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献给初学者:手把手教你做细胞计数实验

时间:2023-07-01 来源: 浏览:

献给初学者:手把手教你做细胞计数实验

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细胞 培养 技术中, 细胞计数 是一项基本功,对于标准化培养条件以及需要精确定量的实验来说都非常关键。 本文介绍细胞计数的经典方法以及中间一些需要注意的细节。
微载体细胞计数的难题与解决方案
细胞计数实验标准 protocol
❗️血细胞计数器计数法
❗️ 网织红细胞计数实验

进阶

计数换算与注意事项

计数的换算
计完数后,需换算出每 ml 悬液中的细胞数。由于计数板中每一方格的面积为 0.01 cm²,高为 0.01 cm,这样它的体积为 0.0001 cm³,即 0.1 mm³。由于 1 ml=1 000 mm³,所以每一大方格内细胞数 ×10 000 = 细胞数 /ml,故可按下式计算:
细胞悬液细胞数 /mL =4 个大格细胞总数 / 4×10 000。如计数前已稀释,可再乘稀释倍数。计数细胞后,计算细胞悬液浓度并求出存活与死亡细胞数的比例。
注意事项
1、向计数板中滴细胞悬液时要干净利落,加量要适当,过多易使盖片漂移,或淹过盖片则失败,需重做,过少易出现气泡。不理想时,应重做。
2、镜下计数时,若方格中细胞分布明显不均,说明细胞悬液混合不均匀,需重新将细胞悬液进行混合,再重新计数。
3、在计数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求每小格内约有 5~10 个菌体为宜。
4、如遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为两个菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算样品的含菌量。
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