黄芪的乙醇提取工艺优化研究

安徽农业科学, Joumal d Anhui Agri,si.200,37(9):4110-4ll贵任编辑张杨林责任校对况玲玲黄芪的乙醇提取工艺优化研究昝丽霞(陕西理工学院生物科学与工程学院,陕西汉中n婴[目的]优选黄芪的最佳乙醇提取工艺。[方法]朱用正交试验法,以干青收率、黄芪甲苷含量、总黄酮含量为指标对形响黄芪中有效威分提取的因素进行考察。[结果]黄芪有效成分最佳提取工艺条件为加%乙醇浓度,滥度加0℃,料液比1:12,提取3h。在该工艺条件下,测得干膏得率为25%左右黄芪甲苷含量超过3%,总黄酮含量在0.8%左右。[结论]优选出的黄芪乙醇提取工艺科学、经济,可有效节约資源,用于工业生产。关键词黄芪甲苷;总黄酮;正交试验;综合评分中图分类号R97文献标识码A文章编号017-6611(2009)09-04110Study on the Optimination of Ethanol Extraction Tect niques for rodix astragaliZAN Li-xia (School of Biological Science and Engineering, Shaanxi University of Technology, Hanzhong, Shaam 723001)Abstract [Objective] The aim watraction techniques for Radi astragali. [Method ] with extract yield, astagtotal flavone content as indices, the influencing factor on the extraction of active components from R. astragali were investigated. I Result] The bestchnological conditions for the extraction of activents from R. astraas follows: 70% ethanol, extraction temperature of 70C, solid-liquid ratio of 1: 12 and extraction time o 3 h. Under these technology conditions, the extract yield was about 25%, the astragaloside content was morethan 3% and total flavone content was about 0.8%.[Conchusion] The optimal technology for the ethanol extraction o R. astagali was scientific and ecanonical. And can save resources and instruct the industrial practice effectivelyKey words Radir astragali; Saponins: Total flavone: Orthogonal eperimental; Synthetical mack黄芪( Radia astragali)为豆科植物膜荚黄芪 astragalus124样品中黄芪甲苷含量的测定。称取黄芪甲苷对照品ebrananceus(Fsch,)Bge,和蒙古黄芪A. mongholicus(Bg.)2m,用无水乙醇定容至0m量瓶中,摇匀。分别精密吸取Hsia的干燥根,主要分布于我国西北、华北和东北等地区,对照品溶液0、0.6、0.8、1.0、12、1,4、1.6m于量瓶中,水浴加具有补气固表脱毒排脓生肌、利尿的功效。笔者采用乙醇热挥去溶剂,各加入020m浓度5%香草醛冰醋酸溶液和提取正交试验法以干膏收率黄芪甲苷和总黄酮含量为指0.80ml高氯酸密塞,于7℃水浴恒温加热20min,取出后立标采用综合评分法对黄芪的乙醇提取工艺进行了优化。即用流水冷却加冰醋酸5m摇匀,显色。用未加对照品的1材料与方法溶液作空白对照在540mm处测定,制备标准曲线。11材料TU12型紫外分光光度计(北京惠谱通用仪器参考文献[2]对黄芪样品中甲苷进行测定,根据回归方公司),w8OG型微波炉(佛山市顺德微波炉电器有限公程计算结果司),Ks120E型超声波清洗机(宁波生科仪器厂),SH421-1.2,5样品中总黄酮含量的测定。称取在120℃干燥至恒420型恒温水浴锅(河北省黄骅市航天仪器厂),FAON型重的芦丁对照品10mg,置50m量瓶中加甲醇定容至刻度电子天平(上海天平仪器厂)。中药黄芪(购自陕西汉中药材摇匀。吸取该溶液0、1、2、34、5m分别置于25m量瓶中加公司),黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所标号浓度5%NNO21m,依次每隔6min加浓度10%A(NO3)210781-08),芦丁标准品(批号00802005,中国药品生物制品ml,浓度4%NaOH0ml,最后各用水稀释至刻度,摇匀放置15检定所),试剂均为分析纯mn,用第1瓶作空白,在500m处测吸收度绘制标准曲线。12方法参考文献[3]对黄芪样品中总黄酮进行测定,根据回归1.21正交试验设计。