莓茶乙醇提取物的急性毒性研究

第27卷第6期ood& MACHINerYVol 27. No 62011年11月Nov,201110.3969Jisn1003-5788.2011.06.025莓茶乙醇提取物的急性毒性研究Study on acute toxicological evaluation of ethanol extracts from fusty tea谭平1姚茂君?辛益妹3马美湖ˉTAN Ping YAO Mao-jun2 XIN Yi-mei MA Mei-hu(1湖南机电职业技术学院湖南长沙410151;2,华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070;3.中国人民解放军空军航空医学研究所,北京100036)(1. Hunan Mechanical and Technical Polytechnic, Changsha, Hunan 410151, China;2. College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan, Hubei 430070, China3. Institute of aviation Medicine, Chinese PLA Air Force, Beijing 100036, China)摘要:对莓茶乙醇提取物的急性毒性进行研究。取 Wistar莓茶是一种野生木质藤本植物,又名甘露茶、藤茶、白大鼠40只,清洁级,随机分为2组,每组20只,雌雄各半,以茶、龙须茶等,学名显齿蛇葡萄( Am pelopsis最大耐受重法灌胃给子受试样品组大鼠最大從用度和最 grossedentata),主要分布于湖南、湖北贵州、云南江西、广大灌胃客量的蓦茶乙醇提取物,1天2次(相隔4b),遮续观东、福建等省区口,莓茶性凉味甘淡具有清热解毒降暑察14d。结果表明,受试样品组大鼠毛色,皮肤,粘膜,眼晴,呼吸,循环,自主活动及中枢神经系统、行为表现等均与阴性生津消炎利尿、抗氧化、镇痛等功效,是一种具有独特保健对照组大翼无明显差别,整个试验期内无大氟死亡,幕茶乙功效和饮用价值的野生天然类茶植物,莓茶在武陵山区有醇提取物大鼠口服灌胃的最大耐受量为10.0g/kg大鼠体广泛的分布和悠久的饮用历史,千百年来,人们将其幼嫩茎重;对所有试验大鼠进行大体解剖,组织器官未见有颜色、体叶加工成保健茶,用于治疗咽喉肿痛、感冒发热、黄疸型肝积、质地等改变,说明蓦荼乙醇提取物的毒性很小,具有较好炎、湿疹、皮炎等症[2,,莓茶水提取物主要活性成分为黄酮的食用安全性。类化合物3,5,7,3′,4',5′-大羟基-2,3双氢黄酮醇(二氢关键词:幕茶;显齿蛇葡萄;二氩杨梅素;急性毒性Abstract: The acute toxicological evaluation was studied of ethanol杨梅素, dihydromyricetin,DMY),具有抑菌、消炎、镇痛、止extracts from fusty tea( Am pelopsis grossedentata). The rats were咳、祛痰、抗高血压、保肝护肝及解酒、消脂降糖抗氧化和given the ethanol extracts from fusty tea with the maximum concen-增强免疫力等多种药理活性。目前,对莓茶乙醇提取物ration and capacity by gastric perfusion, twice a day,for14day的毒理研究未见报道,本试验对其急性毒性进行了研究,以The result showed that compared with Wistar control group, therewere no abnormal reactions during the observation period on skin,期为莓茶的研究和进一步开发提供参考mucosa., coat color,eyes, breath., circulation. locomotor activity.1材料与方法central nervous system, behavior etc. in Wistar sample group, with-1.1仪器与材料m1.1.1主要仪器设备小型粉碎机:LH08B,浙江新昌红利数控制造厂;恒温水浴锅:B220,上海亚荣生化仪器厂;Keywords: fusty tea; ampelopsis grossedentata, dihydromyricetin电子天平:EB340HW型,日本 Shimadzu公司超声波清洗器:8200J4型,日本 Yamato公司;旋转蒸发器:RE52A,上海亚荣生化仪器厂;基金项目:国家星火计划项目(编号:2006EA7049);湖南省自然科上皿式电子天平:TMP2型,湘仪天平仪器设备有限学基金资助項目(编号:06J15019);溯南省教育厅高校科公司;中国煤化工研项目(编号:1c0475)喷雾干燥作者简介:谭平(1968-)男湖南机电职业技术学院副教授,硕士HCNMHGE-mail:tanxiting@126.com1.1.2材料收稿日期:2011-08-01清洁级 Wistar大鼠:40只,由北京大学医学部实验动物提取与活性2011年第6期科学部提供(合格证号为 SCXKL[京]2002001,动物使用14天受试样品组雄性大鼠平均体重为(194.16±7.86)g许可证为SYXK[军]2002010),雌雄各半体重160~180g。