刺玫果提取工艺研究

第29卷第5期吉林医药学院学报Vl29No52008年10月Journal of Jilin Medical CoOct 2008大鼠的体重几乎是零增长,而超重辐射保健品组大鼠参考文献:的体重还表现出了负增长现象。这说明超重辐射对大鼠的损伤是客观的这种损伤很可能导致了大鼠的[1] Oshima M,OhmH, Tateto MM. Hypergravity induc消化吸收功能障碍,从而导致体重减轻;而以林蛙油expression of cyclooxygenase-2 in the heart vessels[J]为主要成分的保健品,很可能具有抑制成年大鼠体重Biochem biophys Res Commun, 2005, 330(3): 928-933增加的效应,这为进一步研究该保健品是否具有减肥2.21Mnu,oaoa.Meiy, et效应提供了启示。微波辐射和超重环境对机体的损伤是广泛而复phocytes after exposure in vitro to 1800-MHZ microwave radiation[J]. Mutat Res, 2005, 582(1-2): 42-52.杂的根据其强度和时间不同,分别可使生物体致死、【3] Chandrasekaran S, Nagarajan S. Microwave-assisted synthe致伤、致残。长期接触低强度微波辐射,如长期使用is and anti-bacterial activity of some 2-amino-6-aryl 4(2-手机的青少年,可出现疲劳、乏力、记忆力降低、耳鸣、thienyl)pyrimidines[ J]. Farmaco, 2005, 60(4): 279-282嗜睡视力下降等症状。以吉林长白山特产林蛙油为[4] Sun JR,YeYM. Altered behaviour and erpression of Fo主要成分的保健品,可辅助增强机体抑制羟自由基的in rats bom in hypergravity and their re-adaptation to the能力,还具有抑制成年动物体重增长的趋势,如果适nomal gravity[J]. Sheng Li Xue Bao, 2001, 53(1): 61-65量服用很可能具有防护超重环境和微波辐射对机体[5]潘文千,吕士杰曹惠玲,等超重和低气压环境下动物的损伤效应。当然,这还需要从整体水平、细胞水平微波辐射的实验方法研究[J].吉林医药学院学报和分子水平进行广泛而深入的综合研究来证明。2008,29(2):6365.(收稿日期:200807-26)文章编号:16732995(2008)05025603·论著·刺玫果提取工艺研究徐冬梅,雷钩涛2(1.东北虎药业有限公司,吉林吉林132013;2吉林医药学院药学院,吉林吉林132013)摘要:約研究刺玫果中总黄的最佳提取工艺。方采用正交试验设计法,考察溶剂浓度、溶剂用量、回洸时间、回流次数4个因素,每个因素3个水平,通过紫外分光光度计检测总黄酮含量。果乙醇浓度对总黄酮含量有显著影响,乙醇用量影响最小。论最佳提取工艺为6倍量75%乙醇,回流3次,每次回流5 h关键词:刺玫果;提取工艺;正交试验中图分类号:TQ460.6文献标识码:AStudy on extraction process of Fruit of Dahurian RoseXU Dong-mei, LIE Jun-tao(1. Northeast Tiger Pharmaceutical, Jilin City, Jilin Province, 132013; 2. Jilin MedicalCollege, Jilin City, Jilin Province, 132013, China)Abstract: Objective To optimize the extraction process of Fruit of Dahurian Rose. Methods The optimum extrac-tion was investigated by the orthogonal design and determined by中国煤化工 ant of solvent,emcCNMHG通讯作者:雷钓涛(190-),男(汉族)副教授硕士作者简介:徐冬梅(1971-),女(汉族)工程师本科第5期徐冬梅,等.刺玫果提取工艺研究tion hour, extraction times were the four factors in the experiment, and three levels of each factor were chosen to be in-spected to optimize the process. Results The concentration had the most significant and the amount of solvent hadthe least effect on the content of Flavonoids. Conclusion The best extraction process was to reflux three times withtimes EtOH(75%)for 5.0 h eadKey words: Fruit of Dahurian Rose; abstraction process; orthogonal desig刺玫果学名野蔷薇,又名野刺玫果、山刺玫果,蔷副教授鉴定为蔷薇科蔷薇属山刺玫 Rosa davurica薇科蔷薇属多年生落叶灌木始载于《中药大辞典》Pa的干燥成熟果实。