己酸二乙氨基乙醇酯亚慢性经口毒性

第44卷第11期农药v.44№11205年11月Ci resen arrel d pesti ciNbM,2005毒性与残留己酸二乙氨基乙醇酯亚慢性经口毒性郑先福1,孙炳剑2,郑昊3河南农业大学基础科学学院,郑州450002;2河南农业大学植物保护学院,郑州450002;郑州郑氏化工产品有限公司,郑州450002)摘要按照妞B15670-1995的要求进行了己酸二乙氨基乙醇酯(DA6)90d的亚慢性经口毒性试验。结果显示,与对照组相比,雌、雄性大鼠高剂量组的体重增长明显减慢(p<0.05);雄性大鼠高剂量组AST、ALB两项指标升高(p<0.05),肝、肺脏器系数增长(p<0.05)。高、中剂量组雌、雄性大鼠发生心肌小灶炎症和肾脏小灶灸症的动物数明显增多。根据试验结果,受检样品己酸二乙氨基乙醇酯对大鼠的无作用剂量为:雄性40.2m/ kg bw d,雌性49.1rg/ kg bw d。关键词己酸二乙氨基乙醇酯,经口亚慢性毒性中图分类号:TQ450.2文献标识码:A文章编号:1006-0413(2005)11-516-03Subchronic Oral Toxicity of Hexanoic Acid 2-(diethylamino)ethyl Ester in RatsZHENG Xian-Fu, SUN Bing-Jian ZHENG HaoCollege of Basic Since, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China; College of Plant Protection, Henan AgriculturalUniversity, Zhengzhou 450002, China; Zhengzhou Zhengshi Chemical Production Co, Ltd, Zhengzhou 450002, China)Abstract: 90 days subchori c oral toxi ci ty of hexanoi c aci d2(d et hyl annno)et hyl est er was conduct ed i nrats basethe nati onal st andard GB15670-1995. The body wei ght of rats i n hi gh dose group were si gni fi cant ly less than those ofthe groups(p<0. 05). SerumAST, ALB were si gni fi cant l y i ncreased the coef fi ci ent of l i ver and l ung were i ncreased inal es exposed to the hi gh dose group(p0. 05). Local i nf I amat i on of cardi ac mscl e and l ocal i nf l amat i on of ki heywere i ncreased i n rat s exposed to the hi gh dose group and the mdd e dose group. The resu t shoved the 90-day oral noobserved- adversed-ef fect level(NDAEL)of hexanoi c aci d 2(d et hyl anino)et hyl ester i n w st ar rats was 40. 2ng/kgbwdral e), 49 1ng/kg bwdferalKey wor ds: hexanoi c aci d 2(di et hyl annno)ethyl ester, subchron c oral toxi city己酸二乙氨基乙醇酯(DA6)是一种新型的植物生长唯、雄大鼠各随机分成对照、低剂量、中剂量和调节剂,具有很好的应用和市场前景1引,为明确己酸高剂量4组,每组10只动物。染毒途径采用将受检样品二乙氨基乙醇酯对大鼠的90d亚慢性经口毒性作用及其拌入鼠料中,压成块状由大鼠经口自行摄入的方法。受亚慢性无作用剂量,进行本试验检样品在饲料中的含量依次为:0、754、3769、1材料与方法8462πg/kg,依据大鼠摄食量和体重计箅岀相应的雄、雌大鼠染毒剂量分别为:0、40.2、203.5、508.1mg/kg1.1受检样品性质bwd和0、49.1、252.1、602.7mg/ kg bw d。受检样品己酸二乙氨基乙醇酯为白色晶体,易溶于水,常温保存(郑州郑氏化工产品有限公司提供)1.4试验方法1.2试验动物1.4.1体重与日常观察每周用电子秤(日本 TANI TA公司生产)称量大鼠体健康wsta大鼠雄、雌性各40只,体重130150g,重;每日观察大鼠的活动、进食及饮水情况,并记录二级。购于中国药品生物制品检定所实验动物中心。