黄芪的乙醇提取工艺优化研究

安徽农业科学Joumal of Anhui Agri.209,37(9)4110-4111责任编辑张杨林责任校对况玲玲黄芪的乙醇提取工艺优化研究昝丽霞(陕西理工学院生物科学与工程学院,陕西汉中2001摘【目的]优选黄芪的最佳乙醇提取工艺。【方法]采用正交试验法,以干膏收率、黄芪甲含量、总黄含量为指标,对影响黄芪中有效成分提取的因素进行考察。[结果]黄芪有效成分最佳提取工艺条件为70%乙醇浓度,温度70℃,料液比1:12,提取3h。在该工艺条件下,测得干青得率为25%左右,黄芪甲含量超过3%,总黄酮含量在0.8%左右。[结论优选出的黄芪乙醇提取工艺科学经济,可有效节约资源,用于工业生产关键词黄芪甲;总黄酮正交试验;综合评分中图分类号R917文献标识码A文章编号01-661(209-0410-0 Study on the Optimization of Ethanol Extraction Techniques for Radix astragali liquid ratio of 1: 12 and extraction time of 3 h. Under these technology co the extract yield was about 25%, the astragaloside content was more than 3% and total flavone content was about 0.8%. Conclusion] The optimal technokogy for the ethanol extraction of R. astragali was scientific and e- Key words soures and instruet the industrial practice effectively adir astragali黄芪( Radixa stragali)为豆科植物膜黄芪 Astragalus1.2.4样品中黄芪甲苷含量的测定。称取黄芪甲苷对照品 mebrananceusfich.)Bee.和蒙古黄. mongholiaus(.)2mg,用无水乙醇定容至10ml量瓶中摇匀分别精密吸取 Hsiao.的干燥根,主要分布于我国西北、华北和东北等地区,对照品溶液0、0.6、0.8、1.01.2、1.4、1.6m于量瓶中,水浴加具有补气固表、脱毒排脓、生肌、利尿的功效。笔者采用乙醇热挥去溶剂各加入0.20ml浓度5%香草醛冰醋酸溶液和提取正交试验法,以干膏收率、黄芪甲苷和总黄酮含量为指0.80m高氯酸,密塞,于70℃水浴恒温加热20min,取出后立标,采用综合评分法对黄芪的乙醇提取工艺进行了优化。即用流水冷却,加冰醋酸5m摇匀,显色。用未加对照品的1材料与方法溶液作空白对照,在540mm处测定,制备标准曲线。1.1材料T-1221型外分光光度计(北京惠谱通用仪器参考文献[2]对黄芪样品中甲苷进行测定,根据回归方公司),WD800G型微波炉(佛山市顺德微波炉电器有限公程计算结果司),KS-120E型超声波清洗机(宁波生科仪器厂),SHH41-1.2.5样品中总黄酮含量的测定。称取在120℃燥至恒420型恒温水浴锅(河北省黄骅市航天仪器厂),2004n型重的芦丁对照品10mg,置50m量瓶中加甲醇定容至刻度,电子天平(上海天平仪器厂)。中药黄芪(购自陕西汉中药材摇匀吸取该溶液01、2、3、4、5ml分别置于25ml量瓶中加公司),黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所,标号浓度5%aNO21ml,依次每隔6min加浓度10%l(O3)3107812丁标准品(批号080-20中国药品生物制品ml,度4%NaOH10ml最后各用水稀释至刻度,摇匀放置15检定所),试剂均为分析纯。min,用第1瓶作空白,在500mm处测吸收度,绘制标准曲线。1.2方法参考文献[3]对黄芪样品中总黄酮进行测定,根据回归1.2.1正交试验设计。选择料液比、提取温度、提取时间、方程计算结果乙醇提取溶剂浓度为考察因素,每因素各取3个水平,选用2结果与分析L(3)正交表进行试验以干青收率黄芪甲苷含量及黄酮含2.1千收率试验结果由表1可知,3号试验,即乙醇提量为评价指标,采用综合评分法进行数据分析(其权重系数取浓度70%,料液比1:2,提取温度70℃条件下提取4h所分别为0.1、0.5、0.4)。得干膏收率最高,为27.13%。1.2.2样品溶液的制备。称取9份黄芪药材粉末(过40目2.2黄芪中甲苷含量的测定结果筛),每份10g,按正交表各列号项下条件分别进行提取,过221标准曲线绘制结果。以吸收度值A为纵坐标黄芪滤,滤液合并,离心,取上清液,减压浓缩至无醇味,加水定甲苷量C(ug)为横坐标进行线性回归得方程:a=487.805C于100ml量瓶中,备用。-7.317,0.99(n6)表明黄芪甲苷在120-320g1.2.3干膏收率试验。量取9份样品溶液各50ml,置干范围内有良好的线性关系。燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,残渣于105℃干燥3h取2.2.2含量测定结果。由表1可知2号试验即乙醇提取出,置干燥器中放置30min后迅速称重,计算。