床旁分析技术

●1514●检验医学与临床2008年12月第5卷第24期Lab Med Clin,December 2008,Vol, 5,No. 24床旁分析技术吴晓勇,史俊敏(贵州省贵阳市第一人民医院50002)[关键词]床旁分析; 医学检验: 质量管理中囝分类号:R446文献标志码:A文章编号:1672-9455<2008)24-1514-02床旁分析(POCT)是指在患者医疗现场进行的实时医学表面,样品中的分析物将与抗体结合,加人标记第二抗体。反检验([1。从早期的使用液体试剂在试管中反应,发展为塑料衬应可直接肉限观察定性,也可用反射光度计定量检测。蛰干试剂(尿干化学)和集高新技术(基因芯片)的反应系统。3.2 层析和液体循环装置原理是 利用侧向流动。溶剂(通该技术最早用于家庭或医院患者在床旁监测尿糖和血糖水平.常是样品)流过含有标记抗体的多孔基质之后,进人固定第二随着新技术的发展,POCT使用更为便捷,范围更广,可监测血抗体的区域产生颜色反应,用反射光度计定量检测。例如衣原凝状态、心肌损害酸碱平衡、感染性疾病、药物浓度、内分泌体、药物、毒物、心肌标志物等。另一种利用免疫层析原理不用等。现已由临床检验扩展到食品卫生、环境和法医等。仪器达到定量。例如胆固醇测定:将血液样加到多孔基质-1 P0CT基本技术端.渗人含有酶标记物的溶剂贮存池，通过毛细作用样品和标POCT的仪器要求方便、准确、安全、快捷。可独立的.一记物流向固定抗体的反应区发生反应.样品中分析物浓度越次性检测装置,连接温度检测器、混合器、光吸收器、荧光检测高,反应面积和呈色带越长、越深。器时,既可实现定量又可进行数据处理贮存.如曲线校正.质控生物传感技术分析结果保存等(2)。生物传感器含有一个生物识别分子(酶、细胞、组织抗体、1.1 POCT设备简易的试纸条.手掌式读数检测器、全自动抗原、蛋白质,DNA等)和一个传导装置。常规应用的两个识多通道式检测器.别分子是酶和抗体或被检抗体检测的抗原,传导装置是利用电1.2 POCT材料 单层或多层材料装置.化学和光化学原理设计而成。例如将e知抗体标记在一个反1.2.1单层原理将被检样品滴在层析纸上,利用层析纸的射物表面构成光栅,样品中的抗原被捕获后将改变折光方式和特殊性质,血液将均匀分布,待检成分与预先浸渍在层析纸上反射光的颜色,通过光学检测器而达到定量的目的。另一项技的试剂产生颜色反应,有色产物通过与标准色板比较而定量。术是在波导表面产生瞬时光,以激发荧光的产生。波导构成反例如尿液中的葡萄糖在试纸中葡糖萄氧化酶的催化下,生成葡应室的一面;其比固有捕获抗体,标记有荧光的“二抗”沉积于萄糖酸内酯和过氧化氢。在过氧化物酶的催化下,过氧化氢使另一面或置于反应室中,样品加人后,标记“二”抗被溶解下来，色素原(邻甲联苯胺、碘化钾)氧化而呈色。被测物与固化的抗体及标记二抗形成“夹心"。瞬时波只激发1.2.2 多层材料 多层的分类:第一种多层试剂由高分子胶 波导表面的荧光分子,检测荧光强度可定量被测物浓度。片组成,上层是扩散层也是反射层,由醋酸纤维献和二氧化钛5 POCT的质量管理(TiO2)色素组成。使反应按顺序进行,直至终点互不干扰。临床实验室为了获取正确的检验结果,要求正确的从患者在膜的底层检测反射光的强度监测颜色的变化来定量。第二身上、在适当时间采取正确的标本,使用恰当的分析方法,合理种多层试剂由血液分离层和反应层构成，血液样品经过血浆分的费用,最后获得可靠的检验结果。由于POCT方便、快速，离层时,红细胞被过滤掉，上血浆进人玻璃纤维构成的贮存池操作容易,可由非检验人员操作,不必在正规的实验室进行,质与各种试剂反应,该设计避免了样品的制备。