攻城狮教你快速排查液质联用仪器“未出峰”问题
攻城狮教你快速排查液质联用仪器“未出峰”问题
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来源：沃特世技术服务
当您在使用LC-MS/MS进样测试的过程中出现目标物未出峰的问题时，如果系统配置内有TUV等紫外检测器，可通过对比紫外色谱图数据是否正常来快速排查问题是发生在LC侧还是MS侧。可参考以下步骤快速排查。
LC端
1、检查样品的前处理是否正确？
如溶解样本的溶剂是否发生变化，导致样品没有被溶解。
2、检查流动相
流动相是否添加了适合的添加剂？ 如 甲酸和氨水 。
流动相是否是 新鲜 配置 的？
有机试剂要求使用 色谱纯级别以上 ，推荐使用进口品牌。水相溶液要用 超纯水（18.2 MΩ）当天制备 。使用时间过长，流动相内的添加剂挥发或长菌，会导致目标物的电离效果变差。
流动相内不可添加不挥发性的盐或无机酸等 。
流动相储液瓶不可使用表面活性剂等清洗。
3、进样器的吸样量是否正确？
样品注射器渗漏或者有气泡会导致吸样量过低或者无法正常吸取样品。
在MS Console内运行样品注射器的渗漏测试，若测试无法通过，则可能是注射器渗漏或者有气泡。可以在MS Console内运行样品注射器的灌注后再次进行测试。若依旧无法通过，则可能为注射器磨损，此时需更换。
注意进样小瓶瓶盖不可拧地过紧或者样品液面高度过低，否则会导致吸样量不准确。
图1. 样品注射器的位置
4、关注目标化合物是否无法被洗脱？
例如， 色谱柱故障或者液相梯度方法无法满足目标化合物洗脱要求等，会导致目标物无法被正常洗脱，引起不出峰。
5、 关注系统管路是否漏液？
系统管路漏液导致目标化合物无法到达质谱检测器，检查系统管路各个接头是否漏液。
MS端
1、检查质谱通讯是否正常？
当质谱工作站 通讯异常 时，会出现无法正常生成色谱图的问题。
可以在Windows的Run内，输入指令：ping epc -t，以检查质谱和工作站的通讯情况。
2、检查毛细管喷雾是否漏液？
若无喷雾，可能是由于：
系统管路存在漏液处，导致液体无法到达毛细管；
毛细管堵塞或漏液。
3、检查隔离是否阀关闭？
确保Ion block上的隔离阀是打开的。
4、检查质谱的Divert Valve是否位于waste位置？
如果质谱的Divert Valve位于waste位置，会导致样品全部流入废液。
若进样时，Valve位置未能切换到LC，则需检查MS file的Method events内的阀位置设定是否是LC并确保Enable勾选。
图2. 质谱流路选择阀的设定
5、检查系统内是否附着离子或质子？
检查系统内是否引入了Na+，导致电离生成[M+Na]，抑制了[M+H]电离生成。
图3. 附着离子或质子的影响
6、检查方法文件是否调用正确或反馈是否正常？
检查Sample List内的MS tune file（及其对应的calibration file），Inlet file和MS file是否调用正确，进样体积是否设定正确。
检查MS tune界面内的设定和反馈参数是否正常？
检查毛细管电压，锥孔电压等反馈是否正常？Diagnositic界面内的PMT电压等反馈是否正常？
7、检查质谱的质量轴和分辨率是否正确？
使用仪器的调谐液和校正液，检查仪器的质量轴和分辨率是否正确？若发生偏移，可重新运行Intellistart resolution和Intellistart calibration。
8、定期重新调谐样品方法文件
重新配置目标物的标准品调谐液，调谐目标物的仪器方法参数。
9、检查质谱是否需要清洗维护？
毛细管和离子源的污染会降低离子化效率和离子传输效率。
可按照质谱操作维护手册，更换毛细管组件，清洗质谱的Ion block, Twave (或Stepwave)。
10、检查实验室的温度和湿度符合要求？
若实验室的温度波动过大，容易导致质量轴发生偏移。同时，也会影响真空系统的工作效率，导致质谱仪容易被污染，引起仪器灵敏度降低。