野葛种质的超低温保存研究

对野葛种质的超低温保存技术进行了研究.结果表明,野葛带芽茎段超低温保存较佳的技术体系是继代培养60d的试管苗于4℃低温下锻炼5d,然后切取1～1.5cm带芽的幼嫩茎段放入MS+50g/L二甲基亚砜+50g/L蔗糖的预培养基中4℃低温下预培养1d,以100g/L DMSO+50g/L甘露醇+50g/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作冰冻保护剂,在0℃、-20℃、-80℃下对带芽茎段各处理1h,最后投入液氮保存,保存24h后,将材料取出于40℃水浴中快速化冻90s,化冻后用MS+1.2mol/L蔗糖的洗涤液洗涤2次,每次10min,后转入再生培养基(MS+BA 2mg/L +NAA 1mg/L)上暗处培养7d后再置于光下培养,成活率可达45%～47%,再生苗与常温苗形态指标差异不大.