山楂黄酮提取工艺研究

安徽农业科学, Journal of Anhui Agri.Sci.2014,42(33):11857-11858责任编辑李菲菲责任校对况玲玲山楂黄酮提取工艺研究张明(楚雄医药高等专科学校药学系,云南楚雄675050摘要[目的]优化山楂果实和叶中黄酮的提取工艺。[方法]采用单因素和正交试验法研究不同工艺条件对山楂黄酮提取效率的影响,得出最佳提取工艺及相关参教。[结果]试验得出,山楂黄酮提取采用最适宜方法为渗漉法,其最佳工艺参数是:溶剂为50%的乙醇,料液比1:8g/ml,浸泡时间η2h,流速为中速(3ml/min)。[结论]此方法工艺简单,成本低,提取率高,无需加热,剩余物无有害残留,适用于山楂黄酮的大批量提取生产。关键词山楂黄酮;黄酮提取;渗漉法;正交试验中图分类号S661.5文献标识码A文章编号0517-6611(2014)33-11857-02Resrarch on extract technology to extraction of falconoid from hawthorn fruitsZHANG Ming( Chuxiong Medical College, Chuxiong, Yunnan 675005)Abstract [ Objective] To optimize technique for extracting nlavonoidsfrom hawthom fruit and leaf. Method] Using single-factor and orthogonalest method, effects of different technique conditions on extraction efficiency of favonoids from hawthorn were studied. The optimum extractiontechnique and relevant parameters were obtained. Result] The optimal method for extracting favonoids from hawthorn is percolation. The bestparameters are: 50% ethanol, solid-liquid ratio 1: 8 g/ml, soaking time 72 h, medium flow rate( 3 ml min).[ Conclusion] This process is simple, low cost, high extraction rate, no need for heat, the residual is unharmful to be disposed. The technique is suitable for mass production ofKey words Flavonoid of hawthorn; Extract flavonoids; Percolation method Orthogonal design当今社会,高血压、高血脂等心脑血管疾病已严重影响1.2方法人类的健康,因此,具有降压、降脂功效的药物研制一直受到1.2.1原料预处理。将干山楂果粉碎过20目筛,105℃干人们的广泛重视燥2h,备用。山楂为蔷薇科山楂属植物果实,又名红果。山楂果实含1.22标准曲线制作。精密称取芦丁15.0mg,加甲醇溶解有大量维生素C胡萝卜素、黄酮类化合物及钙、钾、镁钠等并定容至100ml,配制成150μg/m的芦丁标准溶液,作为对矿物质同时含有柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、山楂酸等多种有照品溶液。分别精密吸取芦丁标准液0、1.00、2.00、3.00机酸,能增进胃蛋白酶的分泌,具有消食化滞、助消化、增进4.005.00ml相当于含芦丁0、150、300、450、600、750μg,置食欲之功能。山楂中的总黄酮类成分可促使血管扩张及冠于12.5m比色管中,加30%的乙醇补至5ml,各加入5%亚状动脉血流量增加,对人体可以起到降血压、降血脂、增大心硝酸钠溶液0.30ml,摇匀后放置5min,加人10%硝酸铝溶脏血流量等作用。有研究结果表明,黄酮类成分中牡荆素化液0.3m摇匀后放置6min,加1.0mp/ L NaOH溶液2.00合物具有抗癌作用。山楂树叶不仅具有果实所含营养价值m,用30%乙醇定容至刻度,摇匀,放置15mn,以零管为空与药用价值,而且黄酮类化合物和维生素C含量高于果实10白。摇匀后用1cm的比色杯,在510m波长处测定吸光度,倍左右,因而更具开发利用价值23。测3次取平均值利用山楂果实和山楂叶提取黄酮类化合物,研制一种具1.2.3不同提取方法单因素提取。有保健功能的饮料酒——山楂黄酮酒,对果露酒、保健酒的1.2.3.1回流提取。取干燥山楂果粉10g,分别分别加发展是十分有意义的,同时,对进行山楂深加工,促进林果产50%、70%乙醇60ml(编号①、②),70℃回流提取3次,每次业发展将起到积极的作用3。Ih,冷却,过滤,转移至容量瓶,得山楂黄酮提取液,定容至1材料与方法200ml,测总黄酮含量,并精密量取25ml提取液,测浸出物1.1材料含量1.11原料及试剂。山楂,市售;芦丁标准品,中国药品生1.2.3.2冷浸提取。取干燥山楂果粉10g,分别加50%、物制品鉴定所。甲醇、乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、NaOH,均为70%乙醇80m(编号③④冷浸提取2次,每次24h,冷却国产分析纯试剂过滤,浓缩提取液,转移至容量瓶,得山楂黄酮提取液,定容112仪器及设备。