白芷的提取工艺

第29卷,第3期光谱实验室Vol 29, No. 3012年5月Chinese Journal of spectroscopy LaboratoryMay,2012白芷的提取工艺0索建兰②袁佳妹(宝鸡文理学院化学化工系陕西省宝鸡市高新大道1号721013)摘要探讨多因素实验条件对白芷的提取工艺参数的影响以欧前胡素和异欧前胡素的含量为指标,以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间提取次数为因素进行单因素试验。结果表明白芷的最佳提取工艺参数为:以8倍量80%乙醇提取3次,每次lh关键词白芷;欧前胡素;异欧前胡素;高效液相色谱;乙醇回流提取;浸泡提取中图分类号:0657.7+2文献标识码:A文章编号:1004-8138(2012)03-1620-031引言白芷( Radiz angelicae Dahuricae)为伞形科当归属植物白芷[ Angelica dahurica( Fisch.exHoffm.) Benth. et Hook.f.]或杭白芷[ Angelicadahurica( Fisch. ex Hoffm.) Benth. et Hook.f.var.formosana(Bois. Shan et Yuan]的干燥根,别名芷,芳香,分布浙江、台湾等地。喜温暖湿润的气候和阳光充足的环境条件,怕高温、能耐寒、适应性强。白芷对光照长短、强弱虽不甚敏感,但光能促进其种子发芽白芷中含有挥发油及多种香豆素类衍生物。其中香豆素类成分主要如白欧前胡素、氧化前胡素异欧前胡素等的含量约为0.221%-1.221%如白当归素(白芷素),白当归醚(白当归脑、白芷醚)、欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素、珊瑚菜素、花椒毒素、新白芷醚和去甲基苏北罗新等具有良好的止痛作用,医生在止痛中使用白芷的频率极高。九味羌活汤、柴葛解肌汤等名方中的白芷所发挥的效用之一就是止头痛。白芷与马钱子等制成的筋骨活络丸是治疗风湿痛、关节炎的中国专利产品。白芷能减少黑色素的形成,又可以润泽肌肤,同时还有消毒的作用2等现在已有不少国家开始重视白芷在美容产品中的应用。因此充分利用白芷为我国传统中药和发挥白芷主产区的优势,将中医药理论,结合现代技术与市场需求,对白芷的美容成分进行研究提取有效美容成分,开发针对美白、祛斑、洁牙等方面的功能性化妆品或护肤品是综合开发白芷产品的一个重要方向2实验部分2.1材料与仪器白芷(秦岭太白山);柱层析硅胶(200-300目);欧前胡素对照品(98%批号:110826-200712,北京中国药品生物制品检定所)、异欧前胡素对照品(98%批号:110827-200407,北京中国药品生①陕西省植物化学重点实验室重点项目(20101S067)陕西省教育厅项H中国煤化工CNMHG②联系人,手机:(0)13991766353E-mal:suon@yahoo,com.cn作者简介;索建兰(1965-),女,陕西省宝鸡市人,教授,主要从事中药研究工作收稿日期:2011-08-16;按受日期:2011-09-19第3期索建兰等:白芷的提取工艺1621物制品检定所)。SHB-■型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);R-1002型旋转蒸发仪(郑州长城科工贸有限公司);KQ5200E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);D101型大孔树脂柱(杭州三特医药化工设备有限公司)。乙醇(分析纯);乙酸乙酯(分析纯)。实验用水为去离子水。2.2实验方法2.2.1乙醇浸泡提取白芷室温干燥后用药物粉碎机粉碎得白芷粗粉,将粉碎好的白芷粗粉置于100mL·烧杯中,用乙醇(8:1mg/g)浸泡24h,旋转蒸发仪将其浓缩回收乙醇,得到白芷提取物;同法浸泡提取3次第2次浸泡需12h,第3次浸泡需6h。2.2.2乙醇回流提取将粉碎好的白芷粗粉置于1000mL三颈烧瓶中,并加入等质量乙醇以及几粒沸石,安装好回流装置,插人温度计控制温度在50C左右。按照单因素试验设计提取次数以及提取时间。将每次的回流提取液收集,用旋转蒸发仪将其浓缩,得浓缩物即为白芷粗提物。