低温乙醇蛋白分离法中乙醇的质量控制

中国输血杂志2004年10月第17卷第5期 Chin J Blood Transfusion, October,2004,vo17,No.5低温乙醇蛋白分离法中乙醇的质量控制周仁花(广东卫伦生物制药有限公司,广东汕头515071)关键词:蛋白分离乙醇法质量控制中图分类号:R392.33TQ23.12+2文献标识码:C文章编号:1004-549X(2004)-05-039002低温乙醇分离法是十九世纪40年代创建的一种血浆蛋同管理好、距离近的原则。特别注意综合考虑价格和质量白分离纯化的生化技术口,乙醇作为一种蛋白沉淀剂,具有避免简单采用比价采购给企业带来的质量风险。根据乙醇许多优点:介电常数低、与水易混溶、在正常环境和工作条件市场供应情况,一般可以保持2~3家供货单位以保证供应下无易爆性、低分子量、化学上的相对惰性、低毒、价廉、易得的可靠性,有利于产品质量的持续改进和提高和抑菌作用。至今,大规模血浆蛋白分离仍基本采用低温乙14有特殊质量要求时,可先向供货单位提出,并写入合同醇分离法。乙醇作为低温蛋白分离法中的主要物料,用量非条款中。常大,对它的质量控制不好,关系到制品的质量,可能表现在制品的安全性稳定性澄明度、收率等方面。笔者就曾遇到2抽样检验的乙醇质控问题,提出来与同道探讨对供货单位产品乙醇的检验是保证外购乙醇质量的重1控制好进货渠道要手段,进厂检验的目的是防止不合格乙醇流入生产流程造成不必要的损失。被抽样的乙醇必须均匀一致,并具有代表1.1质量管理部门应对供货单位进行质量评估,合格后方性,对抽取的乙醇严格按《中国药典》或《中国生物制品主要可进货。供货单位应具备《营业执照》、《药品生产许可证》和原辅材料质量控制标准》(2000年版)要求逐项全检,合格《乙醇(药用级)的生产批件》,生产范围应有乙醇(药用级)。后,方可放发使用。本公司1999年生产的一批人血白蛋白供货单位的人员、厂房、设施、设备、卫生能符合乙醇生产和(批号9906104)外观有严重乳光,经调查发现在生产过程质量要求,质量保证体系完善,特别对运输设备不能忽视,应中,配制乙醇时发现有乳光的异常情况,当时未引起重视,继使用专一的运输设备,不能与其他化学试剂共用续加工,到成品分装后才发现问题,及时更换其它批号的乙1.2供应单位一经选定,应尽可能减少变更,需要变更时,醇后,白蛋白的外观即得到解决。事后将此批(990510)乙醇必须经质量管理部门审查,批准。配制成不同浓度与另两批药用乙醇比较分析、检测浊度,见1.3选定供货单位,应遵循高质量、低价格、守信用、重合表1。表1不同批次、不同浓度乙醇的浊度比较本底12%20%(加盐)20%40%(加盐)9905109906182.82.92.3.2990630导致白蛋白外观有严重乳光的乙醇批次从上表数据推测可能是某种水不溶物污染了乙醇,污染途径可能是运输过程中盛装的容器不洁净,但在常规检测中3对乙醇质量的验证又难以发现因此根据生产需要还应增加以下监控内容:①确定样品符合要求后,由于检测项目有限,是否适用于根据生产需要可把乙醇稀释成生产所需的不同浓度,检测浊生产,生产部门还必须采用供货单位提供的乙醇作试生产验度,尤其是配制20%乙醇和40%乙醇时更要慎重;②防止生证,尤其是新的供应商或者原有的供货单位长时间停止供货产的制品免受污染,可对乙醇作气相分析,与分析纯乙醇图后又恢复供货的情况下,更需要对它们提供的乙醇进行验谱比较;③生产企业的生产操作人员及质量监督人员应对新证,通过对制品质量的全面考察来评价乙醇的质量情况。购入的乙醇按工艺中所需要的各种乙醇浓度进行配制后检查其澄明度,并以此作为生产过程的质量控制点。生产人员有选用能稳定地满足生产和产品质量标准要求的乙醇,才能和管理人员对所购入的乙醇在使用过程中发现任何异常情保证制品质量的稳定,因此必须做好乙醇的验证工作,况后,必须立即上报质管部门4乙醇贮存系统的清洗乙醇在贮存过程中会析出一些不溶性絮状物,应定期清中国输血杂志2004年10月第17卷第5期 Chin J Blood Transfusion, October,2004Vol.17,No.5391·洗,包括管道输送系统,在生产中发现,用水清洗后,还必须再用乙醇循环冲洗,否则管道开始放出的乙醇对制品澄明度争考文獻也有一定的影响。