蒜氨酸在大鼠的药代动力学研究

2004年3月中咸药第26卷第3期Chinese Traditional Patent Medicineo.26No.3短,但很容易吸潮,而比例小时(枸橼酸占片重的[4]杨保稚紫草油治疗宫颈廉烂临床疗效观察]」中西医结合20%)发泡量达不到要求,当构橼酸占片重的25%杂志,1986,6(4):237时,崩解及发泡量均能达到要求。5]刘小华,易建勇紫草提取纯化工艺优选及稳定性研究J中药材,2001,24(5),357参考文献6]陈敏用均匀设计法优选紫草素的提取工艺[J].中国医院药学杂志,2001,21(4),251[1]叶碧波胡明紫草的研究概况[].中国中医药科技,199,4[7]蔡恩照,王承颂紫草油的制法和含量测定方法的操讨[J中成药研究,1984[2]卢贺起,丁家欣紫草的实验研究进展[J]中国中医药信息[8]谢秀琼邱明丰对制剂中紫草成分和提取工艺的探讨[杂志,1998,5(1):20中国药房,19978(2):60[3]张荣芝.复方紫草油治疔宮颈麋烂130例【J.中国农村医[9]梁树炎硝唑阴道泡腾片的制备[]中国医院药学杂志学,总(596)1999,19(8),496蒜氨酸在大鼠的药代动力学研究常军民1,向阳2,美丽万1,陈坚1(1.新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830054;2,新骚医科大学一附院新疆乌鲁木齐830054)关键词:蒜氨酸;高效液相色谱法;大蒜;血药浓度;药代动力学;大鼠摘要:目的建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中蒜氨酸的浓度。方法:用HPLC法,色谱柱为 Kromasil ODS1(5m,4.6mm×250mm),流动相为100%水,流速0.5 mL. min-1,柱温25℃,紫外检测波长220mm。结果:蒜氨酸浓度375mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9989)。样品平均回收率为95%。日内H间精密度的RSn均小于5%。大鼠灌胃给蒜氨酸300mgkg1后,其主要的药动学参数为:CL(0048) mg.min kg1,K12(0.0071)min-1,K21(0.0093)1915)min1,t12(26.85)min,t29(131.5)min,AUC(622848) umin . mL。轴论;本法简单靠,可用于蒜氨酸血药浓度分析及其药代动力学研究。中图分类号:R969.1文献标识码:A文章编号:10011528(2004)03018402Pharmacokinetics of alliin in ratCHANG Jun-min, XIANG Yang, MEI Li-wan, CHEN Jian'(1. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumgi 830054, China; 2. First Haspital Affiliated to Xinjiang Medical UniversityUrumgi 830054, chinaKEY WORDS: alliin; HPLC; Allium sativum L; plasma drug concentration; pharmacokineticABSTRACT: AIM: To develop an HPLC method for determintion of alliin concentration in rat plasma and tostudy its pharmacokinetics in rat. METHODS: The plasma samples were extracted with methanol. The analysisvolved a ODS-1 column as stationary phase and distilled water as mobile phase. The flte0 5mL min "I, uv detection wavelength was at 220nm. 5-fluorouracil was used as the internal standardRESULTS: The calibration curve was linear over the range from 3ug"to 75ug'mL" with a correlation co-efficient of 0.9989. The mean recovery was 95%. The RSd of within-day and between-day were all less than5%. The HPLC method of determination of alliin in the plasma was established After single dose of 300mgmL-l in 6 rat, the main pharmacokinetic parameters were estimated to be as follows: CL(0. 048)mg.minkg1,K12(0.0071)min,K21(0.0093)min-1,K2(0.1915)min-,tna(26.85)minl,t2p(131.15)min收稿日期:2003-1015作者简介:常军民(1965-),男,副教授,博土。电话:09914362471:EH中国煤化工CNMHG1842004年3月中成药Mar.,2004第26卷第3期Chinese traditional patent medicineVol 26 No. 3AUC(6228. 48)ug'min .mL. CONCLUSION This method is quick, precise and reliable. It is shown thatalliin is absorbed quickly in rat蒜氨酸(Alin)化学名为;S烯丙基一L半胱氨酸亚砜( S-allyl-L-cysteine sulfoxide,SACS)是百合科葱属植物大蒜( Allium sativum I.)中独特的含硫氨基酸。为无色结晶,无嗅无味,性质稳定。研究表明具有降血脂,抗动脉粥样硬化,提高机体免疫力等作用。