血液中乙二醇的气相色谱检测法

中华劳动卫生职业病杂志2010年11月第28卷第11期 Chin Ind Hy853监测与检验技术血液中乙二醇的气相色谱检测法陈礼明杜书明陈姿如【摘要】目的建立简便快速检测血样中乙二醇的毛细管柱气相色谱法。方法取中毒患者静脉血3.0ml于肝素锂抗凝管中,取1.0ml全血于具塞玻璃试管中,加入0.9mg/ml乙酸丁酯50l(内标)加1.0ml丙酮充分振荡萃取,取丙酮层于锥形试管中,取1.0进样以保留时间定性峰面积内标法定量。结果乙二醇线性范围0.5~5.0mg/ml,回归方程:y=0.2908x+0.0126,0.9992:平均回收率96.0%102.2%;日内和日间相对标准偏差(RSD)分别为:2.97%~4.12%和3.31%4.78%,最低检出浓度为0.2mg/ml。结论本方法简便快速,灵敏度高,分离杂峰少且容易判定,可以满足检测需要。【关键词】乙二醇;血液;色谱法气相乙二醇(ethyleng glycol,EG)又名“甘醇”,为无色无臭有试管中,取1.0进样甜味液体,作为汽车防冻液和玻璃清洁剂广泛应用于汽车修二结果与讨论配行业和装修行业,工人因种种原因误服防冻液而引起中毒1线性范围和最低检出浓度乙二醇检测线性范围0.5的病例常年均有发生血液中乙二醇检测成为临床诊断和治5.0mg/ml,最低检出浓度为0.2mg/ml,回归方程y=0.2908x+疗的一种重要指标。为此我们建立了一种快速简便的血样0.0126,0.9992乙二醇气相色谱检测方法2.精密度试验:取体检正常人全血5.0ml,分别配制0.5、一、材料与方法1.5、3.0mg/ml高、中、低3种乙二醇浓度标准样品,加0.91.仪器与试剂:9790型气相色谱仪(浙江温岭福立分析mg/ml乙酸丁酯50μl,分别吸取1.0m加丙酮1.0ml充分振仪器有限公司),氢火焰检测器(FID)F9500谱工作站荡萃取5min。然后以3000r/mi离心10min取上清丙酮层(浙江福立分析仪器有限公司)。乙二醇标准品为分析纯(于锥形玻璃试管中,取1.0进样。在同一日不同时间及不津市北方天医化学试剂厂)丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲同日间按上述方法萃取样品,在相同色谱条件下测定乙二醇醇、乙醇均为分析纯,0.9mgml乙酸丁酯(内标)标准贮备液浓度,计算日内日间相对偏差,见表1。的配制:准确吸取乙二醇0.5ml置于100ml容量瓶中,用丙表1精密度试验结果(n=5)酮定容至刻度,配成5.55mg/ml乙二醇标准贮备液。乙二醇浓度日内日间2.色谱条件:S-54毛细管色谱柱:(30mx0.25mmD),(gml)x相标准偏差(%)x相对标准偏差(%气化室温度250℃检测器柱温:200℃柱温:100恒温操0.50.480.0204.120.50200244.78作。载气:0.12MPa,氢气:0.1MPa,空气0.03MPa,衰减51.51.550.0754.841.480.0553.723标准曲线的绘制:取乙二醇标准贮备液用正常人全3.03.100.0922.973.080.1023.31血配制0.10.50、、1.50、.050g/ml的乙二醇标准系列,各管加入0.9mg/ml乙酸丁酯50μ,分别吸取1.0ml3.回收率试验:取体检正常人全血5.0ml,分别配制标样加1.0ml丙酮充分振荡萃取5min。然后以3000rmin0.50、1.5.05.00mml乙二醇标准样品,加0.9mg/ml离心10min。取上清丙酮层于锥形玻璃试管中取1.0进乙酸丁酯50山,分别吸取1.0ml加酮1.0ml充分振荡萃样。保留时间定性,峰面积内标法定量。按上述血样萃取方法取5min然后以300rmn离心10min取上清内酮层于锥做5次平行试验,分别记录峰面积。以乙二醇峰面积与乙酸形玻璃试管中,取1.0μ测定,见表2丁酯峰面积比值(y)对血液乙二醇浓度(x)进行回归,并计算表2回收率试验结果(n=5)回归方程,以3倍信噪比计算该方法的最低检出浓度。乙二醇浓度平均测定值回收率相对标准差4.