纳豆及其提取物生物活性物质测定

J. SHANXI AGRIC UNIV (Natural Science Edition)茸大学(自然科学版)2082(002376纳豆及其提取物生物活性物质测定段智变1,董改香2,温晓庆2,江汉湖3(1.山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801,2.山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;3南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095)要:用紫外分光光度法、高效液相色谱法等方法分析纳丘及其提取物中皂武、异黄酮及蛋白质含量。结果表明:与熟大豆相比,纳豆中大豆甙元、染料木素、皂甙及蛋白质等生物活性物质含量增高。威熟纳丘异黄酮总量、大豆甙元及染料木素含量分别是熟大丘含量的1.08倍、23.59倍和19.43倍,其中,成熟纳豆总异黄酮中异黄酮武元的比例达81.55%。纳豆生物活性咸分是其保健功能的物质基础。关键词:纳丘;提取物;生物活性物质中图分类号:R151.2文献标识码:A文章编号:1671-8151(2008)020180-03Detection of the bioactive Substances in Natto and Its extractDUAN Zhi-bian et al(College of Life Science, Shanri Agricultural University, Taigu Shanri 030801, China)Abstract: The saponin, daidzein and genistein in natto was detected by ultraviolet spectroscopy and high performanceliquid chromatography, respectively. The results indicated that the contents of daidzein, genistein, saponin, protein in-creased after fermented by Bacillus subtilis natto. The contents of isoflavones, daidzein and genistein in ripe natto were1.08, 23. 59 and 19. 43 times than that in soybean respectively, and the aglycon content of genistein and daidzein is81.55% of natto isoflavones. The bioactive substances in natto were functional elementsKey Words: Natto: Extract, Bioactive substance成熟纳豆中富含大豆皂甙、大豆甙元糖甙大豆→清洗、浸泡→高压蒸煮→摊凉→接种(简称大豆甙)、大豆甙元、染料木素糖甙(简称→发酵→后熟→纳豆,严格控制生产工艺条件,染料木甙)、染料木素甙元(简称染料木素)等异保证产品质量稳定。黄酮12及100多种酶等生物活性物质,它们是纳1.1.4大豆异黄酮参考标样豆保健功能的物质基础。不同的纳豆产品,其中大豆甙元、染料木素由南京财经大学工学院生物活性物质的种类与含量会有很大差别4,食品科学与工程系粮油食品质量检测中心实验室检测纳豆中相关生物活性物质可为纳豆的生物学分离制备功能研究提供理论依据12方法1.2.1纳豆及大豆水提取物制备:1材料与方法纳豆/大豆廉水提取物:取纳豆/大豆200g,1.1材料粉碎,加灭菌生理盐水200mL,搅拌,4℃静置1.1.1纳豆菌种过夜,2000r·min1离心20min,收集上清液。本实验室分离、筛选高产菌株B.N.10纳豆/大豆粒水提取物:取纳豆/大豆2001.1.2熟大豆不粉碎,处理同上。大豆→清洗、浸泡→高压蒸煮1.2.中国煤化工1.1.3纳豆CNMHG甙元、染料木素收稿日期:200709-03修回日期:2007-0927作者简介:段智变(1969-),女(汉),山西祁县人,副教授,博士,主要从事益生菌保健及其生物学机理等方面的研究基金项目:山西省青年科学基金(20041036)段智变等:纳豆及其提取物生物活性物质测定181与皂甙含量测定见文献。豆糜水提取异黄酮总量是纳豆粒水提取物含量的1.33倍。2结果与分析2.3纳豆、大豆及其提取物中大豆甙元含量2.1纳豆、大豆及其水提取物蛋白质含量纳豆、大豆及其提取物中大豆甙元含量测定纳豆、大豆及其水提取物的蛋白质含量测定结果见图3。成熟纳豆粒大豆甙元含量分别是熟结果见图1。纳豆中蛋白质含量为19.85%(湿大豆粒含量的2359倍;纳豆糜水提取物大豆甙重),大豆中蛋白质含量为18.05%(湿重),两元含量分别是大豆糜水提取物含量的10.07倍;者差别不大,而纳豆糜水提取物蛋白质含量是大纳豆粒水提取物大豆甙元含量分别是大豆粒水提豆糜水提取物含量的16.52倍,纳豆粒水提取物取物含量的34.30倍;纳豆糜水提取物大豆甙元蛋白质含量是大豆粒水提取物含量的24.50倍,含量分别是纳豆粒水提取物含量的1.33倍纳豆糜水提取物蛋白质含量是纳豆粒水提取物含量的1.49倍,大豆糜水提取物蛋白质含量是大豆粒水提取物含量的2.21倍。諷本水奏号本卖本雌短翻图3纳豆、大豆及其提取物中总异黄酮含量Fig 3 Isoflavones content of Natto, Soybeanand their extracts图1纳豆、大豆及其提取物中蛋白质含量2.4纳豆、大豆及其提取物中染料木素含量Fig 1 Protein content of Natto, Soybean and纳豆、大豆及其提取物中染料木素含量测定their extracts结果见图4。