芦丁标准品(上海融禾医药和《东北药用植物》中,是我国高等植物之一,广泛分科技有限公司,批号:080116),所用试剂均为分析布于黑龙江、吉林、辽宁内蒙古、河北、山西等地。本纯。品野生资源丰富,文献记载有很好的药理作用,果实1.2样品的制备性温味酸,营养丰富,民间大量采食或用于泡茶、泡称取药材粗粉20g,粉碎过40日筛,置于圆底烧酒等,《中药大辞典》谓其有健脾理气、养血调经的作瓶中根据试验列号所列条件提取滤过,合并滤液用2刺玫果中主要含有黄酮类有机酸香豆素滤液于50℃浓缩。类、甾醇、三萜类、复烯烃类、皂苷、蛋白质、糖类胎肪采用正交试验法,考虑的主要影响因素如下:乙油挥发油4和17种氨基酸其中包括苏氨酸缬醇浓度、乙醇用量回流时间回流次数。按L(3)酸、异亮氨酸亮氨酸、甲硫氨酸苯丙氨酸及赖氮酸试验列号所列条件提取,以总黄酮含量为指标确定等7种人体必需氨基酸;含有28种元素其中包括最佳提取工艺(见表1)。锌、铁硒等14种人体必须的微量元素,特别是锌的含量很高经国家卫生部临床检验中心检验,每百克表1L,(3)因素水平表实,号称“生命之花”;同时还含VAVC、vE、wB、水平A剂浓度B剂用量C国流时间D流次数果中锌的含量为1943mg,其含量高于其他植物果(倍)(h)(次)VB2VP、B胡萝卜素等多种维生素,其中V含量最高。市场上已出现由该果汁为主研制的保健食品及保健饮料,临床已研制出以刺玫果为原料的注射液及口服液。市场上对治疗心血管疾病的药品需求量很大,刺玫果中所含的总黄酮类物质具有预防和治疗高血脂血栓所致的心脑血管疾病的功效,1.3标准曲线的绘制且具有高效低毒副作用的优势。为了提高对该药材精密称取干燥至恒重的芦丁对照品9.3mg,置质量的控制我们采用正交试验法以芦丁为标准品对25ml量瓶中,加60%乙醇溶解至刻度,摇匀,即得刺玫果中总黄酮提取进行研究为提取刺玫果中有效对照品溶液。精密吸取对照品溶液0.0、0.3、0.5、物质提供一定参考。0.8、1.0、1.3、1.5、1.8、2.0ml,分别置10ml量瓶中加60%乙醇溶液至5ml,精密加入5%亚硝酸钠1材料与方法0.3ml,摇匀,放置6min,再精密加入10%三氯化铝溶液0.3ml,摇匀,放置10min,再加入4%氢氧化钠11仪器和材料溶液4ml,最后加60%乙醇至刻度,摇匀,放置紫外分光光度计(UV00型,中国,北京瑞利分10min,置比色杯中。以60%乙醇为对照品,于400析仪器公司);旋转薄膜蒸发仪(RE52AA型,中国,600m间扫描,在502m处有最大吸收,用紫外分上海亚荣生化仪器厂);循环水式真空泵(SHZD,中光光度计在此波长处测吸光度(见表2),绘制标准曲国巩义市予华仪器有限责任公司),电子天平(沈阳线,中国煤化工丁标准品溶液在龙腾电子有限公司);数控超声波清洗器(KQ-100DB1.16性关系良好。以型,中国昆明市超声仪器有限公司)。吸光CNMHG行线性拟合,回归刺玫果,购于药材市场,由吉林医药学院雷钩涛·方程为:y=0.0114x-0.0103,y为吸光度,x为浓度亩林医药学院学报2008年10月第29卷r=0.9995。3讨论衰2芦丁浓度与吸光度的关系通过对正交试验结果分析,可以看出,影响刺玫序号浓度(/ml)果提取的因素主次顺序为:乙醇浓度>回流时间>回11.16流次数>乙醇用量。乙醇浓度对总黄酮影响显著,乙18.60醇浓度低,不利于有效成分浸出完全,乙醇浓度高使29.760.32杂质量增加,75%的乙醇对刺玫果苷含量影响最大;37200.4010.533提取时间和次数对刺玫果中总黄酮含量影响较大;乙55.800.623醇用量对其含量也有一定影响,乙醇用量对总黄酮提取率影响最小,乙醇用量少,总黄酮溶解少、提取不充74.40分,用量过大,可能有吸附现象,使总黄酮有一定损失。由此可知,刺玫果最佳提取工艺为:AB2C3D1,即乙醇浓度为75%,溶剂用量为6倍量,回流3次,14刺玫采中总黄酮的测定每次回流5h。精密称取提取物干膏0.165g,置50m1容量瓶本实验采用正交设计进行试验,为从刺玫果果实中用乙醇溶解并定容至刻度精密量取5m置中提取总黄酮类成分提供了科学、合理的理论依据。25m容量瓶中,用乙醇定容至刻度,以乙醇为空白对照用紫外分光光度计在502m处测定吸光度根据◆考文献:标准曲线计算刺玫果提取液浓度。[1]江苏新医学院中药大辞典(上册)[M].上海:上海人民出版社1977:7,754.[2]黑龙江省药品监督管理局鼎龙江中药材标准[S]刺玫果中总黄酮的测定结果见表3。由表3可2001:114.知影响总黄酮提取的因素的主次顺序为:乙醇浓度[3]俞作仁,王文莉吕娟涛刺玫果化学成分及药理作用研>回流时间>回流次数>乙醇用量。以总黄酮百分充进展[J]中草药2002,3(2):188190含量为指标最佳提取条件为AB2C2D,即乙醇浓度[4]王群,陈雅研山刺玫果研究进展[J中国中药杂志,为75%,溶剂用量为6倍量,回流3次,每次回流5h1997,2(3):131-134.[5]贾洪斌朴贵金徐秀廷,等刺玫果中氨基酸组成及含2L(3)正交试验结果量的测定[门]内蒙古民族师院学报:自然科学版,1997,12(1):7880.BD总黄酮含量(%)C123[6]杜英华陈保国贾洪斌刺玫果营养成分的分析测定[J].内蒙古石油化工,2002,28(4):242519.0[7]王晓燕李雪琴应县野生刺玫果营养成分分析及评价23.8[J]科技情报开发与经济,2004,14(5):140-14130.729.3[8]张国贞李芳兰,张金梅野生刺玫果营养成分分析及评26.6价[打]食品研究与开发001,22(6):3840.1.0[9]黄学文乌云龙大兴安岭北部林区野果资源及保护利用中国野生植物资源,2007,26(2):39421.3[10]王萍殷丽君杨金燕刺玫果人参保健饮料的研制T10.690.3870.5m0.618[J]中国林副特产,200(3):9100.8670.5630.4670.511[1]于玲史凤英吴景时山刺玫果对心脏及保护心肌Ty0.1050.52006280.542中国煤化工产,00(11617.0.7620.0670.2740.107[12]CNMHG急性血瘀模型大鼠血陶皿脂人飘陣脂作用的研究[J].