选择料液比提取温度、提取时间、方程计算结果乙醇提取溶剂浓度为考察因素每因素各取3个水平,选用2结果与分析L4(3)正交表进行试验以干膏收率黄芪甲苷含量及黄酮含21千膏收率试验结果由表1可知3号试验即乙醇提量为评价指标采用综合评分法进行数据分析(其权重系数取浓度0%料液比1:2提取温度0℃条件下提取4h,所分别为0.1、0.504)1得干膏收率最高,为27.13%。122样品溶液的制备。称取9份黄芪药材粉末(过40目2.2黄芪中甲苷含量的测定结果筛)每份10g,按正交表各列号项下条件分别进行提取,过221标准曲线绘制结果。以吸收度值A为纵坐标黄芪滤滤液合并离心取上清液减压浓编至无醇味加水定容甲苷量c(g)为横坐标进行线性回归得方程:A=487805C于100ml量瓶中,备用。7.317,r=0.994(n=6)。表明黄芪甲苷在120~320鸺12.3千膏收率试验。量取9份样品溶液各50m1,置已干范围内有良好的线性关系。燥至恒重的蒸发皿中水浴蒸干,残渣于106℃干燥3h取2.22含量测定结果。由表1可知2号试验即乙醇提取出,置干燥器中放置30min后迅速称重计算。浓度1:1n面沮度“nq条件下提取3h,测得甲苷含中国煤化工基金项目陕西省教育厅专项科研计划项日(6K):陕西理工季院2,3CNMHG作者摘介普丽霞(1-),女陳西韩城人,项士,讲师,从事天然药231标准曲线绘制结果。以吸收度(Y作纵坐标芦丁浓物有效成分研究度(X)作横坐标绘制标准曲线得回归方程:Y=0.4995X+收稿日期20001-150003,r=0.99n=5)。结果表明峰面积与浓度呈良好3亵9期昝丽霞黄瓮的乙醇提取工艺优化研究4111的线性关系浓度70%料液比1:12,提取温度70℃条件下提取4h,测得232含量测定结果。由表1可知,3号试验即乙醇提取黄酮含量最高,为09%。表1正交试验方案及结果因素Fass评价指标 Evaluation ind提取浓度提取时间提取温度干膏得率∥%黄芪甲苷含量∥%黄酮含量∥%综合评分Exraction concentration Soid-liqunid ratio Extraction time Extract3.1803191,4126.100.5%480m∞∞∞∞3.3717.03.000.2I:1017.5079.2.623.130.8685.48:100568,402.787.0注:千膏收率评分=干膏收率最大干膏收率x0.1×100:黄芪甲苷含量评分=黄芪甲苷含量/最大黄芪甲苷含量x0.5×100;总黄酮含量评分x总黄酮含量/最大黄酮含量x0.4×100;综合评分=干膏收率评分+黄芪甲苷含量评分+总黄酮含量评分。最忧水平为AB3C2DNote: The extract yield mark s extract yield/maximum etract yield O 1 x 100: Astragalaside oontent mark astragaloside content/ maximum astragaloside can-tent x0. 5x 100: Total flavone content mark total flavone content/ mmmm total flavone content 0. 4 x 100; Synthetical mark= extract yield markcontent mark+ total flavone content mak. The optiman level is A, B,Cl24因素影响分析结果表1表明,乙醇提取试验中根据率最高。在通常情况下,人们认为提取时间越长,有效成分极差大小得出各因素作用主次为A>B>C>D,即提取浓度提出率越高。该试验结果显示,长时间高温条件将会使黄>料液比>提取时间>提取温度;最佳工艺组合为芪甲苷分子结构发生改变从而使其丧失生物活性。因此AB3C2D3,即乙醇提取浓度7%料液比1:12提取温度70℃降低提取温度对保持甲苷提取物活性具有重要意义热浸法的条件下提取3h。方差分析结果表明提取浓度对提取效果更好地保持了甲苷的活性,使甲苷提取率有所提高。的影响有显著意义,其他3因素的影响无显著意义。(2)黄芪中甲苷和黄酮均为黄芪的有效成分。该试验采25验证试验结果为验证上述优选的微波提取工艺最佳用正交设计,以黄芪中黄芪甲苷和总黄酮2种成分的含量作条件的稳定性称取20g黄芪3份,分别按所确定的最佳条为优选正交方案的指标进行考察以综合评分值优选黄芪热件进行提取测得结果见表2。浸提的工艺,以节约药品用量,降低能量得到最大产率为原衰2证试验结果则,重复验证试验表明优选出的工艺科学、经济,可用于指ble 2 The results d validation te导工业生产。黄芪药材粗粉∥g干膏黄芪甲总黄酮参考文献Crude powder frun[]罗毅刘刚周本宏等综合评分法优选黄芪的水煎提工艺[刀]中国Astragaloside Total flavone医院学杂志,2004,2411):667-60.cuta(2]姚丽哪林政义陈芳不同种类黄芪的皂苷含量比较[门]淮海医药25.863.41x06,23(2):102025.233.200833]陈永城李宝才张健,等.芦丁提取工艺改进的研究[门]中医药学刊x0042():x061[4]欧阳臻常钰,李永辉,等桑叶多糖的提取纯化及其含量测定[时珍国医国药,06,3(10):1403结论与讨论(1)试验结果表明热浸法提取黄芪中甲苷和黄酮的效4N以ⅧA八心mN,W%乳原成体细形体内及体外性的实验研究(上接第4059页)regenesis[J].J Bad Chen,0,1(46):3081-3037[3] KENNEY N J SMITH G H. 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