成熟纳豆粒染料木素含量分别是熟大豆粒含量的1943倍;纳豆糜水提取物染料木2.2纳豆、大豆及其提取物中总异黄酮含量素含量分别是大豆糜水提取物含量的10.13倍纳豆、大豆及其提取物中总异黄酮含量测定·纳豆粒水提取物染料木素含量分别是大豆粒水提结果见图2。成熟纳豆粒异黄酮总量是熟大豆粒取物含量的31.71倍;纳豆糜水提取物染料木素含量分别是纳豆粒水提取物含量的1.33倍物水地阻水大水大物田2纳豆、大豆及其提取物中总异黄酮含量魔水纳以粒水大豆水大粒水Fig 2 Isoflavones content of Natto, Soybeaand their extracts中国煤化工染料木素含量Soybean and含量的1.08倍;纳豆糜水提取物异黄酮总量是大CNMHG豆糜水提取物含量的1.15倍;纳豆粒水提取物异黄酮总量是大豆粒水提取物含量的14.09倍;纳以上对异黄酮的测定结果表明,浸泡后的熟山西农业大学学报(自然科学版)2008大豆粒中大豆甙元、染料木素的含量分别为3讨论22.15μg·g-、34.72g·g-2,总异黄酮含量为1361.08g·g1;成熟纳豆粒中大豆甙元纳豆是日本传统发酵豆制品,现已发现它具染料木素的含量分别为5243g·g-1、674.51有溶血栓、降血压、心血管保护等功能。纳pg·g1,总异黄酮含量为14617.65g·g-1。从豆中富含酪蛋白酶和胰酶等蛋白酶、y淀粉酶、以上数据可知:发酵前熟大豆总异黄酮中异黄酮纤维素酶、脂酶、植酸酶等100多种酶,一些蛋甙元的比例为4.18%,而发酵后成熟的纳豆总异白酶可将纳豆中的蛋白质分解,使营养更易被吸黄酮中异黄酮甙元的比例达81.55%与未发酵收3,。纳豆激酶是纳豆菌在发酵大豆的过程中的大豆基质相比,发酵后的纳豆中大豆甙元、染分泌到细胞外的单链多肽丝氨酸蛋白酶,是溶血料木素的含量分别是发酵前的23.59倍、19.43栓功能的主要活性因子,纳豆周围的粘性物质倍,总异黄酮含量增长了106.57μg·g-1。中还含有强活性的血管紧张素Ⅰ转化酶抑制肽2.5纳豆异黄酮甙元HPLC色谱图本检测结果表明,将纳豆粉碎后提取,更有纳豆酸水解后异黄酮甙元HPLC色谱图见图利于可溶性蛋白质的浸出。湿重纳豆与大豆中蛋5。纳豆酸水解产物中含有保留时间为4.771、白质含量分别为1985%、18.05%,两者差别5.271、7.308min的组分,经与标准图谱对比不大,但其水提取液中的含量差别却很大,纳豆组分分别为大豆甙元、黄豆素、染料木素,所占糜水提取物蛋白质含量是大豆糜水提取物含量的面积比例分别为23.36%、8.60%、65,23%16.52倍,纳豆粒水提取物蛋白质含量是大豆粒染料木素含量高。水提取物含量的24.5倍,表明纳豆经过发酵后蛋白质易于透出,另一方面,通过机械磨碎也促进了蛋白的释放,从而使粘性物质中的可溶性蛋白质、肽等含量明显升高,这与其多种保健功能直接相关研究表明,纳豆中含有异黄酮及皂甙,它们是纳豆抗氧化、降血脂、抗肿瘤等功能的物质基础·2。纳豆异黄酮以糖苷或游离的形式存在。研究表明,少孢根霉等一些微生物在发酵大豆过纳豆酸水解后异黄酮甙元HPLC色谱图程中,产生的P葡萄糖苷酶可将大豆甙和染料木HPLC chromatogram of Natto Aglycon甙上的β糖基切除,使大豆甙元和染料木素的含2.6纳豆、大豆及其提取物中皂甙测定量提高0,纳豆菌也有此功能11。纳豆游离异纳豆、大豆及其提取物中皂甙的吸光度值见黄酮对活性氧自由基具有解毒作用,对人体预防表1。纳豆中皂甙含量均比大豆中含量高,纳豆心血管病、抗癌、防止衰老有明显疗效)。其提取物中皂甙含量均比大豆提取物中含量高。纳豆中的皂甙是其生物活性成分之一。研究褒1纳豆、大豆及其提取物中皂甙的吸光度值表明,皂甙具有显著的清除自由基、抗氧化和降ble 1 Absorbance of Saponin (205nm)in Natto, Soy-血脂等作用,还可抑制人类肿瘤细胞HCT15的bean and their extracts生长,对鼠白血病细胞YAC1的DNA合成有明样品稀释倍数(或浓度)吸光度值显直接抑制作用,经简单扩散或主动转运等方式( or concentration) of sampl205m)进入肿瘤细胞直接破坏了肿瘤细胞膜的结构,还纳豆麋水提物可强烈地抑制血小板聚集,使抗凝作用加强,抑纳豆粒水提物2.7778制纤维蛋白原向纤维蛋白的转化,激活纤溶系统,大豆糜水提物2.7655从而大豆粒水提物5倍2.653中国煤化工,纳豆8g·L-12.8556物中皂甙含量2.6273均比大CNMHG,在整个发酵(下转第215页)杨麦生等:超声波提取羽衣甘蓝叶黄素的工艺研究究得出,超声波提取羽衣甘蓝叶黄素的最佳组合将该方法验证用于工业化生产,充分利用羽为A2BC2,即将真空冷冻干燥、60目粉碎的羽衣甘蓝资源,降低生产成本,提高叶黄素产品产衣甘蓝叶粉,在30℃、400W超声波的条件下,量具有重要意义。由此可见,超声波强化提取技利用四氢呋喃(10:1)、15%氢氧化钾乙醇溶液术可作为羽衣甘蓝提取的优选技术,具有广阔的浸提皂化20min的处理,可以得到最高提取量。利用价值和应用前景。[1]李式军,刘风生,珍稀名优蔬菜80种[M.北京:中国农业出版社,1995:5457[2] Gsziano J M, Manson JE, Ridker P M, et al. p-Carotene and heartdisease []. 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