葛花对酒后血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶活性的影响

葛花对酒后血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶活性的影响李萍1钟赣生21.艾美仕市场调研咨询(上海)有限公司北京分公司,北京100202.北京中医药大学基础医学院,北京100029擴为了探讨葛花对急性酒精中毒的防治作用,将雄性小鼠随机分为空自组、模型组、葛花提取物组。给药30min后,模型组与葛花组灌酒0.10mL/10g,在灌酒后05,1,15,2,25,3h分别摘眼球取血和取肝组织。采用生化酶法测定小鼠酒后不同时间内血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶(ADH)活性。结果显示,小鼠血中乙醇浓度在酒后05-2h达到高峰,与模型组相比,葛花提取物组0.5-3h内的血中乙醇浓度数值降低。葛花提取物组对小鼠酒后05-1h肝中ADH的影响较为明显,使其活性增加;酒后153h肝中ADH活性虽然也增强,但与模型组比较无显著差异。结果显示,葛花提取物可降低酒后血中乙醇浓度,增强肝中ADH活性,其机制可能是通过抑制消化道对乙醇的吸收,从而起到有效的降醇解酒作用。关鬢司藟花;酒精中毒;解酒;乙醵浓度;乙醇脱氲酶活性中图分类号R285.5文章端号10007857(2009)23-082Effects of Pueraria lobata(willd.The alcohol concentration in blood took the highest value in 0.5-1.5hours. Compared to the model group, the alcohol concentration inOhwi on Alcohol Content in Bloodblood for the group of aqueous extract of Pueraria lobata ( Willd.and Activity of AlcoholOhwi is decreased in 0.5-3 hours; the activity of Adh in the liver isDehydrogenase(ADh) of Animalsincreased in 2-3 hours (P>0.05), while it is significantly increasedin the first 0.5-1 hours (P<0.05). The aqueous extract of PuerariaAfter Drinking Alcohollobata willd. )Ohwi could reduce the alcohol concentration in bloodLI Ping, ZHONG Gansheng?of animals after being fed with alcohol and increase the activity ofADH. It relieves alcoh1. IMS Marketing Research Consulting(shanghai )Co. Lid.promoting the metabolism of alcohol in the liverBeying Branch, Beijing 100020, ChinaKeywords pueraria lobata (Willd. )Ohwion;2. College of Preclinical Medicine, Beiing University ofalcohol; alcohol concentration; activity of alcohol dehydrogenaseChinese Medicine, Beiing 100029, ChinaAbstract To observe the effect of Pueraria lobata(willd. )Ohwi on0引言relief of alcohol toxicity by animal experiments, female NIH mice中药葛花是一味传统的以解酒为主要功效的解酒专药。were ovariectomized and randomly divided into 55 groups. The其味甘性凉自《名医别录》记载其具“消酒功效以后历代本animal models of acute alcoholism were duplicated by force-feeding草方书多以此为解酒之专药而极少用于其他疾病的治疗。