通痹膏的提取工艺研究

2016年第37卷第6期云南中医中药杂志通痹膏的提取工艺研究刘凤乐,杨忠进,谢建苗,王蕊蕊,高文全(大理州中医医院,云南大理671000)摘要:目的优选通痹膏的最佳提取工艺。方法采用L(3“)正交试验法,考察加水倍量、煎煮时间和煎煮次数3个因素以提取物干浸膏得率为考察指标,优选确定最佳提取工艺。结果最佳提取工艺为A3B2C3,即加水倍量12倍,煎煮时间90min,煎煮次数3次。结论通过验证实验,通痹膏提取工艺合理可行,所优选的提取工艺条件提取浸膏得率较高,能够较好的保证有效成分提取率。关键词:通痹膏;正交实验;提取工艺中图分类号:R84文献标志码:A文章编号:1007-2349(2016)06-0073-03通痹膏是根据本院临床验方所研制的院内中药制剂,由的以肢体、关节疼痛、酸楚、麻木、重着以及活动障碍甚或关节忍冬藤、透骨草、木瓜、桂枝等药物组成,用于中老年风湿痹肿大灼热等为主要症状的病症,临床上具有渐进性或反复发痛腰腿疼痛等病症。痹证,正如《素问·痹论》所云:“风作的特点。其病机主要是气血闭阻不通,肌肉关节失于濡养寒湿三气杂至,合而为痹也”。是因为感受风寒湿热之邪引起所致。西医治疗痹证所采用的方法是抗炎镇痛与激素治疗,耳中单一核细胞、中性粒细胞浸润和充血水肿2组与模型组机制,并通过急性毒性试验从科学角度验证其毒副作用比较有统计学差异(P<0.05),但凉血止痒合剂组和阳性对照通过以上的研究表明,凉血止痒合剂具有较为明确的抗组比较没有统计学差异(P>0.05),说明凉血止痒合剂与醋酸炎作用,其抗炎作用可能与提高细胞因子L-10的产生水平地塞米松片均具有抗炎的作用,但凉血止痒合剂的抗炎作用有关,且无毒副作用,安全有效。不仅为其它变态反应参与的并不优于醋酸地塞米松皮肤病的防治开拓新的思路,同时为名老中医临床经验的应在细胞因子L-10的研究中,与模型对照组比较,阳性推广提供了科学依据,为进一步挖掘及研究名老中医学术药地塞米松和凉血止痒合剂药物均显著提高具有免疫抑制活思想和临床经验提供了新的思路性细胞因子-10的产生水平,差异均有显著性意义(P<0.05),但阳性对照组与凉血止痒合剂组比较,差异不显著参考文献(P>0.05);说明地塞米松和凉血止痒合剂均通过提高具有免[1]赵辨.中国临床皮肤病学[M]4版.南京:江苏科技出版社,疫抑制活性细胞因子L-10的产生水平来达到抗炎的作用2010:95-97,140,717-760但凉血止痒合剂并不优于醋酸地塞米松。对于IFN-y的影[2]李敏.疏风饮对变应性接触性皮炎小鼠脾指数、胸腺指数及IFN-y与-4分泌的影响[J].实用中医内科杂志,2011,25(1):响研究中,与模型对照组比较阳性药地塞米松组IFN-y产24-25生显著减少,差异有显著性意义(P<0.01),然而凉血止痒合[3]任兴斌,诸葛宝忠,季海生,湿疹患者外周血CD4·Cm2s剂对小鼠细胞因子IFN-y产生无明显的影响(P>0.05),说FOXP3+调节性T细胞和血清L-4,L-10,TGF-B检测及临明地塞米松通过降低IFN-y的水平,进而发挥抗炎症作用,床研究[门].现代检验医学杂志,2010,25(3):131-133但凉血止痒合剂对IFN-y水平的影响不显著。中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社通过急性毒性试验,对照组和凉血止痒合剂组小鼠均存活肝脏解剖未见明显异常,表明凉血止痒合剂无毒副作用,[5]双双,赖维,变应性接触性皮炎免疫学发病机制研究进安全有效。展[打].国际皮肤性病学杂志,2011,37(3):158-160凉血止痒合剂临床应用已十多年,并在云南中医医疗集6朱平,杜小萍鞠吉雨.Ⅱ-10与疾病关系的研究进展[J国际免团20余家医院广泛使用,临床疗效显著,具有明显抗炎止痒疫学杂志,2012,35(1):14-17的作用,且无明显毒副作用。现代药理学研究证明其组方中[7]杨正生杨会君,王亚斐,等,丹皮酚对小鼠变应性接触性皮炎的黄芩、丹皮、赤芍、紫草、荆芥均有一定的抗炎作用,对I、Ⅱ、Thl/Th2分子表达的影响[J].