祁木香提取工艺优选

第18卷第9期中国实验方剂学杂志Vol 18, No 92012年5月Chinese Journal of Experimental Traditional Medical FormulaeMay,2012祁木香提取工艺优选王刚,侯志飞,相会欣,谷菲菲,张雪荣(河北化工医药职业技术学院,石家庄050026)摘要]目的确定祁木香的最佳提取工艺。方法:采用正交试验对祁木香提取工艺进行优选,以土木香内酯和异土木香内酯含量为指标,考察乙醇体积分数、溶剂用量提取时间、提取次数4个因素的影响,采用HPLC进行含量测定。结果:最佳提取工艺为15倍量85%乙醇提取3次,每次Ih。结论;该优选提取工艺稳定可行、提取率高,为祁木香的提取提供科学依据关键词]祁木香;提取T艺;正交试验;土木香内酯;异土木香内酯【中图分类号]R283.6【文献标识码]A[文章编号]1005-9903(2012)09002603Optimization of Extraction Technology for Inula heleniumWANG Gang, HOU Zhi-fei, XIANG Hui-xin, GU Fei-fei, ZHANG XHebei Chemical and Pharmaceutical College, Shijiazhuang 050026Abstract] Objective: To determine optimum extraction technology of inulaOrthogonal test was used to optimize extraction technology of I. helenium with the content of alantolactone andisoalantolactone as indexes. Effect of the concentration of ethanol. the amount of solvent extraction time andextraction times were investigated, the content of index components were determined by HPLC. Result: Optimumextraction technology was as follows: refluxing extraeted 3 times with 15 times the amount of 85% ethanol, 1 heach time. Conclusion: This optimized extraction technalogy was stable and feasible with high extraction ratio, itcould provide scientifie basis for extraction of I. heleniumKey words] Inula helenium; extraction process; orthogonal design; alantolactone: isoalantolactone祁木香在2010年版《中国药典》中以土木香名木香内酯含量为指标,采用回流提取法,采用正交试收载,为菊科植物的干燥根,为安国八大祁药之一,验优选祁木香的提取工艺。辛、苦,温,归肝、脾经,具有健脾和胃、行气止痛、安1材料胎的作用,用于胸胁、脘腹胀痛、呕吐泻瘌、胸胁挫SSI PC2000型高效液相色谱仪(美国SSI分析伤、岔气作痛、胎动不安等症3。祁木香的提取工仪器有限公司),JD104型电子天平(沈阳龙腾电艺研究对其产业开发、药理研究及扩大药源具有重子有限公司),祁木香药材购自河北省安国市药材要意义。目前只有采用CO2超临界萃取法和乙醇市场经河北化工医药职业技术学院李洪教授鉴定回流提取后经柱色谱法制备土木香提取物的专利报为菊科植物 Inula helenium l.的干燥根,取干燥的祁道“,未见其他文献,所能购到的市售土木香提取木香粉碎,过筛备用。土木香内酯(批号110760物均为土木香水提物。本研究以土木香内酯和异土200507)、异土木香内酯(批号076120002)对照品均由中国药品生物制品检定所提供,甲醇、乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯。收稿日期]20110825(015)[金项目】河北省科技支撑计划项目(10276431)2方法与结果一】王刚土碳从事中研究Mm:21忙中国煤忙含量测定851o165,E-mhil:we697@163.cm谱柱(4.6mmx[通讯作者]·张雪荣硕士,教授从事药物分离与纯化研究,250CNMHG5%碳酸水溶液T:03185116, E-mai: ZHXR62e163.cm(60:40),流速1.0mL·min,检测波长194mm,柱王刚,等:祁木香提取工艺优选温30℃,进样量20μL40mL,定量转移至50mL量瓶中,加乙醇至刻度,摇2.1.2对照品溶液制备精密称取干燥至恒重的匀,滤过精密量取滤液25mL,浓缩至近干,残渣加异土木香内酯和土木香内酯对照品适量,加甲醇分甲醇溶解转移至25mL量瓶中,甲醇稀释至刻度别配制成475,380mg·L"的对照品溶液。精密吸摇匀,滤过,取续滤液1mL,甲醇稀释至10mL,摇取对照品储备液2m,甲醇定容至10mL,播匀,得匀,滤过,取续滤液按21,1色谱条件进行测定,分质量浓度分别为95,76mgL的混合对照品液。别吸取对照品溶液、供试品溶液各20μL,进样,记2.L.3标准曲线绘制精密吸取对照品储备液5录色谱图见图1。正交试验结果见表2,方差分析见mL,采用倍比稀释法制得系列混合对照品溶液,分表3别进样20μ,测定其峰面积,得异土木香内酯和土木香内酯的标准曲线方程和相关系数分别为Y=82464X-10°(r=0.9992),在0.475~475叫线性关系良好;Y=110438X-859049(r=0.9993),在0.38-3.8gg线性关系良好2.2提取工艺正交试验根据预试验结果,以乙醇体积分数溶剂用量提取时间和提取次数为考察因素每个因素设计3个水平,按L(3)正交表设计正交试验(表1)分别取祁木香药材4g,按正交因素表中各因素水平进行回流提取,滤过,合并滤液,减压浓缩至约豪1祁木香提取工艺正交试验因素水平乙醇体积分数/%溶剂用量/倍提取时间/h提取次数A.对照品;B.供试品;1.异土木香内酯;2.土木香内酯1祁木香HPLC衰2祁木香提取工芝正交试膾安排异土木香内酯土木香内酯】12223332.718异土木香内酯0.6023.2383.ll4土木香内酾2.1192.0792.9110.1000.039YH中国煤化工CNMHG第18卷第9期中国实验方剂学杂志Vol 18. No 92012年5月Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae囊3祁木香提取工艺正交试验方差分析1.628%,1.691%,1.656%。说明确定的最佳工艺方差来源ssf是合理的。异土木香A32.050210213.68c0.013讨论<0.05市售土木香提取物均为土木香水提物,经测定C(误差)0.0032异土木香内酯和土木香内酯含量极低。分别取异土0.13422.77<0.05木香内酯和土木香内酯对照品溶液,在190-400土木香内A6625852.81<0.01am扫描,均在193-195mm有最大吸收,故检测波长定为194mm。C(误差)0.003预试验中分别以水、50%乙醇、60%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、无水乙醇等为注:Fa5(2,2)=19.00,50(2,2)=99.00提取溶剂进行提取。由于异土木香内酯和土木香内酯易溶于乙醇、三氯甲烷、苯、乙醚,几乎不溶于水,以异土木香内酯含量为评价指标,各因素对提若选用低体积分数乙醇则不利于有效成分提取完取工艺影响为A>D>B>C,以极差最小的C因素全,故正交试验中选择体积分数分别为75%,85%,为误差项进行方差分析,A因素有极其显著性影响,95%的乙醇进行考察结果表明85%乙醇提取率较B,D因素有显著性影响。结合直观分析结果,确定高,与预实验中单因素试验结果一致。最佳提取工艺为A2B2C3D3,即加15倍85%乙醇提取3次,每次1.5h。[参考文献]以土木香内酯含量为评价指标,各因素对提取[1」中国药典一部[S].2010:1工艺的影响与异土木香内酯一致,以极差最小的C[2」王绪颖,贾晓斌陈彥木香类药材的研究进展[因素为误差项进行方差分析,其中A因素有极其显中药材,2010,33(1):153蓍性影响。结合直观分析结果,确定最佳提取工艺[3]李雪莲朴嘉善土木香的化学成分及药理作用研究为A2B2C2D3,即加15倍85%乙醇提取3次,每次进展.中国现代中药,2007,9(6):28[4]李晓波霍炎,史海明等,用于促进胃动力的士木香综合考虑提取效率和成本等,确定最佳提取工提取物的提取方法:中国,l01380348[P].2009艺为A2B2C2D3,即加15倍85%乙酶提取3次,每次[5]侯志飞,张勉之,李洪,等高效液相色谱法测定祁木23验证试验按优选的最佳工艺制备供试品溶香药材中异土木香内酯和土木内酯[J]中草药2011,42(5):916.液,进行3次验证试验。结果提取率分别为异土木[责任编辑仝燕]香内酯2.511%,2.703%,2.611%;土木香内酯中国煤化工CNMHG