量控制难于保证。因此●必须加强POCT的质量管理。POCT2电化学检测装置的使用必须坚持与合格实验室实践的标准,开展室内质控、质电化学终点检测法是当今POCT技术的新进展，以血糖量保证、能力比对和记录.校正记录。检测为例,使用葡萄糖氧化酶和铁氰酸盐反应系统,检测条有5.1室内质控(IQC)IQC是控制检验性能的重复性或精密10个测定点,将其安装于检测器中,通过敏感电极检测氰铁酸度,保证系列结果的一致性,实时评价检验性能是否符合规定盐的还原产物而定量葡萄糖浓度。该装置叮小到类似于钢笔,要求,是否建立在可接收范围内。在分析前.分析中分析一定也有手掌式检测器。的质控物浓度,可以确认分析过程和操作是否正确。均值标非仪器定量检测条,不需要特殊检测器,但可通过呈色的准差质控最常用的质控方法，是以生化室内质控图的制作为大小、颜色的深浅而定量。例如胆固醇测定:试剂和样品通过例。用单一浓度未定质血清反复测定20次(批间、日间),计算层析条中含胆固醇脂和氧化酶的区城,产生过氧化氢反应,该均值()、警告线(工士2s)和失控线(士3s)。用同批号的质控物进入含有辣根的过氧化物酶和MBTH/DMA的检测区,产血清,随患者标本分析,结果点在图上,直线连接。生颜色变化。呈色的大小深浅与含量呈正比。葡萄糖测定:葡5.2-警告一个结果超出靶萄糖分析系统含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶指示剂染料和.值的中国煤化工超出靶值的3倍标准葡萄糖氧化酶抑制剂。抑制剂浓度是建立在每- -分析区临界差。 2fHCNMHG向超出靶值的2倍标值浓度值域上。颜色的变化区城数取决于分析物浓度。准差。R.行动表示2个连续结差异超出4倍标准差。4.行动3免疫分析装置表示4个连续结果在同- - 方向超出靶值的1倍标准差。102。3.1 流动式装置其原理是将第- -抗体共价结合在多孔基质行动表示10个连续结果在同一侧。该规则要求每天做2次质检验医学与临床2008年12月第5卷第24期L.ab Med ClinDecember 2008,Vol. 5.No. 24●1515●控分析。对于POCT质控,要求操作者在分析时作一次质控安全、键康要求,如样品和消耗品的处置;(10)开展POCT的分析。不需仪器分析的由制造商提供阴性、阳性对照。利弊。培训后,经专门的相关组织考核,发给认可或合格证书，5.3窒间质量评价(EQA) EQA 是能力比对试验,是比较不并定期接受检查和再培训。同检验点的试验性能。参与实验室在同- -时间 、对同- -样品进6.7 国内外对于 POCT应用的管理方法(门(1)美 国的管理行分析,将分析结果回报给组织者。组织者对回报结果进行分办法 :按照美国法规,开设任何一个POCT点都必须接受政府析,相互与靶值进行比较分析。对每一个参与者的结果作出评有关部门审核,有人员培调训计划、认可证书、有对检验科所要求价。EQA评价实验的实验性能，而对患者样品的检验结果的 的所有制度,有质量保证、质量控制措施,有各项文档记录,以质黛控制则依赖于IQC, POCT 开展EQA难度较大，及有和检验科结果的比对和工作协调的程序性文件和记录。5.4 质量保证 开展临床实验室所要求的质控活动。要求 经审核批准后,在规定时间内开展有关项目,期间还必须参加POCT仪器稳定方法准确可靠、耐用、操作方便。人员培训简政府指定的室间调耷评价,随时接受政府有关部门的质量评单、易使用者接受。维护保养、试剂保存方便。估,不合格者将取消其开展资格。POCT的所有活动计划都必6 POCT 应用指南0]须服从美国病理家学会的实验室认可标准要求,POCT的所有开展POCT的主要原因是缩矩检验时间。