金them with liquor" er guo tou',. The influence of aqueous extract of元医家李杲在其名著《脾胃论》中载“葛花解醒汤”,因疗效卓Pueraria lobata ( Willd) Ohwion on the alcohol concentration in越,至今仍作为解酒的代表方,为临床治疗醉酒、酒病所常用blood within05-3 hours was studied by methods of biochemistry而《滇南本草》将葛花专列一条,谓其“解酒醒脾,酒毒酒痢,饮V凵中国煤化工收稿日期:200909-25CNMHG作者简介:李萍,研究方向为葛花解酒的实验学研究电于信箱:liping1031@wohu.com;钟赣生(通信作者),教授,研究方向为醉酒昊对急性酒精中毒的药效学研究,电子信箱:zhonggansheng@sohu.com82科技导报200927(23)食不思,胸膈饱胀发呃,呕吐酸痰,酒毒伤胃,吐血呕血。消热,解酒毒。"从古至今,以葛花为主药的解酒方多不胜数葛衰1乙醇标准曲线Table 1 Alcohol concentration standard curve花不仅可以治疗饮酒过量的醉酒急症,对于酒毒蓄积体内,损伤血脉引起的吐血、呕血等酒病重证亦可治疗。乙醇浓度/(mg·dL)吸光度有文献报道葛花对小鼠急性酒精中毒有治疗作用,它能降低体内乙醇浓度,降低乙醇毒性,并使乙醇过量造成的小鼠死亡率降至10%,还可大幅降低乙醉中毒小鼠血清ALT、AST0.172的活性改变小鼠因醉酒而引起的定向力降低,对急性酒精中0.266毒所致小鼠肝损伤有预防作用,并能显著提高小鼠肝脏乙醇03540.512脱氢酶的活性。而本研究采用动态连续观察的方法,进一步研究葛花对乙醇在体内吸收和分解过程的影响,探讨葛花解酒的药效及作用机制,便于对葛花的进一步开发利用,以及为中医药治疗急性酒精中毒提供可信依据。1材料与方法1.1动物NIH雄性小鼠体重18-22g,由卫生部生物制品研究所动物室提供。12药材制备01020.3040506葛花,购自北京布东四同仁堂参茸药店,产地为河南省,吸光度经北京中医药大学基础医学院中药教研室鉴定,为豆科植物野葛( Pueraria Lobata(Wld)ohwi)的花。图1乙醇标准曲线药材葛花以10倍量60%乙醇浸泡12h,回流提取2次,Fig. 1 Alcohol concentration standard curve第一次为2h第二次为1h。回流完毕,过滤,收醇浓缩真子生理盐水模型组给予等量生理盐水葛花高、中、低剂量组空干燥,研细过4目第置于阴凉干燥处保存。使用时葛按01m0g分别给予不同浓度葛花提取物,30m后花提取物加蒸馏水配制成所需浓度的溶液使用。其中,高、模型组与葛花组分别灌酒010ml·10g。6大组小鼠分别在中低剂量制剂含生药分别为0804和02gmn,相当于成灌酒后o5,1,15,2,25和3h摘眼球取血(肝素钠抗凝)。在人用量的20,10和5倍。取血同时另取左肝叶边缘肝脏组织备用,大小为2mmx13实验方法2mmX2mm(空白对照组小鼠只摘取肝脏组织备用)。从每管131对急性酒精中毒小鼠血中乙醇浓度的影响抗凝血中取出025mL,加生理盐水075mL,以后各步骤同13.1.1制作乙醇标准曲线制作标准曲线的步骤2)~3)。根据吸光度值,用标准曲线求出1)小鼠摘眼球取血放入用肝素钠抗凝的试管内。从每各样品的乙醇含量(mg)管中取出025mL配成乙醇含量分别为250,5005,10013对急性酒精中毒小鼠肝中乙醇脱氢酶活性的影响和1500mg/L的溶液。用生理盐水冲洗上述实验取出的肝脏,滤纸吸净后称重,2)上述每管各加34%高氯酸4mL,混匀,于300ovmn在冰浴中用玻璃匀浆器制备匀浆,300dmin低温离心5离心5min,上清液作为标准液。min,上清液备检测。在1cm比色杯内加00021mo/LNAD3)取6个试管,分别加人乙醇脱氢酶(ADH)氧化型烟28mL,空白管加蒸馏水02ml,样品管加03mL乙醇和酰胺腺嘌吟二核苷酸(NAD)液4m;继续往其中一个加蒸上清液各01mL,混匀后于340m测上述各管吸光度观测馏水01m,作为对照其余5个各加01mL.标准液室温放其5m内变化率△Amim置60min。用752-C紫外-可见分光光度计(上海第三分析仪ADH活性计算网器厂)于340mm测上述各管吸光度,绘制标准曲线(见表1ADH活性(Ug")肝组织=和图1)。肝重(g)x10y回归方程为C=11792A-10.644;-09978a·l01肝匀浆体积(mL)1.3.12样品测试式中中国煤化工02×10,l为比色杯小鼠300只,随机分为6组(按时间段动态观察组),每组厚度Q50只再均分为空白组模型组葛花高、中低剂量组。实验13aLACNMHG前12h禁食不禁水。实验时,空白对照组按0.20mL·10g给数据用x表示应用SPs110统计软件进行方差分析。科技导报200927(23)832结果21对急性酒精中毒小鼠血中乙醇浓度的影响暑028mL葛花组与模型组相比,酒后05h,低剂量组无显著性差异(P0.05);中、高剂量组降低,有显著性差异(P005,P001)酒后1h,低剂量组无显著性差异(P005);中高剂量组均降低,有显著性差异(P<005,P<001)。酒后1.5h,低、中、高剂量组均降低,有显著性差异(P<0.05,P