血小板添加剂研究进展

中国实验血液学杂志Joumal of Experimenal Hematology 2008; 16(3):721 -724.●.721●文章编号( Aticle ID) :1009 -2137(2008)03 -0721 -04●综述●血小板添加剂研究进展扈文博,韩颖军事医学科学院输血医学研究所,北京100850摘要使用血小板添加剂(PAS)部分或者全部替代血浆常温保存血小板具有许多优点,例如可以避免输注大量血浆引起的发热、过敏反应以及循环超负荷;另外可以改善保存环境使血小板活性与止血功能维持在较高水平,节省大量血浆用于其他目的,便于血小板制品病原体灭活等。近20余年来,对于血小板添加剂的研究一直是一个热点,不同配方的血小板添加剂不断有报道,对血小板的保护效果也越来越好。本文就对血小板添加剂的组成成分、各成分的作用、体内外保存效果等研究进展进行了综述。关键词血小板;血小板添加剂;血小板常温保存中图分类号R331. 143文献标识码Advances of Studies on Platelet Additive Solutions-- -ReviewHU Wen-Bo, HAN YingBejing Instinute of Transfusion Medicine , Bejing 100850, ChinaAbstract Platelet aditive solutions( PAS)can partly or fully substute blood plasma during platelet storage in nor-mal air temperature. There are some advantages such as avoiding transfusion of large volume of plasma with posible ad-verse reactions and circulatory overload, saving plasma for other purposes , improving storage conditions, maintaining theviabity and haemostaic function of platelet al normal level, and making it easy to inactivate pathogens. There has beenan increasing interest in the study of PAS in the past 20 years, the compositions of dfferent PAS have been reported oneafter another, and the protecive efectst of PAS on platelets have become better and btter. This article focuses on the ad-vances of studies of the composition of PAS , the functions of the diferent compositions and platelet quality in vitro andin vivo after storage.Key words plaletet; platelet additive solution; platelet normal temperature storageJ Exp Hemaol 2008; 16(3):721 -724随着输血技术的不断发展,浓缩血小板( platelet血小板添加剂的研究历史concentrate, PC)在输血治疗中发挥了越来越重要的作用。如何有效的保存血小板是人们重点关注的自1980年,Rock等开始PAS的研究工作,并于1985问题。目前临床常用的血小板保存方法为20-年提出使用PAS保存血小板的理论;1987年Holme24C常温振荡保存"。利用此方法,机采血小板可等首先使用含有枸橼酸盐、碳酸盐和葡萄糖的PAS以保存5-7天,而手工分离血小板的保存时间更作为添加剂,22C保存血小板7天,并与血浆保存组短。保存时间过短造成血小板的大量浪费并加重其进行了保存效果的比较,其血小板ATP含量和低渗供应的不足。同时,血浆悬浮保存血小板输注人体休克反应( HSR)均无明显差别; Eriksson等在1990后还存在发生非溶血性发热反应,过敏反应,循环超年在PAS中加入了Na、K等离子,229C保存血小板负荷等副作用的风险。Rock 等人于1985年提出使7天,测得血小板的平均回收率为65% ;同年，Eriks-用血小板添加剂( platelet additive solution, PAS)部son与Hogman在PAS中加人了乙酸盐;1993年,分或者全部替代血浆保存血小板的理论,以延长血uliksson等研制出血小板添加剂I (PASI),PAS小板的保存时间,维持血小板的活性,减少输注血浆I保存的血小板与血浆保存的血小板相比,在代谢、引起的副作用并使光化学方法对血小板进行病原体形态及功能方面的父种比坛规著降低,但是PAS灭活成为可能。