样品测定:取中毒患者静脉血3.0ml于肝素锂抗凝试(mg/ml)(mg/ml)(%)(rsd%)管中,取1.0ml全血于具塞玻璃试管中,加0.9mg/ml乙酸丁0.50.4896.03.74酯50l,加1.0ml丙酮充分振荡萃取,取丙酮层于锥形试管1.51.399264.65中,取1.0μ进样。3.03.04101.34.125.血样空白试验取健康人血液1.0ml,加0.9mg/ml乙5.05.11102.23.98酸丁酯50,用1.0ml丙充分振荡萃取,取丙酮层于锥形4.乙二醇定性与保留时间:从乙二醇标样和中毒患者血doI:10.3760/cma issn0-391.2010.11.018样色谱图分析,在上述色谱条件下乙二醇出峰的保留时间约作者单位:300162天津武警医学院附属医院毒检中心为2.178min(见标样色谱图1,患者血样色谱图2),在此保留54中华劳动卫生职业病杂志2010年11月第28卷第11期 Chin Ind Hyg Occup DisNovember20v.n时间血液空白不出峰。三氯甲烷、乙酸乙酯甲醇和乙醇有机中的乙二醇可以溶解在丙酮中离心后直接进样,不需氮气溶剂不会对乙二醇峰形成干扰。结合临床病史,一旦在此出吹干(氮气吹干丙酮的同时也会将乙二醇吹掉)方法操作简蜂就要考虑乙二醇成分的存在。便,分析迅速,通过线性试验、精密度试验和回收率试验,完全能够满足测定需要。1301200000000000000110100098790506040一N0123时间(min)00001231乙二醇标样色谱图时间(min)5.干扰试验:取空白全血1.0ml,分别加入0.50ml(1mg/ml)图2乙二醇中毒患者血样色谱图三氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙等有机溶剂,根据所选条件处理分析,检测结果表明:上述有机溶剂不会对乙二醇参考文献测定进行干扰,萃取液无杂质,不溶血。6实际应用:患者男,40岁汽车修理工,既往身体健李焕德许树梧急性中毒卷物检测与诊疗长沙:湖南科学技术出版社2000:449-450康因口渴于2010年3月11日误服防冻液约200ml10min[2]刘军生,杜书明钱义血清中甲醇和乙醇的气相色谱法测定中后即感头晕恶心,呕吐2次,2h后转来我院,经取血化验检华劳动卫生职业20,369书北京:人民卫生出版社,测到乙二醇3.3mg/ml,确诊后经对症治疗,12d后痊愈出院。1997:326-3218.萃取方法是本实验的关键,我们进行了反复试验,三氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、甲醇和乙醇等萃取效果均不理想,比(收稿日期:201004-15)较好的萃取方法是取全血加适量内酮,充分振荡提取,血样(本文编辑:杨德一)工作场所空气中百草枯的高效液相色谱测定法刘彤杨宝玺曹思愈杨楠【摘要】目的建立工作场所空气中百草枯的高效液相色谱测定方法。方法用聚四氟乙烯滤膜采集工作场所空气中百草枯,用去离子水洗脱后高效液相色谱(紫外检测器)测定。结果方法的线性范围为0-30.0μg/ml;回归方程y=47x-22.相关系数0.9993最低检出浓度为0.056mg/m(以采集45L空气样品计);3种不同浓度的批内、批间精密度分别为2.5%、1.3%、0.9%和3.4%、3.7%、3.5%;回收率为97.5%102.5%;洗脱效率为97.3%-9.7%;采样效率为100%;样品在室温下至少可保存7d结论方法的各项指标均符合GBZT210.4-008《职业卫生标准制订指南第4部分工作场所空气中化学物质测定方法》,可用于工作场所空气中百草枯的测定。【关键词】百草枯;色谱法液相工作场所百草枯为阳离子盐,其氯化物,即常用百草枯是百草枯℃20℃),易溶于水;不溶于烃类;少量溶于低级醇,一般加二氯化物,为白色固体,具有淡淡的氨味,相对密度1.24(20工为水剂,为中等毒性除草剂本品在生产使用中可通过皮肤及呼吸道摄入体内,长期小剂量接触可导致人体肺脏肝do:0.3760/issn0-9391.20.11019脏、眼睛发生病变,影响人体免疫功能具有许多潜在危害。作者单:3005天津渤海化工集团公司劳动卫生研究所通讯作者:扬我国工作场所中百草枯时间加权平均容许浓度(PC-TWA)为