患者的受益是检查项 月都须经过认可。认可内容包括能力比对、质氧控制和缩短住院时间.检查方便。医院受益是节省支持性耗材。质量改善、标本处理试剂、校正和标准物及过程、仪器设备、人6.1 问题分析 检验项目少,操作人员缺乏正规的培训,工作 员素质和职责.实验室安全等。(2)英国的管理办法:POCT检环境不- .定符合分析要求。验也需要通过英国皇家病理学会的认可,其认可标准包括组织6.2 生物安全问题 生物安全保障困难.管理、人员和指南、设施和设备、政策和策略、人员发展及教育6.3效益分析哪些患者需要效 益分析,现在实验室服务存5个方面。在什么样的问题.实验室的检验费用与POCT比较差异是否POCT是临床实践的一部分。从商业上讲,它有几十亿美较大,实施POCT人员能否标准操作，提供准确.可靠的检验元的市场。高精技术的应用及操作指南的管理体系的逐步健结果,患者是否接受,是否有适合的仪器.便于保存的试剂和消全,使POCT的应用前景广泛,但真正效益还并非明确,尽管耗品。最重要的问题是使用POCT临床受益什么?患者受益它的使用极 大缩短了检验结果回报时间( turn around time,什么?是否能提高医疗服务水平?TAT),但对死亡率、住院率、住院时间的改善并不明显。因6.4 性能分析POCT的服务文持与实验室检验有很大的不 此,关于POCT的有效性还有待进一步研究。由于医生对快同,如技术、装备、人员素质、实验条件、质量保证体系等。速诊断的要求(特别是 在加强病房、急诊室),患者作自我临测POCT的性能评价包括仪器的技术性能、人员素质、结果分析的需要,以及新 技术的整合,使得POCT的发展势头必将继续判断解释、标本的采集管理、生物安全措施.检验结果的可靠下去。性、结果的记录等。6.5 设备的选型 需要用于哪些项目的检验?要求的准确性参考文献和精确性.检验周期是多少?常规分析量是多少?要求的环境1 陶 义训.对POCT的认识[J].上海医学检验杂志,999,14条件、消耗品的贮存条件.维护保养条件,体积大小,仪器使用(3);3. .的难易程度,安全支持条件.检验结果与专业实验室结果是否2丛玉隆.当代检验分析技术与临床[M].北京:中国科技出-致。版社,2002.368.6.6 人员培训为保证POCT的检验质量,有必要对使用者3彭黎明.检验医学自动化及临床应用[M].北京:人民卫生进行培训。培训内容包括分析前、分析中和分析后的全过程，出版社,2000. 14.具体内容为:(1)检验.临床、病理生理的基本知识;(2)标本类4 Hadson MP. Cavdiac mauvestpoint of care tesing[J]. Clin型、采样时间要求.生理变化、药物影响等;(3)标本采集技术;chim Acta,2999 ,4(2) :32-37.(4)分析仪器及试剂准备;(5)试验操作;(6)质量控制和质控分析.解释;(7)结果记录、报告和保存;(8)结果解释及咨询;(9)(收藊8期:2008-06-30)(上接第15f1页)3米洪元,杨健.SCRP在AOPP中的价值[J].中华临床医药杂志,2002 ,3(22) :68.参考文献.4杨健.外周血WBC增多与临床[J].医师进修杂志,1990,131杨健,陈高红. C-反应蛋白的临床应用近况[J].重庆医药，(4) :29-31.1992 ,21(2):123-125.2黄维周,徐勉珍,谌辉,等. C反应蛋白在感染性疾病中的临中国煤化工(稿日期200807-03)床研究[J].中华内科杂志,1993,32(1) :55-56.MHCNMHG