14d内受试样品组雄性大鼠体重增加了20.11g试验大鼠饲养条件:相对湿度50%(士5%),温度22℃受试样品组雌、雄大鼠体重与阴性对照组无明显差别(±2℃),光照12h明、12h暗,全屏障清洁级动物实验室14d内动物生长情况良好,表明莓茶乙醇提取物对大鼠体重内;喂饲全价营养颗粒饲料(北京大学医学部实验动物科学无明显影响。结果见表1。部提供),紫外灭菌后自由摄食;饮水为城市自来水,过滤后裊1書茶乙醇提取物对动物体重的影响(x士s)装人消毒过的饮水瓶内,自由饮用Table 1 Effects of ethanol extracts from fusty莓茶〔按绿茶加工工艺制成):湖南省保靖县秦简茶科技tea to the body weight of mouse开发有限公司体重/g生理盐水注射液(规格:500mL/瓶,批号:060509112)组别7 d北京双鹤药业股份有限公司。14d桶装饮用纯净水:购于北京华玉时尚饮料有限公司受试♀10172.48±5.35181.7:6.06190.64土6.23无水乙醇:化学纯,北京化学试剂公司。样品组♂10174.05±5.90184.90士4.76194.16±7.861.2莓茶乙醇提取物的制备阴性♀10173.95±448182.62±5.53191.09±5.43将莓茶粉碎、过筛,称取一定质量的莓茶粉,按料液比为对照组♂10173.95±5.31184.99±5.51194.98±7.951:18(mtV)加入65%的乙醇溶液,在60℃下,超声波提取40min抽滤;滤液采用旋转蒸发器进行浓缩,待料液可溶性2.3对受试样品组一般体征的影响固形物含量达到30%左右即可;经喷雾干燥得莓茶乙醇提取受试样品组大鼠灌胃给予莓茶乙醇提取物(剂量为物,依文献[4]测其二氢杨梅素含量约为70%。10.0g/kg大鼠体重)后,连续观察14d,所有受试大鼠的毛1.3急性理学试验发光泽度、大小便、摄食活动状态和自主活动等均未见异常根据文献[11~13],将试验用大鼠随机分为受试样品组改变。和阴性对照组,每组20只,雌雄各半,阴性对照组给予生理2.4对受试样品组主要脏器的影响盐水注射液,受试样品组绐予莓茶乙醇提取物。给予受试样对所有受试大鼠进行大体解剖,未见其组织器官出现颜品途径:大鼠口服灌胃。给予莓茶乙醇提取物或生理盐水注色体积和质地等改变。受试样品组大鼠皮肤、粘膜眼睛射液后实验室观察14d每日记录大鼠的自主活动、外观症呼吸、循环及中枢神经系统行为表现等反应与阴性对照组状大鼠的死亡数及死亡时间,对死亡鼠进行尸体解剖观察大鼠无明显差别。主要脏器和组织有无肉眼可见的病理学变化3结论2结果与分析以受试样品最大使用浓度、受试动物最大灌胃容量,给因受试莓茶乙醇提取物样品溶解度限制,试验中以予 Wistar大鼠口服灌胃莓茶乙醇提取物剂量为10.0g/kg0.25g/mL比例将受试样品配制成水混悬液给予受试样品大鼠体重,在观察期内受试样品组大鼠毛色,皮肤,粘膜,剂量为20.0mL/kg(大鼠体重),1d2次(相隔4h),1d累睛,呼吸,循环,自主活动及中枢神经系统行为表现等均与计剂量为10.0g/kg(大鼠体重),阴性对照组给予生理盐阴性对照组大鼠无明显差别整个试验期内无大鼠死亡发水注射液20.0mL/kg(大鼠体重),1d2次。生,莓茶乙醇提取物大鼠口服灌胃的最大耐受量为2.1受试样品组死亡情况10.0g/kg(大鼠体重);对所有试验大鼠进行大体解剖,组织受试样品组大鼠口服灌胃给予受试样品莓茶乙醇提取器官未见有颜色体积、质地等改变。本试验结果表明莓茶物,剂量为10.0g/kg大鼠体重;整个试验期14d内无动物乙醇提取物急性毒性很小,具有较好的食用安全性临床应死亡发生,受试样品组20只大鼠全部存活。用安全可靠,具有进一步研究开发价值,为莓茶的后续研究2.2对受试样品组体量的影响提供了试验依据但急性毒性实验仅数次给药,观察时间较第1天受试样品组雌性大鼠平均体重为(172.48士短,故还应结合长期毒性试验的毒性表现及多种检查结果综5.35)g,第7天受试样品组雌性大鼠平均体重为(1831.77士合分析评价其毒性6.06)g,7d内受试样品组雌性大鼠体重增加了9.29g第14天受试样品组雌性大鼠平均体重为(190.64士6,23)g,参考文献14d内受试样品组雌性大鼠体重增加了18.16g1中国科学院植中国煤化工第2册)M第1天受试样品组雄性大鼠平均体重为(174.05土北京:科学出CNMHG5.90)g,第7天受试样品组雄性大鼠平均体重为(184.90±2王文采.葡萄科新发现[J].植物分类学报,1979,17(3):110~4.76)g,7d内受试样品组雄性大鼠体重增加了10.85g,第(下转第106页)102提取与活性2011年第6期2正交试验结果溶剂微波功率300W,提取时间120s,料液比1:35Table 2 Results and analysis of orthogonal test(m:V)。该条件下,石榴皮多酚提取率可达21.41%表实验序号ABCD多酚提取率P/%明微波辅助工艺有利于石榴皮多酚的提取,所建立的工艺可获得较高的多酚提取率,具有良好的应用前景。123参考文献1宋立江,狄宝,石碧.植物多酚研究与利用的意义及发展趋势[J]化学进展,2000,12(2):161~170.2 Nevin K G, Rajamohan T. 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