双光束紫外-可见分光光度计,日本至200ml,测总黄酮含量,并精密量取25ml提取液测浸出岛津;DWF100植物粉碎机,河北省黄骅市科研器械厂;Sar物含量torus万分之一电子天平;恒温干燥箱;植物粉碎机;超声波1.2.3.3渗漉法提取。取干燥山楂果粉10g,采用渗漉法提清洗仪;恒温电热套;旋转蒸发仪。取,分别加50%、70%乙醇100ml(编号⑤、⑥)。干粉用适量溶剂湿润2h,装桶加入剩余乙醇静置72h。中速回收溶基金项目楚雄医药高等专科学校2013年校本项目。剂,转移至容中国煤化工至20ml,测总作者简介张明(1985-),男,云南楚雄人,助教,硕士,从事天然产物提取、分离、纯化与生物活性测定研究黄酮含量,并CNMHG物含量。收稿日期2014-10-131.2.4渗漉法操作流程。渗漉法是往药材粗粉中不断添加11858安徽农业科学2014年提取溶剂使其渗过药粉,提取液从下端出口流出的一种溶剂知,各因素影响大小依次是:料液比>提取溶剂浓度>浸泡提取法。根据之前不同方法比较,采用渗漉法具有几个优时间>流速。势,此法可造成良好的浓度差,提取效率较高,且室温提取不综合两者评价,对于渗漉法提取山楂果肉粉末的工艺而破坏成分。比较适合山楂黄酮的提取,其工艺操作流程为:言,影响较大的是料液比和提取溶剂浓度,流速和浸泡时间药材粉碎→润湿→装筒→排气→浸渍→渗漉,共6个步骤。影响不显著。并且在实际试验中发现,浸泡时间长的产品在2结果与分析澄清度和色泽上要优于短时间浸泡产品。考虑到产品的适21单因素试验结果从表1可以看出,3种不同方法之间用性,所以直接采用直观分析结果作为最佳提取条件。提取结果存在明显差异,①、②组回流提取和⑤、⑥渗漉法得表3正交试验结果到的浸出物总量和总黄酮含量(以芦丁计,以下同)明显高于试验号因素浸膏得率总黄酮含量③、④组冷浸提取法。ABCD(Y1)∥%(Y2)∥mg/ml表13种提取方法单因素提取试验结果12224.8225m溶液浸浸出物浸出物总黄酮总黄酮3编号出物含量总重提取率测定量含量gmg myg 522321.521.48①0.61484.9184627.320.61074.8856674.4867.415③0.5174.733437.503221.841.88④40.59094.727247.2722.480.65495.239252.39657.7865.78K1()72.1072.5078.7073.55⑥0.72605.808059798K2(H1)71.3068.1869.7672.64K3()64.8167.52597462.02在试验过程中观察到加热回流法处理的溶剂在冷却后R(Y)2.431.666.323.85比其他2组提取方法提取的溶液浑浊,多次过滤后,开始是k1(Y2)5.295.336.234.99澄清的,一段时间后会有少量絮状沉淀出现再次加热或振2(y2)5.335.284925.74K3(Y2)4.864.864.324.75荡超声处理都无法溶解沉淀。R(Y2)0.160.160.630.33综合以上两点结论,如果大量生产时建议采用渗漉法,能够节约成本提取物的含量和提取操作过程都相对简单,3结论且结果稳定。该研究用渗漉提取法提取山楂黄酮。工艺流程:药材粉22正交试验结果按渗漉法的工艺操作要求,以流速、碎→润湿→装筒→排气→浸渍→渗漉。工艺参数:用50%的浸泡时间、料液比溶剂浓度4个因素的3个水平,设计了乙醇作为溶剂,按照1:8g/ml的料液比投料浸泡72h后12(33)的正交试验。正交试验因素水平设计见表2,结果见以中速(3m/mn)收集提取液。特点:渗漉属于动态浸出方表3。法溶剂利用率高,有效成分浸出完全,可直接收集浸出液,表2山楂黄酮提取L(3)正交试验因素水平设计适用于贵重药材、毒性药材及高浓度制剂,也可用于有效成因素分含量较低的药材提取。渗漉过程中不用加热,避免有效成水平流速(A)浸泡时间比浓度(D)分损坏和溶剂的挥发。收集到的浸出液澄清透明,便于直接mAin(B)/h(C)∥g/ml检测如用于相关饮品的制备,具有很强的技术优势和成本优势。3(中)5(高)1:12另外,采用乙醇作为溶剂,简便易行,节约成本,所用试剂对人体较为安全,因此适于大规模生产,如生产相关酒精由正交试验结果,采用直观分析法,山楂果肉粉末渗漉饮品,则直接可以用白酒替代乙醇剩余物以糖、果胶蛋白质提取的最佳提取条件为:A2B1C1D2;即用50%的乙醇按照1:8和纤维素等,可以作为食品原料加以综合利用g/ml的料液比投料,浸泡72h,以中速收集提取液。对以上参考文献数据进行方差分析(置信度=95%),结果如下:影响渗漉提「1]刘北林,董继生,霍红山楂黄酮最佳禔取工艺探讨[J],工艺技术,2007,28(6):167-170取工艺的诸多因素中,以浸膏获得率看,F4=8.77,P,>[2】架丹,张保东黄酮类化合物提取和分离方法研究进展[周口师范0.05;FB=4.00,P8<0.05;Fc=49.39,Pc>0.05;F=256学院学报,2007,24(5):88-893]刘北林董继生霍红,油松花粉中总黄酮提取的响应面优化].现P>0.05。由此可知,各因素影响大小依次是:料液比>提代食品科技,2006,24(3):253-25%6取溶剂浓度>流速>浸泡时间。[4]苏刚.山楂黄中国煤化工:m0,21(0以黄酮含量看,FA=446,P1=0.05;F=447,P。>51苏刚山黄0.05;Fc=63.05,Pc>0.05;Fn=17.65,P。>0.05。由此可[6郭锦棠李伶CNMHGD:81-83山T心黄酮的正交实验研究[J]中国药学杂志,2005,40(2):1