浓度70%,料液比1:10,提取温度60℃条件下提取3h测得甲苷含量最高,为3.41%基金项目陕西省教育厅专项科研计划项目(06JK329)陕西理工学院2.3黄芪中黄酮含量的测定结果专项科研基金项目(SLGQD514)助作者简介丽(197-)女陕西韩城人,士,讲师,从事天然药2.31标准曲线绘制结果。以吸收度(作纵坐标芦丁浓物有效成分研究。度(X)作横坐标绘制标准曲线,得回归方程:=0.4995X+收稿日期2009-01-150.0023,r=0.9999(n=5)。结果表明,面积与浓度呈良好37卷9期丽霞黄芙的乙醇提取工艺优化研究4111的线性关系。浓度70%,料液比1:12,提取温度70℃条件下提取4h,测得2.3.2含量测定结果。由表1可知,3号试验,即乙醇提取黄酮含量最高,为0.93%表1正交试验方案及结果 Tible 1 The scheme and results of orthogonel test试验号提取浓度因素 Fadtars料液比提取时间评价指标 Evaluation indice综合评分A∥% B//g/'ml//h提取温度干青得率%黄芪甲苷含量%黄酮含量∥% Symthetic Exrection concertration Solid-liquid ratio Extraction time Extrction terrperature yield cortert merk1:824.053.180.3191.411:100026.103.410.539.481:1243427.133.370.9399.301:817.053.000.297.92801:1017.503.040.5879.2981:126020.623.130.8685.48901:846010.802.180.2554.28901:1027015.602.580.5868.40901:1235019.072.780.767.029.8312.736853.16注:千膏收率评分=干膏收率/最大千青收率0.1×100:黄芪甲含量评分=黄芪甲苷含量/最大黄芪甲苷含量0.5×100总黄酮含量评分总黄酮含量/最大黄酮含量×0.4×100综合评分=千膏收率评分+黄芪甲含量评分+总黄酮含量评分。最优水平为ABCD Note: The extract yield mark extract yield menimum extract yield x0.I x 100; Astragalcside content mark sstragaloside content/ marinam antragaloaide con- tent x0. 5x 100 Total flavane corteart mark total flavone cortent mecimum total flavone content x 0.4 x 100: Syuthetical mark= exdract yield mark+ astragaloside content mark+ total flarvone content murk. The optimuan level is A. B,C D3.2.4因素影响分析结果表1表明乙醇提取试验中根据率最高。在通常情况下,人们认为提取时间越长,有效成分极差大小得出各因素作用主次为A>B>C>D,提取浓度提出率越高。该试验结果显示,长时间高温条件将会使黄>料液比提取时间提取温度;最佳工艺组合为芪甲分子结构发生改变,从而使其丧失生物活性。因此ABC2D3,即乙醇提取浓度70%,料液比1:12提取温度70℃降低提取温度对保持甲苷提取物活性具有重要意义热浸法的条件下提取3h。方差分析结果表明提取浓度对提取效果更好地保持了甲的活性,使甲苷提取率有所提高。的影响有显著意义,其他3因素的影响无显著意义。(2)黄芪中甲苷和黄酮均为黄芪的有效成分。该试验采2.5验证试验结果为验证上述优选的微波提取工艺最佳用正交设计,以黄芪中黄芪甲苷和总黄酮2种成分的含量作条件的稳定性,称取20g黄芪3份,分别按所确定的最佳条为优选正交方案的指标进行考察以综合评分值优选黄芪热件进行提取,测得结果见表2。浸提的工艺,以节约药品用量,降低能量得到最大产率为原表2验证试验结果则,重复验证试验表明,优选出的工艺科学、经济,可用于指 Ible 2 The results odf validation test%导工业生产。黄芪药材粗粉∥g膏黄芪甲总黄参考文献 rude powder from得含量含量1]罗毅刘刚周本宏等综合评分法优选黄芪的水煎提工艺中国 astragall medicine yield contert content[2]姚丽娜林政义,陈芳不同种类黄芪的皂苷含量比较准海医药,25.863.410.7525.233.203陈水城,李宝,张健等芦厂提取工艺改进的研究门中医药学2024.363.030.81200211114]欧阳臻常钰,李永辉,等桑叶多的提取纯化及其含量测定[]时珍国医国药20010)1403结论与讨论(1)试验结果表明,热浸法提取黄芪中甲苷和黄酮的效(上接第4059页)[6]刘宝华张所剑,等乳腺成体干细胞体内及体外特性的实验研究 igmeis Bid C.200246):35081-35087.]中国老年学杂志2007,27(5):447-49 [3] KENNEY N J. SMITH G H. 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