异常情况动物饲养于中国疾病预防控制中心二级动物室,室内温度为23℃-26℃,相对湿度为40%60%,用中国军1.42血常规及血清生化检查事医学科学院实验动物中心提供的清洁级繁殖鼠料饲养试验前全部动物、染毒结束时每组各取6只大鼠取观察1周,自由取食和饮水尾血,用cel|l-Dy900自动血球记数仪(美国贝克公司生产)测定红细胞计数(×1012/L)白细胞计数(×109/L)及1.3动物分组和染毒剂量其分类和血红蛋白含量等指标;同时取全部动物尾血以收稿日期:2004-07-21,修返日期:2005-07作者简介:郑先福(1967·),男,河南夏邑人,副教授,硕士,主要从事农作物化学控制研通讯作者:孙炳剑,电话:0371-3558170,E-mai:sb8624@ina.comYH中国煤化工CNMHG第11期郑先福,等:已酸二乙氨基乙醇酯亚慢性经口毒性5173000r/mn离心10mn,分离出血清,用日立7060型全化。取脑、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、睾自动生化分析仪(日本日立公司生产)测定丙氨酸氨基转丸或子宫测定其脏器系数移酶活性(ALT,酶动力法UL)、天门冬氨酸氨基转移145病理检查酶活性(AST,酶动力法U/L)、碱性磷酸酶活性(ALP对照、低剂量、中剂量各组各随机取6只大鼠,酶动力法UL)、尿素氮含量(BUN,酶动力法m/L)、高剂量组取全部大鼠的脑、心、肝、脾、肺、肾肌酐含量(CRE,终点法μm{u)、胆固醇含量(CHO,肾上腺、睾丸、子宫、卵巢、胃、十二指肠等脏器终点法mm/L)、血糖含量(U,终点法mu)、总用10%福尔马林固定,常规石腊包埋切片,HE染色蛋折含量(TP,终点法8/L)、白蛋白含量(ALB,终点光学显微镜检查。法g/L)、总胆红素含量(BIL,终点法μrol/凵)等指标。1.5数据统计与评价1.4.3尿常规检查各项检测数据用∝FICE97软件 EXCEL中单因素方试验结束前1d,每组各取6只大鼠分别留6h尿液差分析检验各项检测结果的组间差异,以p<0.05判定为用尿分析仪( BAYER公司产)和URS-10尿分析试纸测定尿的有显著性。根据、《农药登记毒理学试验方法》颜色、尿糖(uGL∪、尿胆红素(uBIL)、酮体(KET)、比重(SG、红细胞(BLD)、pH值、尿蛋白(PRO、尿胆龙(B15670-1995)1规定的相关要求进行毒性评价。(UBG、亚硝酸盐(NR)和白细胞(LEU等指标2结果1.4.4脏器检査和脏器系数测定2.1体重变化情况试验结束时,断头处死全部动物,解剖检查脑在高剂量组中,雌、雄性大鼠分别在染毒56d和心、肺、肝、胃、脾、气管、食管、甲状腺、胸63d后,体重与对照组比较明显降低(p<0.05,结果见腺、十二指肠、小肠、大肠、肠系膜淋巴结、肾、表1),并持续到试验结束。其他各剂量组大鼠体重在肾上腺、睾丸或子宫等脏器情况,记录所见异常变染毒期间与对照组比较无显著差异。表1己酸二乙氨基乙醇酯(DA6)给药不同天数雌、雄大鼠体重变化(g±xS)姓别组别DA-6染毒时间(d77雌性对照组2657±1832654±15.82691±144低剂量组260.6±16.2266.6±17.6266.8±18.72689±17.4271.2±179758±19.5中剂量组3769251.7±18.02596士1842585±16.52640士176267.7±17270.1±164高剂量组8462240.6±14.8*242.0±10.3·243.9±10.6·2460±11.1·251.3±121·2534±132雄性对照组424.1±20.5364±212450.1±22.6451.6±2324543±24.74639±265低剂量组754420±1294359±236444.2±2264503±3034507±27.04582±218中剂量组37694128±26.64286±28644043114440±3294447±349460.8±31.7高剂量组84624003±1274065±121·4119±157·406±191·4135±228*4228206注:*与对照组比较p0.05。2.2血液学检查结果照组相比升高,并有统计学显著性(p<0.05)。雌性大鼠血常规检查结果显示雌、雄大鼠各剂量组的各项的ALT与AST与对照组相比升高,但未达到统计学显指标有一定差异,但是与对照组比较均无统计学显著著性。其它结果未见异常,结果见表3性(p>0.05),见表2。2.4脏器系数测定表2己酸二乙氨基乙醇酯经口染毒90d,雌、雄性脏器系数测定结果表明,雌性大鼠高剂量组肾脏大鼠血液学检查结果(x±s)器系数与对照组相比升高,差异有统计学意义(p0.05)性别组别RBCX0 L)WBC(10/L)HGB(g/L)淋巴Q)中性)雄性大鼠高剂量组的肝、肺脏器系雌性对照组低剂量组604±026137±18160.31983826153+19相比差异有统计学显著性(p<0.05),结果见表4。中剂量组598±02513.9±191595±178573613.5±30高剂量组614+016142±171608+1383244157+412.5尿常规检查86334低剂量组6.10±0.25156±221603±19838±3415.031雌、雄大鼠各剂量组尿常规各项指标与对照组比中剂量组609±08149±14160±08845±374.±32较未见明显异常,结果见表5。