20多年来, PAS经过不断的改良, .I保中国煤化工于规定的最低标其保存血小板的效果越来越好,各种新型的PAS不MYHCNMHG断被报道,现就这方面的研究做一-综述。通讯作者:韩颖,主任研究员、电话:(010)669322000 E-mail:; hany-ing1001 @ yaboo. com2008-01 -09收稿;2008 -02 -01接受●722●中国实验血液学杂志J Exp Hematol 2008; 16(3)准[2-4)。随后,研究者们对PAS I保存血小板的功主要 有两个作用:①乙酸盐同样可以通过三羧酸循能进行了大量的研究,并在此基础上对PAS进行改环进行代谢 ,分解为水和二氧化碳而不会有乳酸的良,不断有新的、保存效果更好的PAS被报道。下产生,因此PAS中的乙酸盐可以减少血小板保存过表为国际上具有代表性的血小板添加液的组方。程中产生的乳酸。有研究表明乙酸盐可以引起PAS中的氧消耗增多,从而使得血小板活性下降,所以乙Table . Compostion of platelet additive solutions in com-酸盐不能完全替代葡萄糖门!;②稳定pH,乙酸盐可mon use以转化为碳酸盐,从而对抗保存过程中的pH下PAS-IIPAS-IM/降'8]。(T-Sol)PAS-II CompoeolNacC( mmol/L)115.577.3)069.3枸橼酸盐KCI( mmoVL)NAs5枸橼酸盐除有抗凝功能之外,其作用主要体现在与MgCI2( mmolVL)NA NA 1.51.5其他成分协同作用上。比如,有研究表明枸橼酸盐Na-citrate( mmol/L)10.8 10.9与镁离子同时存在可以减少钾离子的外流;而枸櫞NaH,PO/Na, HPO酸盐和乙酸盐一起可以减少血小板新陈代谢过程中VA 28.226( mmo/L)乳酸的生成[’。Na-aectate( mmol/L)3032.5?7pHNagluconat( mmol/L)IAN13pH的稳定对于血小板是非常重要的,当pH降到6.0以下时，血小板的活性就逐步丧失,包括腺嘌呤目前在英国被批准的PAS有:PASII(Guliks-核苷酸浓度的下降,乳酸生成的下降和血小板的分son,1993) .PAS M ( Lin L, 1997)、Composol( van-der解等。现阶段的PAS的缓冲能力相对血浆是比较Meer ,2001 )、PAS皿M ( ulliksson ,2002)。 从研究弱的,血浆pH达到6.0时其中被缓冲的乳酸浓度范围来看,西欧与北欧研究者对于PAS的研究比较大约是30 mmo/L,而PAS的pH达到6.0时其中被多,而美国研究者的报道较少(Joseph,2006)。使用缓冲的乳酸浓度只有10- 15 mmol/L。pH下降的PAS替代血浆保存浓缩血小板有以下的优点:①改原因主要是由于血小板代谢过程中的乳酸蓄积,乳善血小板保存条件,保持血小板活力和止血功能接酸来自于葡萄糖的无氧酵解,而当血浆或者PAS中近正常水平;②减少大量血浆输注带来的不良反应的葡萄糖耗尽,乳酸的浓度也就不会进一步的增加。和循环的超负荷;③减少血小板输注时的血浆量;④但最近也有学者报道,pH的下降只是血小板保存损便于光化学方法灭活PC中的病毒和其他病原体。伤的一个结果,而不是血小板保存损伤的原因,过高或过低的pH都会诱导糖酵解(°]。这样的结果与.影响血小板添加剂效果的因素以前研究得出的结论相矛盾,仍需要研究者们进一步的研究。葡萄糖葡萄糖是血小板新陈代谢的作用底物,为血小板活磷酸盐性的维持提供必要的能量。葡萄糖通过两种途径进磷酸盐-方面作为PAS的缓冲体系,缓冲由于血小行代谢,一种是三羧酸循环途径代谢为水和二氧化，板代谢产生乳酸所引起的pH下降,另一方面还可碳,另外一种是糖酵解的方式分解为乳酸。乳酸蓄以刺激血小板的新陈代谢,维持血小板的活性。积过多会导致添加剂中pH值下降,从而影响血小PASMI是在PASI基础上加入了一定比例的磷酸板的活力。另外,研究也表明,在血小板保存过程盐,其保存血小板的效果比PAS I要好，因此磷酸盐，中,85%的葡萄糖通过三羧酸循环分解'!,在保存更适合用于不含磷酸盐的ACD抗凝血小板的保存过程中如果葡萄糖耗尽,同样会影响血小板的活中[。力6]。因此,在血小板保存过程中提供足够的葡萄中国煤化工糖维持血小板的新陈代谢是很有必要的。钾离最新:MYHLCNMHG加入了钾离子和乙酸盐镁离子,与PAS I以及PASI相比,使用PASHM保现今流行的PAS中大多都含有乙酸盐,它在PAS中存的血小板可以降低葡萄糖的消耗,减少乳酸的生血小板添加剂研究进展●723●成,更好的维持pH、低渗休克反应(HSR)及血小板体内实验(n=21),把PAS II保存的浓缩血小板与的活性2]。但是, PASH M保存的血小板在聚集和血浆保存的浓缩血小板输人症状较轻的血小板减少粘附功能.上有所降低。有研究表明,加人80% PAS症患者体内,1小时与24小时血浆保存组校正血小MM与加入70%PASm保存血小板的效果相同,推板计数增值(CCI)要高于PASI保存组(p<0.05),测钾离子和镁离子是通过影响血小板膜的功能而产但PASI保存组输血反应的发生率要低于血浆保存生的作用，比如镁离子可以降低血小板膜的钾离子组(p<0.05)。