蒸出的乙醇回收。提取液依次用石油醚、醋酸乙酯萃取,剩余部分为水。将水部分上样于D101大孔树脂柱,水-乙醇(1:v/)梯度洗脱,分为6个部分,将50%洗脱部分分别进行硅胶柱层析,再用氯仿甲醇(体积比10:1—7:3)梯度洗脱,各流分采用薄层色谱或高效液相色谱检出,合并相类似组分,反相柱层析反复分离,凝胶纯化,得到6个化合物。2.2.3分离将用上述方法得到的待分离样品及此处所选的沉淀部分用适量乙酸乙酯溶解,加入适量硅胶质量比按1:1混合),置于研钵中于红外灯下加热研磨,直至溶剂挥发混合物变为粉末状,使样品均匀吸附于硅胶上,备用。选一根大小合适的玻璃色谱柱,柱下端用少量棉花或脱脂棉堵住,然后将薄层层析硅胶(200-300目,硅胶量是样品量的3040倍)加入色谱柱中,并于柱底出口处抽真空使柱子填装密实装平,并成适当高度。然后再将制好的待分离样品加入柱中进行分离。3结果与讨论3.1单因素试验3.1.1不同乙醇浓度对总香豆素含量的影响在白芷提取过程中,由于欧前胡素、异欧前胡素在乙醇中有较好的溶解性,因此选择乙醇为提取溶剂,并分别选择不同浓度的乙醇、乙醇用量提取时间提取次数进行试验。在预试验中发现,其他提取条件相同,白芷用不同浓度的乙醇提取,欧前胡素、异欧前胡素含量差别较大,结果见表1。表1不闷浓度乙醇提取欧前胡素异欧前胡素的含量结果乙醇浓度(%)中国煤化工CNMHG欧前胡素(mg/g)异欧前胡素(mg/g)0.360.390.420.470.38由表1可见,乙醇浓度在80%时提取效果最佳。1622光谱实验室第29卷3.1.2不同乙醇用量对总香豆素含量的影响将提取次数固定为3次,乙醇浓度固定为80%提取时间固定为1h,分别以4、6、8、12倍乙醇mL)于白芷(g)的溶媒量进行提取考查不同乙醇用量对总香豆素含量的影响,结果见表22不同乙醇用量对总香豆素含量的影响乙醇用量(倍)欧前胡素(mg/g2.2432.8182.8182.865异欧前胡素(mg/g)1.6632.0482.238总香豆素(mg/g)3.9064.8645.103表2可知,以8倍量的80%乙醇连续提取3次时,提取效果较好。313不同提取时间对总香豆素含量的彩响将提取次数固定为3次乙醇浓度固定为80%溶媒量固定为8倍分别按05、1、1.5和2h进行提取,考查不同提取时间对总香豆素含量的影响,结果见表3亵3不同提取时间对总香豆素含量的影响提取时间(h)1.5欧前胡素(mg/g)2.2432.8182.875异欧前胡素(mg/g)2.0481.967总香豆素(mg/g)3.7064.8644.802表3可见,8倍量80%的乙醇连续提取3次,提取时间2h提取效果最好,但与1h的提取率相比变化很小,综合考虑提取时间定为h较为理想。31.4不同提取次数对总香豆素含量的影响将乙醇浓度固定为80%溶媒量固定为8倍,提取时间为1h。分别按1、2、3次和4次进行提取,考查不同提取次数对总香豆素含量的影响结果见表4衷4不同提取次数对总香豆含量的影响提取次数(次)欧前胡素(mg/g)2.6183.2473.7023.633异欧前胡素(mg/g)2.0352.879总香豆素(mg/g)4.6535.6346.5816.342由表4可见,相同条件下提取3次时,提取效果最好4结论由以上分析和表给数据可以看出,白芷的最佳提取条件为8倍量80%乙醇回流提取3次,每次2h,但提取lh与2h总香豆素含量变化很小,考虑到能源问题拟将提取时间确定为h较为理想参考文献中国煤化工CNMHG[1]张富强聂红,韦艺等白芷的化学与药理研究进展[冂南京中医药大THS[2]陈贤春王玉蓉路世鹏白芷提取工艺的研究[中成药,2005,27(2):145-147[3]王健,刘明浩徐恩民等薄层扫描法测定白芷中欧前胡素的含量[J药物分析杂志19888(2)[4]王立人,李宏宇谢成科.川白正香豆素类成分的高效液相色谱分析[冂]药学学报,1990,25(2);131第3期索建兰等:白芷的提取工艺1623[5]周继铭,余朝菁,乔智慧等.