1 CohnEJ et al. Preparation and properties of serum and plasma总之,对乙醇的质量控制工作应该从过去的主要依靠人proteins. iv. a system for the separation into fractions of the pro-厂抽样质量检验的阶段向前迈进一步,进入全面质量控制阶tein and lipoprotein components of biological tissues and fluids .J段,实现QC模式向QA模式的转变,QA部门要对其整个过Amchem Soc, 1946, 68:459程进行质量控制和正确、有效地监督。同时,生产部门配合2缪德骅主编.药品生产质量管理规范实施指南(201年版).北质量管理部门做好其验证工作,以确保制品的安全性、稳定京:中国化学制药工业协会,2001,46~53性和有效性,降低生产企业成本、提高经济效益和维护人民(2003-07-28收稿,200405-28修回)的生命安全。本文编辑:刘晓明用自动化微板法初筛RhD血型建立RhD阴性库王秀风马振东王献芳(廊坊市中心血站,河北廊坊065000关键词:Rh血型微板法中图分类号:R457.1+1文献标识码:B文章编号:1004-549X(2004)05-039102试管法筛查与鉴定RhD血型,存在操作步骤繁琐,人为照,从而判定待测微孔是否存在凝集。因素影响较大,且结果只能当时凭肉眼判断,无法使结果数据化的不足。本血站于2003年1月建立了RhD血型大规2结果及分析模初筛的自动化操作方法,使RhD血型初筛纳入了献血者经微板筛查,RhD阴性标本34份。采用了多克隆抗D初筛的常规检测项目。血清(单克隆lgM和多克隆IgG,涵盖范围广泛,对D抗原和部分弱D抗原均可产生较好的凝集反应1)排除假阴性。对1材料与方法所有微板RhD阴性标本均进行间接抗球蛋白试验,有效防1.1标本本站献血者ACD抗凝新鲜标本8603份止了D型的漏检。发现RhD33份,D"1份,RhD阴性符合1.2试剂抗D血清(lgM+lgG型)(Baso)率为97.1%。1.3仪器自动加样系统(RSP150,瑞士 TECAN)和HEI通过对RhD血型大规模的初筛,为固定的无偿献血者DOLPH温育振荡器( TITRAMAX1000,德国);TL5.0型平建立了ABO、RhD血型档案,保证了稀有血液的利用。也使板离心机(上海);微孔U型板。检测过程程序化,判读标准化,结果数据化,有效地排除了人1.4方法将ACD抗凝血3500r/min离心75min后启动为干扰,处理96人份标本只需25min,大大提高了工作效率。RSP控制软件 Logic,取0.9%NaC1200dl待测RBC10μl加参考文献至预稀释板混匀取稀释好的5%RBC悬液30μ1加至U型板中再加入301抗D1血清。2℃温育振荡6min,频率为1吕鹏主编,最新输血技术学,北京:人民卫生出版社,194,395500/min,平板离心机离心1000r/min,2min,振荡30s,频率800/min,在波长620nm下,判读反应结果2 Zhiburt EB, Andreeva LS, Savel eva LP, et al. 2-stage determi-1.5判读启动计算机进入 Platemate for windows凝集模nation of Rhesus classification Klin Lab Diagn, 1996,(3):29块读板程序后,酶标仪对待测微板96孔同时沿最大孔径进(200305-18收稿,200403-11修回)行40点线性扫描,凝集孔和非凝集孔可获得两种不同的曲本文编辑:王良华线,程序自动选择20点连成的曲线与参考曲线进行拟和对