转基因马铃薯PCR检测方法

本文针对国际上商业化种植的3种转基因马铃薯和1种国内大田实验的转基因马铃薯,确定了使用PCR方法检测商品化转基因马铃薯的技术路线.在本研究中,选取马铃薯种属特异性的内源蛋白ptatatin基因片断为内对照,用以检验提取的样品DNA质量,有效避免假阴性并确定检测样品的种源.选取FMV 35S启动子、CaMV 35S启动子、NOS终止子、NPTⅡ选择基因作为筛选基因,选取外源目的基因PLRVrep、PVYcp作为鉴定品系的鉴定基因,同时筛选出检测以上基因的最佳引物序列,并优化了PCR反应条件.实验结果表明,各对引物特异性强且工作良好;PCR反应条件稳定可靠.本方法适用于进出口检验检疫部门和农业部门对转基因马铃薯的检测监控.