白芷的研究[]中国医院药学杂志,19888(11):505-50Extraction Process of Radix Angelicae DahuricaeSuo Jian-Lan YuAN Jia-Mei( De partment of Chemistry and Chemical Engineering, Baoji University of Arts and Sciences, Baoji Shaanxi 721013, P R. ChinAbstract The parameters of extraction process Radir angelicae Dahuricae were optimized bysingle factor test, with the contents of imperatorin and isomperatorin as index, and the factors oforthogonal design were carried out, the factors including the concentration of ethanol, the dosage ofethanol, the extraction time and extraction times. the results indicated that the optimal extractionprocess was obtained as follows: the ethanol concentration of 80% for 8 times dosage and theextraction times of 3 for each time of lhKey words Radix Angelicae Dahuricae; Imperatorin; Isomper atorin; High Performance LiquidChromatography; Ethanol Reflux Extraction; Immersion Extraction欢迎参观《北京天科邮票展览馆》《北京天科邮票展览馆》由《科学家纪念邮票展览馆》《陆达纪念馆)和《卢嘉锡纪念馆等3部分组成是本刊兴办的公益性企业,免费参观在北京市工商行政管理局注册号为:110229009367903;北京市质量技术监督局颁发的组织机构代码为:78616185X北京市国家税务局和北京市地方税务局颁发的税务登记证号为:l1022978616185X;中国人民银行颁发的开户许可证核准号为:J1000047864702;开户行为:北京市农商银行夏都支行,账号:14030001030000416。国有土地使用证的证号为:京延国用(2002出)字第283号;房屋所有权证的证号为:京房权证延私字第09140号;社会保险登记证号为社险京字110229010052。《科学家纪念邮票展览馆》展品内容:古今世界各国发行的有关科学家或他们的发明创造的纪念邮票(复印件),大小为210×297mm(A4纸),共有529件。其中190位科学家为诺贝尔奖得主。每件展品均附有本馆编辑的有关科学家的简介,并如实叙述一些科学家的学术观点,仅供参考。《陆达纪念馆》展品内容:1.纪念陆达同志(代序,王鹤寿);2,陆达传略;3.《陆达纪念馆》照片目录;4.《陆达纪念馆》照片(共35张);5.《陆达纪念馆》(后语周开亿)《卢嘉锡纪念馆》展品内容:1.伟人已逝风范长存一纪念卢嘉锡先生(幸振乾);2.卢嘉锡生平;3.《卢嘉锡纪念馆》照片目录;4.《卢嘉锡纪念馆》照片(共65张);5.《卢嘉锡纪念馆》(后语)(《光谱实验室》编辑部)。3馆展品内容已分别在《光谱实验室》2007年第1期、2008年第1期和2009年第1期刊登并出有单行本。参观须知:1.参观者应当具有高中(含》以上文化程度;2.地址:北京市延庆县刘斌堡乡刘斌堡村东,刘斌堡乡中心小学东侧;3.展厅面积300平方米;绿化面积300平方米;4.馆内禁止吸烟禁止触摸展品;保持清洁卫生,爱护花木和陈设;每人入馆时间不得超过2小时;5赴馆乘车路线:北京德胜冂乘919路公交车到终点站(延庆站快车12元,1小时30分;慢车8元,有“一卡通”者4折),再乘920路公交车或小面包车到“刘斌堡东”站下车即到(5元,25分钟);6·参观者请1-3日前申话预约登记,联系申话:(010)62183031;52513126;13716729706。中国煤化工注陆达钢铁研究总院前院长;卢嘉锡,中国科学院前院长:王鹤CNMHG共中央纪律检查委员会副书记章振乾福建省民盟名誉主委厦门大学原教务长《光谱实验宣》編辑部