2006年Kerkhoffs 等160进行了类似外流,但是这方面的报道较少,需要更深--步的研实验的报道,得出的结论也基本相同。究。EuroSPRITE与SPRINT两组实验,对使用光化学方法灭活病原体(人工合成的补骨脂素(S-59)联血浆合紫外线照射)的PAS II保存的血小板与血浆保一般情况下PAS可以替代80%的血浆保存血小板，存的血小板输人血小板减少症患者体内进行比较，但是血浆在血小板的保存过程中依然是必需的，血并分别在2003年与2004年做了报道。在Eu-浆可以降低血小板进行糖酵解的比率以及提供额外roSPRITE实验中, PAS II保存的血小板1小时的的代谢底物。有文献报道,使用100%的ComposolCCI与血浆组比较没有显著差异(CCI五浆=14.9,和PAS皿M保存浓缩血小板48小时后,血小板活性CCIpAs=13. 1。p=0.11);而在SPRINT实验结果几乎完全丧失1)。但是使用100% PAS替代血浆保中,血浆保存组1小时与24小时的CCI要高于PAS存的血小板对于治疗--些血小板输注无效、输血相II保存组(p <0.001)。两组实验中,PAS I保存血关的急性肺损伤免疫球蛋白A缺陷和过敏患者还小板输注患者体内输血反应发生率都要低于血浆保是非常有意义的。存组(p <0.05)17.18。由于两组实验存在矛盾之处,研究者又在进行新的三期实验，以得到更为确切血小板保存袋现阶段的PAS配方还远称不上完善,由于其缓冲效的结果[9]。果相对血浆来说比较差,因此需要配合透气性比较血小板添加剂研究中需要解决的问题好、表面积比较大的血小板保存袋使用,加快氧气和二氧化碳的交换,才能够更好地维持保存液的pH,-种有效的血小板添加剂需要具备以下的条件:①这也增加了血小板保存的成本。目前血小板保存袋的材料主要为加人不同增塑剂的聚乙烯与聚烃烯两在保存的全过程都具有充足的血小板新陈代谢底种,以聚乙烯为主要材料的血小板保存袋比聚烃烯物;②具有良好的缓冲体系,以缓解血小板保存过程保存袋有着更好的透气性,但是普通的聚乙烯血小中pH的降低;③有促进有氧氧化和/或抑制无氧酵板保存袋中含有的增塑剂磷二苯二酸二脂( DEHP)解的能力,降低血小板保存过程中乳酸的生成,减少具有较强的肝脏毒性,限制了其应用,目前研究者已葡萄糖的消耗;④抗凝以及抑制血小板在保存过程经找到数种毒性更低的增塑剂( di-undecyl-thereph-中活化的作用;⑤保持血小板的形态和活性的完整。thalate等)以取代DPHP。Cardigan 等[14]在2007年目前的各种血小板添加剂仍然有-些需要解决的问对两种同血小板添加剂( PAS-1I、Composol)在3 种题。第一,使用血小板添加剂保存的血小板在部分不同血小板保存袋( Fresenius, Baxter , Pall 公司产体内外观测指标上要优于血浆保存的血小板,但是品)中保存血小板效果进行了评价,发现不同的血仍有--些方面不如后者,比如使用PAS-II.Composol小板保存袋保存的血小板在pH,HSR,葡萄糖消耗,保存的血小板在体外对二磷酸腺苷(ADP)引起的乳酸堆积等方面都有一定程度的差别。de Wildt-促聚反应活性比血浆保存的血小板有所降低('°]。Eggen等(2]、van der Meer等[在这之前也进行过类第二,虽然PAS可以替代80%的血浆,保存的似的报道。血小板依然可以保持较好的活性,但是现阶段使用PAS中国煤化工然是- -件很困难的用血小板添加剂保存血小板的临床实事情:OHCNMHG:风险依然存在,无验法完第三,PAS保存的血小板临床应用效果存在分2000年,de Wildt-Eggen 等['5)报道了一个小规模的歧 ,有待进-步验证。●724●中国实验血液学杂志J Ep Hematol 2008; 16(3)第四,目前还缺少血小板功能评价的的金标准。8 Shimizu T, Murpby s. Roles of actate and phophate in the succee临床上常用的校正血小板计数增值(CCI)、血小板ful storage of platelet concentrates prepared with an acetale- containing24小时存活率、出凝血时间测定等都只能在某些方additive solution. Transfusion, 1993 ;33 :304 -310面反映血小板回输体内后的活性,但是由于血小板9 WeisFogh us. The efet of citate, calcium, and megesium ioon the potassium movement acroes the human platelet membrane.激活与抑制的机理尚未完全研究清楚,血小板回输Transfusion, 1985 ;25 :339 -342后正常人与患者之间及不同患者之间体内各项检测10 Dekkers DW, De Cuype IM, van-der Meer PF, et al. Influence of结果也存在明显的差异,建立一套评价血小板功能pH on sored human platelets, Tansfusio, 2007; 47:1889 - 1895的金标准依然很困难。