PCR方法快速鉴定两种检疫性豆象

采用形态学观察与PCR技术相结合的方法,针对口岸截获的可疑菜豆象和四纹豆象幼虫和成虫进行快速鉴定.采用异硫氰酸胍方法提取昆虫基因组DNA,并根据特异性引物,采用PCR技术从截获的可疑菜豆象幼虫和成虫中均扩增得到192 bp的特异性条带,从截获的可疑四纹豆象幼虫和成虫中均扩增得到181 bp的特异性条带,经测序比对,扩增产物序列与菜豆象和四纹豆象Cry b目的基因序列完全相同.由此证实可疑样本即为菜豆象和四纹豆象的幼虫和成虫.该方法缩短了鉴定周期,6h内即可快速准确鉴定未成熟的虫态,为口岸检验检疫及快速通关提供依据.