山西医科大学学报,2012,43(12):I和Ⅳ变态反应均有抑制作用,对白介素、IFN-y等细胞因[8]刘欣,李萍,赵京霞,等.凉血活血胶囊全方及拆方对 Jurkat T淋巴子的表达水平均有影响,为组方的合理性提供了一定现细胞增殖活化及释放细胞因子的影响[J.中国实验方剂学杂代药理学依据,但中药复方通常作用于机体多靶点、多环节是个复杂系统,故有必要进一步深入研究,阐明其抗炎的作用中国煤化工g期:216-03-28CNMHG作者简介:刘凤乐(1984-),男汉族,安徽蚌埠人,主管药师研究方向:院内制剂研发。E-mal:ncpu@163.com云南中医中药杂志2016年第37卷笫6期重点是解除患者的症状如疼痛、肿胀、功能缺失;而中医则侧2.4浸膏得率的测定按照L2(3)正交表安排实验,分别精重于病因、病机治疗,如祛风、除湿、散寒、活血、通络、扶正等,密吸取9组实验一定体积的提取液置于已干燥至恒重的蒸尤其是西医的激素治疗与中医的扶正治疗几乎是正相反的,发皿中加热浓缩至稠浸膏(含水量约为40%-60%),转移个是运用免疫抑制剂;一个是增强免疫功能。而且西药治至水分测定仪测出含水量,计算出浸膏得率。疔痹证会带来些许副作用,从而影响患者的身体,不宜长期使2.5工艺流程用。通痹膏外敷于局部经透皮吸收后控制和缓解疼痛标本称量药材_→煎煮药材_≯浓缩药液→测稠膏水分兼治,对于长期用药的患者来说比较合适。为更加方便患者的携带使用,改变原有应用方式,对通痹膏的提取工艺进行研计算浸膏得率究,为该剂型进一步研究奠定基础。26提取工艺优选6依处方组成配比称取药材,先浸泡1仪器与试药30mn,然后按L(3“)正交表安排试验进行煎煮提取将煎煮所1.1仪器AR423DCN电子天平(奥豪斯仪器有限公司);得溶液浓缩得浸膏分别计算浸膏得率分析结果见表2,表3。表2正交实验设计及结果D215CD电子天平(奥豪斯国际贸易有限公司);MB54卤素水分测定仪(奥豪斯仪器有限公司);C21-S2118电磁炉(广因素评价指标东美林生活电器有限公司); SUPERwscYLRO-3000M水处A(加水倍量)B(提取时间)C(提取次数)D浸膏得率(%)理系统(谊利广州有限公司);HH.S型电热恒温水浴锅(上海医疗器械五厂)。1.2试药药材购于云南白药集团股份有限公司中药饮片1234l1.60712.616分公司(由中药库采购,经赵爱梅副主任药师鉴定均为合格232323313.7792方法与结果3210.60721提取方法的选择结合临床应用经验和生产条件组方715.413药材分为两部分,一部分为贵重药材或主要化学成分不宜煎煮药材打成细粉入药,另一部分主要含有机酸类、皂苷类等极15.506性较大成分药材采用水煎煮。22L(3)正交试验的设计2-5根据煎煮法的条件选择K12.224965612.785加水倍量(A)提取时间(B)及提取次数(C)3个条件为考察k213.27512.59613.653112.565因素,各因素根据实际情况均取3个水平,以提取物干浸膏得Kl2.93314.46612.402率为评价指标筛选最佳提取工艺因素水平表见表1,L2(3“)3.3420.7094.8100.383正交实验安排表见表2表3方差分析表表1因素水平表方差来源离差平方和自由度方差F比P值显著性因素水平18.89929.45085.131<0.05加水倍量(A)煎煮时间(B,h)提取次数(C)B0.75320.3773.392>0.0539.632219.816178.523<0.01D0.2203注:Fa05(2,2)=19,Fa01(2,2)=9923稠浸膏水分含量测定方法釆用卤素水分测定仪测稠结合极差分析表和方差分析表以提取物干浸膏得率为浸膏水分含量该仪器可用来测量任何物质含水量。考察指标各指标因素的主次顺序为:C>A>B,提取过程中23.1卤素水分测定仪的操作原理该仪器的操作是根据提取次数对试验结果有极显著性影响,加水量对试验结果有热解重量原理。开始仪器测量样品重量,内部的卤素加热单显著性影响提取时间对试验结果影响不大结合K值越大的元和水分蒸发器快速干燥样品。在干燥过程中,仪器持续测工艺条件越有利于浸膏的提取,确定通痹膏提取条件量并显示结果。干燥完成后,结果以水分含量%、干重%重为A3B2C3。