乙醇脱氢酶法测定血浆中乙醇

目的:建立一种快速测定血浆中乙醇浓度的新方法.方法:选用三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸(Tris-HCL)作为缓冲体系,在碱性条件下,乙醇脱氢酶(ADH)催化乙醇转化成乙醛,同时生成还原型辅酶I (NADH).在340 nm波长处检测吸光度的变化,对照标准计算乙醇的浓度.结果:ADH最适用量为753 KU/L,辅酶I(NAD+)最适浓度为60.0 mmol/L,检测过程仅需90 s,线性范围可达0～68.60 mmol/L,变异系数(CV)为2.31%～3.25%,回收率为98.4%～101%,与美国DADE试剂盒比较具有良好的相关,γ=0.985,y=0.987x+0.024. 结论:本法测定血浆中乙醇无需除蛋白,具有快速、简便等优点,可用于自动生化分析仪及手工操作,适于临床常规运用.