以环氧乙烷为活性基的多孔颗粒状固定化青霉素酰化酶的制备

报道了用以环氧乙烷为活性基的多孔颗粒状载体(Eupergit-C)制备固定由巨大芽孢杆菌(B.megaterium)产生的青霉素酰化酶的研究.用己二胺,赖氨酸对载体进行化学修饰后制备固定化酶,获得了较好的固定结果.用未修饰的载体制备固定化酶,经24h固定反应,酶活力达176.5IU/g(wet),酶活力总收率达53.7%,酶蛋白的固定量为19.7mg/g(dry),酶蛋白的固定效率达87.5%.游离酶的酶浓度对制备固定化酶的活力无显著影响.当加酶量从312IU/g(dry)上升到6250IU/g(dry)时,固定化酶活力从89IU/g(wet)上升到475IU/g(wet),总收率和固定化效率分别从99%和99%下降到26.5%和32.5%,酶蛋白的固定量从6-9mg/g(dry)上升到112mg/g(dry),酶蛋白的固定效率从99%下降致80.5%.以酶活力为155IU/g(wet),酶蛋白固定量为22mg/g(dry)的固定化酶水解青霉素G钾盐,经过20批循环水解后,剩余酶活力为92.5%.