气肿疽梭菌 PCR 检测方法的建立

为建立气肿疽梭菌(Clostridium chauvoei)的快速检测方法,根据 GenBank 中气肿疽梭菌细胞毒素 CctA 基因序列(登录号：JQ692583.1)设计了1对引物,以气肿疽梭菌标准株 C54-1全基因组 DNA 为模板,建立了牛气肿疽梭菌的 PCR 检测方法,并进行了特异性、敏感性试验。结果表明,建立的气肿疽梭菌 PCR 检测方法扩增出的片段大小为501 bp,与 GenBank 上气肿疽梭菌的同源性达99.4%,且该方法与 D 型产气荚膜梭菌、E 型产气荚膜梭菌、腐败梭菌和巴氏杆菌等病原体无交叉反应,最低检测浓度为12.30 fg/μL。结果表明,建立的 PCR 检测方法具有特异、敏感、高效等优点,与其他诊断方法相比更适用于气肿疽梭菌的诊断。