枳椇子影响乙醇代谢机理研究

Science and Technalogy of Faad inau stry研究与探讨枳子影响乙醇代谢机理研究中国农业大学食品学院,北京100094)任发政罗云波蒋菁莉要为了研究枳撰子解酒保肝机理,实验建立了低刺量乙醇乙醇为北京化L厂产品;牛血清蛋白为 Signa公模型组〔自由杖用25%乙酵、3%gkg体重·d)和高剂量司产品;其他试剂均为网产分析純醇模型红(自由饮用8%乙醇、12体重·d),枳惧浸提液十低醇组、机耦子漫提液+高醇组、枳积子漫提液lCR雄性健康小鼠60只、23-25g维通利华实组(小鼠自由饮用3mg/m枳模子浸提液),实验衬续3d,验动物技术有限公司提供。测定小鼠肝脏乙脱氨酶AD)H)、翅氧化物歧化酶SO冂)、谷胱甘酞硫转移醉(GST)活性及丙752紫外分光光度计上海棱光技术有限公司〔MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量。结饔裹明,长期擾入乙醇ectrumlab22pc分光光度计上海棱光技术有限引起肝脏ADH、SOn、GST酶活性降低,导致MDA含量升高和〔SH舍量下降,帜惧子提取液可拮抗乙醇引起的公司;TDL-40离心机上海安亭科学仪器丿。12方法关體词枳犋子A) H SOD MDA GSI1.2.1动物分组1(R雄性健康小鼠60只,按体重中图分类号:T2012文献标识码:A文章编号:10020306(2002)12-0036-02大小随机分组:空白对照组10只,饮用白来水;低醇模型组10只,饮用2.5%乙醇溶液,平均每只实验动物的乙醇摄入量为39g/kg体重d:高醇模型组10枳棋子为鼠李科植物积祺 Hovenia dulcis只,饮用8%乙醇溶液,平均每只实验动物的乙醉平Thunb的带有肉质果柄的果实或种子、又名鸡距子、均摄入量为126g/kg体重d;枳枳子浸提液加低醇拐枣等,其功效主要为清热利尿、止泅除烦、解酒毒,组10只,乙醇用同低醇模型组,饮用枳祺子液;机用于热病烦渴、呃逆、呕吐、小便不利、酒精中毒等药棋子浸提液加高醇组10只,乙醇用量同高醇组,饮物。近年来,国内外学者对枳裯了药揶作用及其机用枳枳子浸提液;枳枳子组10只,饮用枳犋浸提制进行了研究。有文献报道,枳棋子对急性酒精中液毒有预防和治疗作用,对CCL和D-氨基半乳糖诱导实验周期为30d,末日禁食14h,次日小鼠称重的实验性肝掀伤及体外培养的肝细胞损伤具有保护颈椎脱口处死,马上剖取肝脏,用预冷到4℃的生理作用。为了探讨枳褀子解酒保肝机理,本实验从不同盐水冲洗2~3次,滤纸吸干。称取肝重,按19的比例实验组小鼠 ADH SOD、GST酶活性及MDA、CSH含加入pH7.4的磷酸盐缓冲液,冰浴研磨制成肝均浆等方面研究枳根子解洒保肝机理。4℃下放置4h以上,12000r/min低温离心20min,取材料与方法上清液1.1材料与仪器1.22小鼠肝均浆中ADH活性的测定参照 Blair.AHA枳子浸提液枳模子购自北京宏牛堂,25%乙的方法,测定单位时间内OD的改变,表示酶活力。测醇浸提2h,回收乙醇,过滤(每Ioml含生药25g定条件;pH8.8,肝均浆提取液O.lml,5 mmol/NAD+.lml稀释为3mg/ml的枳子液待用;氧化型辅酶I25mmn1.乙醇,温度25℃,波长340m,每30s记录(NAD+)还原型谷光甘肽(GSH)购于北京欣经科x值。单位定义:单位时间内ODw改变0.001为牛物试剂公司;1-氯-2,4--硝基苯(CDNB)为军一个活力单位U。考玛斯亮蓝法测定蛋白质含量串医学院药材供应站产品:SOD试剂盒、GH试剂1.23小鼠肝均浆中MDA含量的测定TBA比色盒、MDA试剂盒购于北京康定泰克有限公司;95%法,具体操作按试剂盒说明。1.2.4小鼠肝均浆中SOD活性的测定黄嘌呤氧化本操作按试剂盒说明收稿日期:2002-10-08中国煤化工测定采用 willian作者简介:任发政(19612-),男,博士,研究方向:食品科学CNMHG研究与探讨Vol23ANo.12,2002表1枳耦子对小鼠肝脏ADH、SQD、GST活性及GSH、MDA含量的影响ADHU蛋)60mg蛋白) MDAemon/g蛋白) GSt(me/mg蛋白) GSH(mmol/g蛋白)空白对照组53.75±14650.672±00070.44l±0001低醇模型组10.04±1.0678.52±14.170.588±0.003.398±0.U0l醇模型组10.25±03673.20±154510L.69±23.580.578±0.002枳棋了+低酵组122.10±34.36271.53±1147△0.743±0.00△40.520±0.004枳模子+高醉组·16.05±2.86·57.50±8800.39】±D003机根子组0.697±0.0030432±0002注:与空山组比较*p<005,*p<001;与低醇模型组比较“p<00l;与高醇模型组比较报道的方法。