rhTNF α表达条件的优化与中试发酵

为了确定出rhTNFα最佳表达条件,实验利用正交试验设计方法,对rhTNFα工程菌的进行发酵培养和42℃热诱导,此后借助蛋白凝胶电泳分析软件对各组样品的凝胶电泳图片定量分析,利用方差分析对影响TNF基因工程菌对目的产物表达的几个重要的条件进行了优化,并最终确定出pH7.5、培养温度27℃、培养时间4.5 h、诱导时间5 h的最佳表达条件.在该条件下进行中试发酵TNF的表达产物占到了菌体总蛋白的60%左右,且大部分以可溶形式存在.说明在大肠杆菌生长正常的前提下适度低温培养有利于rhTNF α的表达和减少包涵体的形成.