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晕！还有人不会用 Trizol 同时提 RNA 和蛋白吗？

时间：2023-03-14 来源：浏览：

生物学霸

生物学霸

微信号 ShengWuXueBa

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师弟

师兄！实验又又又扎堆了，这周一直在提 RNA 和蛋白质，一个数据也没有，明天组会肯定要被老板骂了！

怎么这么慢， 你不是同时提取 RNA、DNA 和蛋白质的吗？

师兄

师弟

啥？师兄快传我这套 protocol！提取出来的浓度怎么样？

下面 这套 protocol 你先收藏 ，应用范围和浓度问题，师兄再和你细细说。

师兄

一招提效！

同时提 RNA DNA 蛋白质

TRIzol 试剂适用于从细胞和组织中快速分离 RNA。 最大特点是可同时分离一个样品的 RNA、DNA、蛋白质。

提取的 RNA 无蛋白质和 DNA 污染，可用于 Northern Blot，dot blot，ployA 筛选，体外翻译，RNase 保护分析和分子克隆。 DNA 可用作标准，比较不同样品 RNA 的得率，也可用于 PCR 和酶切。 蛋白质可用于 Western Blotting。

师弟

师兄， 这也太省时间和样本了吧！那得到的样本浓度有保障吗？

如果想拿到高浓度样本，需要按照以下 3 步进行优化，快做好笔记！

师兄

3 步排查！

提升样本浓度

1、RNA 浓度低排查 list

一般有以下几种可能：样品裂解或匀浆处理不彻底； RNA 沉淀未完全溶解；样品匀浆时加的试剂量太少；匀浆样品时未在室温放置 5 分钟；吸取水相时混入了有机相； RNA 沉淀未完全溶解。逐个排查，提升样本浓度。

更多 RNA 提取问题可查看 RNA 提取与检测专题，搞定全部细节问题。

2、DNA 浓度低排查 list

可能是：样品匀浆和裂解的不彻底；最终得到的 DNA 沉淀没有完全溶解；酚除去的不彻底； DNA 出现降解； RNA 污染 DNA。

更多 DNA 提取问题可查看 D NA 基础知识专题，搞定全部细节问题。

3、蛋白质浓度低排查 list

一般包括：样品裂解或匀浆处理不彻底；最后得到的蛋白质沉淀未完全溶解。也有蛋白质出现降解的可能。

更多蛋白质提取问题可查看 WB 专题，搞定全部细节问题。

以上就是 DNA/ RNA 和蛋白，同时提取的实验 protocol，以及提升各自浓度的小技巧，省样本浓度高！

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