测定条件:pH5,肝均浆提取液o5l,性的下降,有效地提高SOD酶活性,阻止S(清除1Omml. CDNBO lml.3moM.CsHo.lm,波长340mm,体内自由基能力的下降,通过防止GSH耗竭,恢复记录单位时间内ODa值的改变、结果以mg/min产生GST活性,增加(T催化GSH的结合反应,以减少的μmol/1.CDNB-GH络合物表示乙醇代谢氧自由基的产生,抑制脂质过氧化反应,抑1.2.6小鼠肝均浆中GSH含量的测定根据GsH制肝脏中MDA的升高,减轻乙醇及其代谢产物对肝与二硫代二硝基苯甲酸反应时能产生一种黄色物组织的损伤,对杭肝脏脂质过氢化作用而保护肝脏质,在420mm下有最大吸收峰,可用比色法定量测定4结论CSH,具体操作按试剂盒说明。4.1枳棋f可逆转乙醇所致的乙醇脱氢酶活性的下2实验结果降,保持乙醇氧化中间产物乙醛的产生与积累间的积枳子对小鼠肝脏ADH、SD、GST活性及对平衡肝脏GSH、MDA含的能响见表1。4.2枳棋了可抑制乙醇所致的丙二醛升高,提高超1m表1可知,长期给予乙醇会导致小鼠肝脏氧化物歧化酶活性,防止肝细胞膜的脂质过氧化作SOD、GST活性的降低MDA含量升高CH含用,保护肝脏免受由某毒害。量降低,与空白对照组比较,均具有统计学差异,而43枳福子可阻止乙醇所致的还原型谷胱甘肽的耗枳枳子提取液拮抗了乙醇的上述不良作用。竭,恢复谷胱甘肽硫转移酶活性,确保GSH氧化还原3讨论寸程的顺利进行,并加速乙醛的代谢火活长期和大量摄入乙醇会造成肝细胞的损伤ADH是乙醇的氧化还原酶,在乙醇代谢中起重要作参考文献用,ADH活性的变化可影响到血中乙醇的浓度,若该1谢宗万,余友岑主编全国中草药名鉴(上塘).北京:人民出版胸活性下降或受到抑制,可使机体对乙醇的生物利社,19054川度提高,进而加重乙醇对脑、肝脏等器官的危害作2嵇扬陆红枳惧子药理研究概况中医药学报,2002,30(1):用。乙醇本身较易变成自由基,乙醇在体内的代谢中间产物乙醉和多种氧化自由基可对肝脏产生危3杨王萍乙酵生物代谢及其对肝脏的毒性作用河南医学害。在比常生理状态下,体内清除自山基的氧化还原研究,1997(1):78-79系统可维扑体内自由基的平衡,但长期大量的乙摩4李文杰SOD在治疗超氮阴离子自由基所引起的疾病及抗摄入,使白由基产生增加,导致肝脏脂质过氧化。木衷老上的应用中国药学杂志,1989,24(7):398研究中,低剂量乙醇模型组小鼠肝脏ADH、SOD酶活5王新月急性酒精性肝损伤中医药防护作用实验研究概况性降低,MDA含量升高,与空白对照组比较有极显著中国中医急症,1998,7(3:135-137性差异(P<0.01),(SH含量及GST酶活性降低,与空6张洪等枳犋子提取物对乙酵所致小鼠肝损伤的拮抗作用白对照组比较差异显著(<005):高剂量乙醇模型组广东药学学报,2001,17(3:l80~18小鼠肝脏ADH、SOn、ST活性降低,MDA含量升7嵇损、等枳襖子对乙醇所致小鼠肝脏揽伤的预纺作用中药高,同时CSH含鳅降低,与空白刈照组比较差异极显药理与临床,20016319-20著(<001),证实了乙醇对肝脏的毒性作用及对肝脏8嵇扬,等枳子酒与枳褀子水提液解酒毒作用比较研究.时解毒功能的影响。枳褀子能拮抗乙醇所致的各项指珍国医因药,2001,12(6:481~483标的改变,小鼠肝脏ADH、SOD、GT酶活性等指标9airA.H.tal. Some catalytic properties of human明显升高.MDA含量降低,GHH含量升高,与相关文liver alcohol dehydrogenase. Bio献报道一纹的,提示枳子对慢性乙醇性肝损伤有10 WiliamH Habig et aL. Assays for Differentiation of定的保护作用。积子解酒保肝作用的机理与以c;iome下几个方面有关:可逆转乙醇所致的乙醇脱氢酶活H中国煤化工2):7130~7139CNMHG