乙醇对肠黏膜屏障功能的影响及作用机制

目的 探讨乙醇对肠上皮细胞屏障功能的影响及作用机制.方法 将不同浓度的乙醇与肠上皮细胞株Caco-2细胞共培养4h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及乳酸脱氢酶法(LDH)检测细胞存活率.应用Caco-2细胞建立肠上皮细胞屏障模型,不同浓度乙醇溶液处理后,测定其跨上皮细胞电阻值(TEER)及荧光黄透过率的变化.应用蛋白印迹法及免疫荧光染色法检测紧密连接蛋白occludin的表达和分布.结果 乙醇浓度≤5％时,不影响Caco-2细胞的生存率.乙醇诱导肠上皮细胞屏障通透性增加,呈浓度-时间依赖性；乙醇作用后,细胞膜上occludin表达逐渐降低,60 min时达最低值,细胞膜上呈点状分布,此后部分可逐渐恢复,趋势与TEER值及荧光黄透过率一致.结论 乙醇可破坏细胞间紧密连接蛋白,进而诱导肠上皮细胞屏障通透性增加.