11 Gullikson H, Larson s, Shanwell A. e al. A sytem for the supply第五,加入PAS时间也是个需要注意的问题,of platelets suspended in a slorage medium including bufy-coat- de-有研究显示,分别在制备好血小板2小时和8小时rived platelet concentrales in combination with " split" apheresisplatelets. Transfus Sei, 1997; 18:33 -40的时间点上加人PAS,8小时加人组与2小时加入12 Diedrich B, Sandgren P, Janson B. et al, In viro and in rivo efects组相比,乳酸的产生量显著增高,pH下降显著降低,of potaseium and magnesium on storage up to 7 days of apheresis提醒在制备血小板的过程中要尽早加入PAS以维platelet concentrates in platelet additive solution. Vox Sang, 2008;94:96 - 102持血小板的活性[21]1。总之,PAS常温保存血小板可以延长血小板的|3 RingwaldJ, Athof F, Zinmermann R, e al. Washing plateletewith new additive solutions; aspects on the in viro quality after 48保存时间,同时又可以避免低温保存血小板带来的hours of storage. Transfusion, 2006;46 :236 - 243血小板的损伤和激活等问题,这是一种很有前景的14 Cardigan R, Sutherland J, Ganwood M, e al. In riro funcion'of血小板保存方法。buffy coat-derived platelet concentrates stored for 9 days in Com-paSol, PASII or 100% plasma in three diferent storage bag. VaxSang, 2008; 94:103 -112参考文献15 deWildr-Eggen J, Nauta s, Schnjver JC, e al. Reactions andplatelet increments after transfusion of platelet concentrates in plasma郭永,韩颖. 回输的血小板在体内清除机制研究进展.中国实验or an additive solution; a prospective, randomized study. Trensfu-oion, 2000;40:398 - 403血液学杂志;2006;5;1049 - 105216 Kerkhoffs JL, Eikenboom JC, Schipperus MS, a al. A mulbicenter2 de-Wildu-Eggen J, ulikson H. In vivo and in tiro comparison ofrandomised study of the efficacy of transfusions with platelets storedplatelets stored in either synthetic media or plasma. Vox Sang,in PAS I versus plasma. Blood, 2006;108 :3210 - 32152003; 84:256 - 2643 van-der-Meer PF, Pictersz RN, Reeink HW. Storage of plateletes in17 van-Rhenen D, Gullikson H, Cazenave JP, et al. Transfusion ofadditive solution for up to 12 days with maintenance of good in titropooled bufy coat platelet components prepared with photochemicalpathogen inactivation treatment: the EurnSPRITE trial. Blood,qualiy.Tanefueion, 2004; 44:1204 -12112003 ;101 :2426 -24334 Bunecu A, Hild M, LundahlJ , e al. 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