中国药物与临床,2007,7(6):44749第29卷第5期吉林医药学院学报Vol.29No52008年10月Journal of Jilin Medical Collegect.2008[13]于玲媛,史凤英,吴景时山刺玫果对血清胆固醇的作然科学版,2005,6(3):28-230.用研究[中国林副特产,2005(3):37[14]焦淑萍,杨春玫,初秋等.山刺玫果降血脂抗氧化及(收稿日期:20080906)保护血管内皮功能的实验研究[].北华大学学报:自文章编号:1673-2995(2008)05025904论著维生素C和E联合应用对酒精损伤睾丸超微结构的影响李宏宇,邓晶,朱玉萍2,张建霞,田洪艳,李质馨°(吉林医药学院:1.临床医学院2护理学院3组织学与胚胎学教研室,吉林吉林132013)目的观察维生素C(VC)和维生素E(VE)联合应用对酒精(ALC)损伤睾丸超微结构的彩响。方油年昆明种小鼠50只,随机分为5组:正常组、酒精组、酒精+VC组、酒精+VE组和酒精+VC+VE组,连续灌胃23d。应用光镜和透射电镜观察睾丸组织的结构变化。结果与正常组相比,酒精组多数生精细胞核固缩,核膜模糊不清,支持细胞数量较少,细胞器结构异常;与酒精组相比,酒精+VC组多数生精细胞形态趋于正常,胞质内可见较多细胞器,支持细胞数量较多,细胞器丰富;酒精+VE组多数生精细胞固缩,细胞间隙大小不等,支持细胞数量较多,结构良好,趋于正常;酒精+VC+VE组多数生精细胞结构良好,核膜清晰,细胞器较多,支持细胞较大,核清晰,线粒体和溶酶体较多。结论Ⅴ和ⅤE联合应用可拮抗酒精的毒害作用,对生精小管结构具有保护作用。关键词:酒精;睾九;维生素C;维生素E;超微结构中图分类号:R321.1文献标识码:AThe effects of the jOint application of vitamin C and vitamin E on the ultrastructure of testis in alcohol-injured miceLI Hong-yu', DENG Jing, ZHU Yu-ping, ZHANG Jian-xia, TIAN Hong-yan, LI Zhi-xin(Jilin Medical Col-lege: 1. Clinical Medicine College, 2. Nursing College, 3. Department of Histology and Embryology, Jilin City, JilinProvince, 132013, China)Abstract Objective To observe the effects of a joint application of vitamin C and vitamin E on the ultra structureof testis in alcohol-injured mice. Methods Fifty mature mice were divided into five groups at random: the controlgroup; the alcohol group the alcohol and vitamin C group; the alcohol and vitamin E group; the alcohol, vitamin C andvitamin E group. The control group was given distilled water. The other four groups were exposed to aldsame time, the alcohol and vitamin C group was given vitamin C, the alcohol and vitamin E group was given vitamin E,the last group was given both vitamin C and vitamin E Distilled water, alcohol, vitamin C and vitamin E were given byintragastric administration for 23 days. Light microscope and transmission electron microscope were used to detect thestructure of the testis. Results Compared with the control group, nuclear-pycnosis appeared in most spermatogeniccells of the alcohol group. The number of Sertoli cells decreased The structure of organell was abnormal. Compared中国煤化工基金项目:吉林医药学院大学生科研基金资助项目(吉医学科字[2005]第5号)CNMHG通讯作者:李质馨(1962-),女(汉族)教授从事生殖医学研究作者简介:李宏宇(1985-),男(汉族)在读本科生