黄芩乙醇回流提取工艺研究

实用中医药杂志2013年6月第29卷6期(总第245期)JOURNAL OF PRACTICAL TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 2013. VoL 29 No6黄芩乙醇回流提取工艺研究杨宏静(重庆三峡医药高等专科学校,重庆404020)[中图分类号]R282.710.2[文献标识码]A[文章编号]1004-2814(2013)06-492-02[摘要]目的:研究优选黄芩♂醇回流的提取工艺。方法:采用单因素考察及正交试验设计,以黄芩苷的含量为考察指标优选黄芩提取工艺。结果:黄芩提取工艺选择为加8倍量σ%乙醇提取2次,第1次2h,第二次1.5h。结论:用此方法提取黄芩药材效率高、结果稳定。[关键词]黄芩;黄芩苷;单因素考察;正交设计;提取工艺[Abstract]Objective: To study the best extraction process for Scutellariae Radix.Methods: Using single factor and orthogonal design todetermine the content of baicalin as the index of evaluation Results: The optimum condition for the extraction of Scutellariae Radix was adding 8 times of60% alcohol, extracting for 2 hours first time and 1.5 hours second time, totally extracting 2 times. Conclusion: The optimum condition was efficient andI Key words Scutellariae Radix; Baicalin; Single factor; Orthogonal design; Extraction technology黄芩为唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi合并,定容至20mnL量瓶中,备用。的干燥根。黄芩味苦、性寒。归肺、胆、脾、大肠、黄芩苷含量测定方法:①对照品溶液的配制:取小肠经,具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效黄芩苷对照品约10mg,精密称定,置250mL量瓶中,2。黄芩中主要含有黄酮类化合物,以黄芩苷为代表的加甲醇溶解并稀释至刻度,即得。②供试品溶液的制黄酮类成分是黄芩抗菌、抗炎、解热的主要有效成分3。备:各精密量取提取液2mL,置50mL量瓶中,加甲醇为了充分提取黄芩的有效成分,我们用单因素考察及正稀释至刻度,摇匀,精密量取1mL,置10mL量瓶中交试验设计,对黄芩的提取工艺进行了研究,确定了适加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,即得。③色谱条件合黄芩生产提取的工艺以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.2%磷1实验仪器与材料酸溶液(45:55)为流动相,流速1mL/min;检测波长仪器回流提取装置、高效液相色谱仪( Agilent 1100)、280m。④测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品色谱柱: Waters Sunfire184.6×150mm。溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定,即得。试剂与药品。黄芩药材(购于安国以岭中药饮片有实验结果见表1。限公司)、黄芩苷(批号110715-200815,购于中国药表1黄芩提取溶媒考察结果实验号黄芩苷含量品生物制品检定所)、乙醇为医用级、甲醇为色谱纯、水675250%乙醇水为重蒸水。60%乙醇0%乙醇2方法与结果结论:由以上结果可知,60%乙醇作溶媒时,黄芩2.1提取溶媒考察因素水平参考有关文献中黄芩的提取工艺研究*3,苷含量高于水和其它浓度乙醇作溶媒时黄芩苷的含量,选取水、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇为故选择60%乙醇为提取溶媒。单因素考察水平,进行试验。22正交试验实验方法:取黄芩选净,称取15g,分别加入6倍正交设计:选取影响提取物收率的提取次数(A)量的溶剂,回流提取2次,每次1.5小时,提取液滤过提取时间(B)、加醇量(C)为考察因素,以黄芩苷的实用中医药杂志2013年6月第29卷6期(总第245期)JOURNAL OF PRACTICAL TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 2013. VoL 29 No6含量为指标,选取如下水平进行试验,见表2。定的工艺为AB32C2,即加8倍量60%乙醇提取2次,表2因素水平表第1次2h,第2次1.5h。水平提取次数提取时间加醇量(相当于药材倍数23验证试验取药材,净选干燥,粗碎,按处方配比,称取黄芩15g,以60%乙醇为提取溶媒,按最佳工艺A3B3C3组实验方法:取药材,净选干燥,粗碎,按处方配比,合条件和选定工艺A2B(3,2)C2的组合条件进行重复称取岛根15.以6%乙醉为提取溶蝶在平行操作的验证对比实验,测定黄芩苷的含量,测定结果见表5条件下,按I9(3)4正交表,回流提取,提取液合并,滤过,减压回收乙醇,适量浓缩,转移至1000mL量瓶中,点这里,物世A, B,C3110.07放冷至室温,加60%乙醇稀释至刻度,摇匀,备用。A, B, C307,72A, B,C3106.68黄芩苷的含量测定方法:同上。4A2B(3.2)C2I0408102.96A2B(3.2)C210264实验结果见表3和表4。6A2B(3.2)C2表3黄芩正交实验表列号由上表可见,以黄芩苷的含量为考察指标,最佳工实验号4(次)B(h)C(倍)D(空白)Yi(mgg)艺ABC和选定工艺AB(3,2C2的差距均不大;但选定12331223工艺省工节能,故选定AB(3,2C2为提取工艺,即药材加8倍量60%乙醇提取提取2次,第1次2h,第2次1.5h。101.693讨论106.54102,58黄芩中所含黄酮类成分为其主要有效成分,此类成lj2268426616263.8626669分易溶于乙醇。通过单因素提取溶媒的考察,得出此类296.7928175276.302824031.222869429469285.76成分在60%乙醇中溶解度较大。用正交实验设计,优选l251456.3970884.1569622.1071123.5688084.3079383.0676341697974976C574161了影响提取物收率的3个因素,得出最佳提取工艺,结Rj=32+i2+112363985823258.72328059923253209合实际生产,对各影响因素进行了优化,最终确定了黄Si=Ri/3芩的提取工艺为加8倍量60%乙醇提取2次,第1次提表4方差分析方差来源离均差平方和自由度均方F值取2h,第2次提取1.5h。135791678.96ABCD[参考文献2.321]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)注;Fo0s(2,2)=1900,Fo01(2,2)=9900(2010版)[M].北京:中国医药科技出版社,结果:由表3可知,3个因素的影响大小顺序为提2010:283取次数大于加醇量大于提取时间。最佳工艺为A3BC3,即加10倍量60%乙醇提取3次,每次2h。表4中方[2]高学敏.中药学[M].北京:人民卫生出版社,1998:118差分析表明,A因素对黄芩苷的含量有显著性影响(P<0.05),B因素和C因素对黄芩苷的含量均无显著性3]李欣,魏朔南.黄芩的生物学研究进展[J].中国野生植物资源,2006,25(6):11-15.影响。A因素中,随着提取次数的增加,黄芩苷的含量虽有不同程度的增加,但Ⅱ到Ⅲ增幅变小,为了缩短生4]丁芳林,张雯杰,陈波,等,正交法优化超声醇提黄芩活性成分研究[J].湖南中医药大学学报产周期,采用提取2次。B因素对黄芩苷的含量无显著性影响,考虑到浸提时溶媒对药材组织的浸润和渗透过2008,28(3):14-1程,故将提取时间选为第1次2h,第2次1.5hC因素[5]宋承富,叶萍.黄芩提取物工艺研究[J].中华中医药学刊,2011,29(3):641-644对黄芩苷的含量亦无显著性影响,考虑到药材提取的吸[收稿日期]2013-02-16收溶剂膨胀,因此将用量选定为8倍量。故经优选后确