有关在动物的药代动力学研究仅有一篇文献采用3s标记蒜氨酸在大鼠体内的动力学研究2,我们采用反相高效液相色谱法研究蒜氨酸在大鼠体内的药代动力学1材料与方法mAU1.1仪器HP1100高效液相色谱仪,wD紫外检测器,HP化学工作站。高速台式离心机,旋涡混合器 Kromosil ODS.1(5pm,4.6mm×250mm)。1.2药品与试剂蒜氨酸,本实验室自制,为无色结晶。经紫外、红外、质谱、核磁共振确认结构HPLC测定含量为95%以上,5氟尿嘧啶,新疆制药厂。甲醇,分析纯,水为高纯水。1.3标准溶液配置精密称取蒜氨酸标准品15mg,用水溶解后移人25mL量瓶中稀释至刻度,图1HPLC样品色谱图即得0.6mg·mL1的标准品贮备液,冰箱4℃备用。A.空白,B样品同法配制0.18mgmL5-氟尿嘧啶水溶液,作为内蒜氨酸,2内标标溶液,冰箱4℃备用。Fig 1 HPLC Chromatograms of samplesA-blank plasma: Bplasma sample1.4色谱条件色谱柱: Kromasil ODs-1(5m,alllln 2 interal standard46mm×20mm);流动相:水流速0.5 mL. min-1,进样量101lL,测定结果以蒜氨酸峰面积与内标峰面柱温:25℃,紫外检测波长22m,灵敏度:积之比Y对蒜氨酸血浆浓度X(rgmL-1)进行线0.002AUFS;进样量10μL。性回归,回归方程1.5血浆样品的提取分离取血浆样品0.mL,加Y=0.03026x+0.08961,r=0.9989。内标溶液10l,水90L,加入0.2mL甲醇涡旋混合实验表明蒜氨酸血浆浓度在3~751pgmL-范围1min,1200:min-1,离心7min。取上清液呈良好的线性关系。0.45μm滤膜过滤,取10μ进样,用峰面积进行定2.3回收率与精密度试验量分析。2.3.1方法回收率用空白血浆配置含蒜氨酸分2结果别为3,15,60gg·mL1的标准血样,按“血浆样品的2.1色谱系统适用性提取分离”项下方法操作,连续测定5次,平均方法在本色谱条件下,蒜氨酸与血浆样品中的杂质回收率分别为90.1%,92.3%,102.6%。RSD为峰分离良好,与所选内标分离良好,峰形好,样品峰4.3%,23%,1.4%(n=5)与杂质峰分离度>1.5,见图1。2.3.2精密度用空白血浆配置含蒜氨酸2.2血浆中蒜氨酸标准曲线的制备30g·mL的标准血样,按上述“血浆样品的提取取大鼠空白血浆6份,每份0.1mL,精密加入不分离”操作,连续进样5次,测定峰面积,RSD为同量的蒜氨酸储备液,分别加入内标10,按照“血浆样品的提取分离”项下操作,使蒜氨酸最终浓度分TH中国煤化工g·mL1的标准别为3,75,15,30,45,60,75pg·mL1。分别进样CNMHG下方法操作,在1d2004年3月中成Mar.,2004第26卷第3期Chinese traditionalMedicineVol 26 No. 3内不同时间点进样,测得标准血浆的日内RSD为CL(0.048) mg min-1·kg,K12(0.0071)min-1,38%(n=5)。在3d内的日间RSD为4.8%(n=K2(0.0093)min1,K(0.1915)min-1,t1n(26.85)min1,ta3(131.15)min1,AUC(6228.48)g·24药代动力学参数测定Wistar大鼠,体重180~260g,♀♂各半(新疆3讨论医科大学实验动物中心提供),给药前禁食12h,全程蒜氨酸为水溶性化合物,极性较大,选择甲醇、不禁饮水。以蒜氨酸300mgkg灌胃分别于给乙氰等多种流动相均无较好的分离度,本文选择流药后2,5,10,15,30,45,60,90,120,180,240动相为100%水,分离度好,方法简便可靠300min后眼眶后静脉丛取血,按“血浆样品的提取样品处理直接用甲醇沉淀蛋白,不需分离提取,分离”项下方法操作,测定血浆药物浓度结果见图2虽然有内源性杂质掺入,但在设定的色谱条件下,蒜用3P87药动学程序对血药浓度一时间数据进氨酸峰型较好,所选内标5氟尿嘧啶与蒜氨酸分离行拟合,表明大鼠灌胃蒜氨酸后,其血药浓度随时间较好,峰型很好,灵敏度高,适合于蒜氨酸的药物浓的变化过程符合二室模型主要的药动学参数为:度检测。作者比较了乙醇、甲醇、乙腈、丙醐、三氯乙酸等溶剂沉淀蛋白的效果。乙腈与甲醇效果接近,从成本及毒性方面考虑,选用甲醇参考文獻:1]贾江滨许重远,罗景慧,等.大蒜中含硫氨基酸研究进展J.中覃药图2血药浓度随时间变化图[2] Lachmann G, Lorenz D, Radeck W, ct al. The pharma-Fig 2 Mean plasma concentration-time curve of extravenouscyokinetics of the s labeled garlic constituents allin, allicin anafter single does of 300mgkg in rat(n=6)vinyldithiine, Arzneimittelorsch. 1994, 44(6): 734-43黄柏中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀提取方法研究鲁云博,杨广德(西安交通大学药学院,陕西西安710061)关键词:黄柏;盐酸小檗碱;盐酸巴马汀;高效液相色谱法;提取方法摘要:目的建立中药黄柏中生物碱的提取方法。方法:以盐酸小檗碱和盐酸巴马汀为指标,用高效液相色谱法进行分析测定,系统考察不同溶剂、不同提取时间、不同提取方式对盐酸小果碱和盐酸巴马汀提取率的影响,并对不同来源黄柏药材中的盐酸小槳碱和盐酸巴马汀进行了测定。结果:用盐酸甲醇(1:10)溶液超声20mn的提取方法可以获得较高的盐酸小檗碱和盐酸巴马汀提取率。结论:溶剂种类和提取方式对黄柏中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的提取效率有较大影响中图分类号:R284.2文轍标识码:A文章编号:1001-1528(2004)03-018602Solvent extraction of berberine hydrochloride and palmatine hydrochlorideCortex phellodendri收稿日期:200303-12作者筒介;鲁云博(1977-),男,硕士,主要从事制剂工艺及质量标中国煤化工联系人:杨广德,副教授,电话:02982655451CNMHG