高剂量组6±0.32145±22161.0±19843.5143+322.3血液生化学测定2.6病理检查在高剂量组雄性大鼠的AST、ALB两项指标与对对照组和低YH中国煤化工肌小灶炎症CNMHG518农药 Ci nesejarrd o pesti ci des第44卷表3己酸二乙氨基乙醇酯经口染毒90d,雌、雄性大鼠血液学生化检查结果(下±S)检验项目对照组低剂量组中剂量组高剂量组ALTUAL)42.8±3.03.3±4.3548±3.5546±4848.3±521270±2061323±22.31100±1991218±1341228±1601304土1921380±126163.2±192·ALPU/L)1423±22.1180.5士1261435±24.62±213156.0±240181.0士157131.5±891885±27.7100±1.4803±1120±2.17.88±080107±1.18.20±0461.5±1.7940±222CRE(mmovL)869±6.1870±11.5101.2±11.880.1±4284.5士49815±54937士138936±298CHO(mmoVL1.83±0.17206±0.161,57±0112±0.14158±0.10221±02472±0.222.05±0.17710±028723±0.65667±0486.78±0.35693±050672±0.556.72±04374.0±24702±1.17.5±1.7720±3.577.6士34724428±5,16±05354±06384±1.1353±0.7BiLAumoVL)2.62士0.332.17±0.36227±0,35202±0302.33±0.511.94±035280±0521.70±034127±0.310.98±0.041.07±0.0102±00403±005注:*与对照组比较p0.05。表4己酸二乙氨基乙醇酯亚慢性经口染毒90d,雌、雄大鼠血液学检查结果(±S)子官舉丸0.66±0030.35±003059±0.143.04±0.160.23±0.02069士0050.264±0.053低剂量组0.68±0.050.33土0.020.73±0133.10±0.200.22士003069±0020.278±0053中剂量组0.66±005033±00359士0.09.01±0.152±003069±0.030283±0.057高剂量组0.68±0.04±0030633.16±0.1824±0050.74±0.070256±0.065雄性对043±0.020.28±0.023.13±0.10018±0.02061±0030.68±003低剂量组042士0.03028±0.03038±0.103.27±0.15·0.18±0020.63±0.030.68±0.04中剂量组041±0.070.18±0020.64±002067±0.04高剂量组44士0.040.28047±0.0335±027019±001064±0060.71±0.07注:*与对照组比较p<0.05。表5己酸二乙氨基乙醇酯亚慢性经口染毒90d,雌、心肌小灶灸症和肾脏小灶炎症的动物数明显增多雄性大鼠尿液生化学检查结果(x±s)按照农药毒理学试验程序,根据结果初步判检验项目对照组低剂量组,一中剂量组二高剂量组断:本试验条件下,大鼠喂饲己酸二乙氨基乙醇酯3黄3红3黄3红6黄4黄2红2黄4红4黄2红90d的最大无作用剂量为:雄性40.2mg/ kg bw d,雌60/60/60/60/6/6性49.1mg/ kg bw d。根据中华人民共和国国家标准56:.091.021010121001011.07:0(GB15670-1995)侬药登记毒理学试验方法》,检验PH8.33样品己酸二乙氨基乙醇酯为微毒参考文献LEU0/60/60/60/60/60/6060[1徐秋曼,程景胜,高虹.DA6浸种对水稻幼苗的生理效应初探[注:“”表示6只受检測动物中阳性检出动物数学学报和2例肾小灶症。高、中剂量组发生心肌小灶炎症的2吕建洲薛秀春张爱莲D6对圆柏生长及生理活性的调控[植物研究20,(1):73-78动物数明显增多,中、高剂量组轻微心肌小灶炎症的[彐董秀云,林美玉,初本富,等.D-6对草坪返青促进作用的研动物数各4例,心肌小灶炎症表现轻度点状、小灶和究[].中国森林病虫,2001,增刊:片状炎细胞浸润。中、高剂量组肾小灶炎症动物数[4张于龙梁颖.D6对水稻种子萌发和幼苗生长的影响J].西分别为5例和7例,肾脏小灶炎症表现为间质偶发炎细南农业大学学报,2001,23(3):219221[S王彩玲,景辉,薛超,等.己酸二乙胺基乙醇酯气相色谱分析U胞浸润和肾小管上皮轻度增生。其它各脏器与对照组农药科学与管理,2003,25(5):10-11比较无有意义的病理改变。[6国家技术监督局.15670-1995.中华人民共和国国家标准侬农药登记毒理学试验方法S].北京:中国标准出版社,3结论与讨论1996.8-69根据侬药登记毒理学试验方法GB15670-1995的[7黄伯俊主编农药毒理标拘允植围M.北京:人民卫生出版要求进行受检样品己酸二乙氨基乙醇酯9d亚慢性经口社,1993.1-26[8李寿褀.卫生毒理学基本原理和方法[M.成都:四川科学技毒性试验。试验中发现与对照组相比,雌、雄性大鼠术出版社,1987.231-505高剂量组的体重增长明显减慢(p<0.05);雄性大鼠高剂9安丽,等.95%吗啉原药亚慢性经口毒性硏量组AST、ALB两项指标升高(p<0.05),肝、肺脏器系数增大(p<0.05)。高、中剂量组雌、雄性大鼠发生责任编辑:夏彩云H中国煤化工CNMHG