色谱柱老化，到底什么才是重点？
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经常有粉丝询问我们关于 色谱柱老化 的问题，色谱学堂做过两个专门讲老化问题的视频，今天，我们就一起分享给大家。
首先，我们要定义一下，什么叫做 老化 ，有两种情况：
第一种情况 ， 新的柱子使用之前 一般会先做老化 ， 主要目的是 去除键合不够稳定的固定相 ，让新柱子性能更稳定。
另一种情况 ，是 做了一天样品 ， 怕柱子里有残留 ，也会说今晚要老化一下柱子，或说烘烤一下柱子。
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气相色谱柱使用一段时间后柱子里面会有 高沸点杂质残留 ，这些残留的污染物和样品作用，容易导致 色谱峰拖尾 ， 杂质峰 等问题。
另外，目前常用的气相色谱柱是毛细管柱中的 涂壁开管柱 ，它的固定相是液体以 涂覆 的形式分布在柱管管壁的内侧。
色谱柱长期在高温下使用， 固定相会缓慢流失 ，这就造成了毛细管柱内壁活性基团 硅基暴露 ，暴露的硅基 吸附样品 也会造成 色谱峰拖尾 ，以及 基线起伏、噪声升高 等问题。
为了避免发生这些情况，我们就需要对使用时间较长的气相色谱柱进行 老化操作 ，老化可以 除去色谱柱中残留的污染物 。
也可以让色谱柱内壁上的 固定相 热胀冷缩后 重新覆盖 住部分活性点，这样就延长了色谱柱的使用寿命。
关于气相色谱柱的老化，有各种各样的说法，比如有设个缓慢的升温程序走一整晚的， 也有忽高忽低走好几次循环的 ， 也有些实验室就简单粗暴的直接升到高温下烘烤。
那到底怎样做才能有好的效果呢？
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老化的第一个重点是 温度 。 老化的 最高温度 通常推荐设为 方法最高设定温度和色谱柱耐受温度的中间值 。
比如，这个方法的最高温度是300度，色谱柱的耐受温度是325，就可以老化到310度。
但要注意的是，不同的柱子耐受温度有很大差别，极性强、膜厚大的柱子通常耐受温度比较低。
比如这根DB-wax 柱的恒温耐受温度只有250摄氏度。如果膜厚增加到0.5um，耐受温度还会进一步下降到240摄氏度。
建议同学们老化之前要仔细看一下色谱柱的包装盒或者说明书，因为超过温度上限使用色谱柱对性能和寿命都影响很大。
值得注意的是色谱柱老化时 温度越高伴随着固定相的流失也会越严重 ，所以老化温度以及老化时间需要精确把握。
色谱柱老化的温度并不建议越高越好，而是在保证能 赶走污染物的前提下 温度越低越好 。
举个栗子，平时做样品时的最高温度会做到220度，而已知的样品中杂质的汽化温度不超过260度，那么只需要将老化温度最高设置到260度就可以了。
如果我们不知道样品中杂质的汽化温度，大多数情况下可以在做样品运行最高温度往上加20-50度就可以了。
具体的老化程序， 通常会缓慢升温至老化温度，比如2~5摄氏度/min，然后再继续老化2个小时 。 程序升温的速率可以根据自己的经验或者实验要求来设置。
比纠结具体的升温速率更重要的事情是 绝对避免氧气的存在 ，这也是老化失败最常见原因。
因为高温下的氧气是破坏化学键的好手，而色谱柱里的固定相一旦氧化，彼此间的键键链接会被破坏，固定相就不再能稳定“固定”在色谱柱里，造成大量柱流失，柱效也会大幅下降。
从避免氧气的角度，严格的老化需要注意以下几点： 第一，把色谱柱末端伸入溶剂中，观察是否有连续气泡 ，如果没有，要检查是否漏气，色谱柱断裂或者堵塞。
第二，升温前，先通15min载气 ，置换掉色谱柱中可能存在的氧气。
第三，确保其它接头，正确安装。
另外，从避免污染的角度来说 ， 新柱子老化的时候，最好不要连接检测器 。
如果是FID检测器， 可以不用点火，也不用开氢气和空气 。
如果是已经使用的柱子，怕有残留，希望通过高温老化去除污染物，有些实验室甚至每天都会在关机之前运行一针老化方法，但这种做法，其实是有一定风险的。
因为这种污染，往往是 沸点高 的化合物， 一般聚集在柱头 ，比如样品中的色素、蛋白质、胶状物等等， 盲目的老化可能会促使污染物更快的向后转移，却不能完全排出色谱柱，反而会污染整根柱子 。
正确的做法应该是 先分析样品的成分和污染情况。
如果是存在老化温度也不能完全气化的成分，比如色素、蛋白质、胶状物等，那在老化之前， 应当先进行色谱柱的维护 ，包括 换衬管、色谱柱柱头切割 ， 去除污染源再做老化，才是有意义的。
最后，我们回顾一下老化的要点
1、查看说明书，确定老化温度 2、检查仪器连接，确保无氧 3、最好不接检测器 4、必要时，先做进样口维护 5、缓慢升温至老化温度，保持2小时
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