n众数是26Y染YHcNMHQ染色体。金清波等[41( 98/110x100% =89% )故该种蝙蝠的染色体数也曾对V. superans 的核型进行了研究,报道其染色是2n=26。在12对常染色体中除No.5~No.7是体数目为2n=26 ,N.F =48常染色体中有10对中亚中部着丝粒染色体、No.11 ~ No. 12是微小点状染部着丝粒染色体2对微小点状染色体,X染色体为色体外,其余全部是中部着丝粒染色体,N. F =44亚中部着丝粒染色体。从染色体的组型看其报道贵州农业科学200634卷.的核型与本文及国外对东亚蝙蝠的核型研究结果迥守而第2、3种核型与其假设祖先相比2n数减少异9] ,而与我国已报道的伏翼属的核型相似。但N.F值保持恒定故认为这2种核型是由其假设Bickhamt 10]将蝙蝠科蝙蝠的核型划分为3个类祖先2n=44,N.F=50的核型通过罗伯逊融合演化.型第1种类型保持核型上的原始特征,即染色体数而来第4种核型其2n数和N.F值均减少,其核目多端部着丝粒染色体多第2种类型具有较少的型进化可能还伴有微小染色体的丢失是该属中较染色体数目和较多的双臂染色体;第3种类型的染为进化的类群。不同地理分布的蝙蝠其进化程度不.色体数目由于着丝点的融合而变得更少。本文研究同或不尽一致 来自塔吉克的P. P. bactrianus5 14]属的东亚蝙蝠的核型则属于第2种类型(表2 )。于第1种类群即较原始的类群，来自印度的茶褐伏表2东亚蝙蝠和东 亚伏翼的核型参数翼( P. affinis )141属于第2类群;来自北美的东方伏Table 2 The karyotype parameter of V. superans and P. abramus翼( P. subflavus )I4则属于第3类群。这些不同地东亚蝙蝠( V. superans )东亚伏翼(P. abramws)理区域之间同属不同种间核型模式的差异,说明了编号相对长度臂比类型相对长度NumberRelativeAmmAm伏翼属的祖先在长期的进化过程中,由于地理隔离,lengthratioType所受环境压力的不同产生了分化形成了不同的种11.55 :0.19 1.08+0.08 m11.61士0.11 1.18 +0.0410.84土0.23 1.18 土0.05 m10.67土0.09 1.24 土0.06群。10.01土0.13 1.16 +0.09 m10.12+0.12 1.58 土0.049.65 +0.12 1.18 +0.069.53 +0.08 1.35 +0.05 1[参考文献]9.39士0.13 1.14 +0.10 m9.10 +0.88 1.93土0.038.77 +0.12 1.13+0.06 m8.65 +0.111.93士0.03[1]冯江李振新,张喜臣.我国蝙蝠保护研究的现状及对策2.59 +0.11 2.57 +0.16 sm8.16 +0.06 1.95 +0.05 sm[ J].东北师范大学学报2001( 2) 60-65.5.11 :0.157.59+0.15 1.26+0.04 m[ 2 ] Gareth Jones. Conservation biology of an endangered species :4.13土0.117.07 +0.10 1.21 土0.08field studies of greater horseshoe bat[ J ] Symp Zool Soe Lond ,3.74土0.096.35士0.11 1.11 士0.071995( 67 ) 309-3241.3.25 :0.113.40士土0.082.38士0.10[3]周家兴瞿文元.河南省哺乳动物名录[J]新乡师范学院学3 2.84 +0.10报1961( 2)45-52.14 2.70土0.07[ 4 ]金清波孙庆平.东方蝙蝠的染色体组型分析[J]新乡师范5 2.32土0.06学院学报,1984( 1 ) 83-88.2.16土0.08[ 5 ]宋朝枢,瞿文元.董寨鸟类自然保护区科学考察集[ M].北1.92 士0.05 .京:中国林业出版社,1996.5.55 +0.09 1.13 土0.03 m5.38 +0.10 .[ 6 ]宋朝枢瞿文元.太行山猕猴自然保护区科学考察集[ M]北.2.45土0.09油Note ) m :中着丝粒染色体( Melacentrie chromosome );[7]吴政安.两栖类骨髓细胞的染色体标本制作法[J]遗传,sm亚中着丝粒染色体Subetacentrice chromnosome );1982 A( 1 ) 38-39.t端着丝粒染色体( Telocentie chronosome )。[ 8 ] Levan A , Fredga K , Sandberg A. Nomenclature for centroneric作者研究的东亚伏翼的核型与殷留勇等"的position on chromosorn[ J ] Hereditas 1964( 52 ) 201 220.研究结果基本-致,同时与国内已报道的印度小伏[ 9 ] Oh YK. A Karyotype study in Chiroptera( bats )[ J ] Yonsei翼[2]小伏翼12]、伏翼和印度伏翼I3]有非常相似的Medical Journal ,1975 ,16( 2) 47 53.核型均为2n=26 ,N.F =44常染色体中有10对中[ 10 ] Bickham JW. 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