量和回潮率%显示。2.验证实验书干艺条件BC1进行验证实验两2.3.2水分测定仪测量条件①温度程序:阶梯;②干燥温次实验平均结中国煤化工理想,说明该工艺度:0-4min,升至200℃,4min后降至105℃;③关闭模式:条简单可行。CNMHG大规模生产。从60mn;④测量时间:5min。生产的综合效益出发,考虑到节能降耗、缩短生产周期等因2016年第37卷第6期云南中医中药杂志素,最终确定了各因素的最佳水平组合。煎煮。并且,药材浸泡30min的吸水量,经多次实验验证可忽28追加实验90由直观分析表和方差分析表可以看出,略不计。实验结果显示3个因素的最大K值都落在最高水平上,由于3.2评价指标的选择通痹膏组方由将近20味药材组成提取时间对实验结果的影响没有显著性差异,所以对加水量组方复杂,且“君药”均以粉末入药,提取部分药材多为“臣和提取次数这两个因素分别进行追加实验,即在最佳提取工佐、使”药,含有10多味药材,无法确定具体以哪一个有效成艺A3B2C3基础上分别将加水量12倍换为14倍和将提取次分或有效部位作为评价指标,最终选择水煎煮经常采用的提数3次换成4次,2组实验,分析结果见表4,图1。取物干浸膏得率为评价指标。表4追加实验结果比较表3.3最佳提取工艺的确定正交试验的极差分析结果显示3因素浸膏得率(%)个因素都落在最高水平上,只有加水量和提取次数对实验有14倍量水17.861显著性影响,而提取时间对实验无显著性影响。所以就在加提取4次17.90水量和提取次数上对实验进行追加,结果显示与最佳提取工艺(A3B2C3)无显著差性异,再从生产的综合效益出发,考虑42086到节能降耗、缩短生产周期等因素,最终确定各因素的最佳水平组合为A3B2C3。为医院制剂通痹膏的申报和生产提供了相应依据。参考文献[1]柯年美柯晖,王小云.痹证的中医治法及常用治痹中药的功效与加81012提21.52运用比较[].中华中医药学刊,2007,25(1):141-142[2]宣伟东,袁志仙,成熙.正交试验法优选生姜抗晕凝胶膏剂的制备工艺[冂].中国实验方剂学杂志,2013,19(7):53-5图1效应曲线图[3]熊迎春.正交试验法优选止痛消炎膏提取工艺[J]中国现代药物由表4可以看出,14倍量水和提取4次2组实验的浸膏应用,2010,4(13):97-98得率与2次验证实验的平均浸膏得率17.297%相比并无显著[4]钟小群李艳王丽静等.正交试验优选丰城鸡血藤的提取工艺差异,结合图1,可以看出,加水量10倍以上变化趋势渐缓,提研究[J中草药,2009,40(7):106-1068取次数趋势变化也放缓综合考虑实验的严谨性、实际生产的5]李克王曙东吴龙琴等多因素正交试验法优化忍冬藤提取工合理性,多次提取有可能含大量杂质,所以就不再继续追加实艺研究[门].现代中药研究与实践,2013,27(20):39-41.验,确定最佳提取工艺为A3B2C3[6]许树军邹淑君,王冬梅,等.桂苓五味甘草汤煎膏剂提取工艺研3讨论究[J].中医药学报,2012,40(3):115-117[7]赵剑,蒲清荣,陈玉兰,等,肾纤康颗粒水提取工艺研究[J].泸州3.1提取方法的讨论通痹膏是由忍冬藤、桂枝等中药组医学院学报,2010,33(1):34-36成,其部分药材为贵重药材脂溶性有效成分含量较多,部分[8]赵剑,王桥,黄锐,等,正交试验法优选茵陈四苓颗粒水提工艺药材为含有机酸类、皂苷类等极性较大有效成分,鉴于药物的[J].泸州医学院学报,2013,36(5):455-457主要化学成分的有效溶出,考虑了几种提取方法,包括水提醇9]都述虎夏重道付铁军.龙薯横总皂甙水解条件的优化[J中成沉法、超声提取、微波提取、乙醇回流提取、蒸馏法提取挥发药,200,22(9):608-610油,因为是医院制剂,仪器设备不足,没有乙醇提取和回收装[10]祝星富志军,朱鹃等,巴布剂提取、工艺研究[J]海峡药学,置,结合临床用药方便及疗效,最终选择将贵重药材和脂溶性012,24(8):46-49有效成分含量较多药材打粉,含极性较大有效成分药材用水(收稿日期:2016-04-15)欢迎使用电子邮件投稿E-mail: yzyy@ chinajoy中国煤化工CNMHGKMKxKa