吐温80中乙二醇与二甘醇的检测分析

2011第十三卷第六期★Vo.13No.6吐温80中乙三醇与二甘醇的检测分析*口沈娟张桥郭瑛毕宇安马芳玉苗宏伟萧伟*江苏康缘药业股份有限公司中药制药过程新技术国家重点实验室连云港222001)摘要:目的:建立测定吐温80中乙二醇与二甘醇含量的方法。方法:采用毛细管气相色谱法测定,色谱柱为 agilent19095N-123HP- INNOWAX(300m×530μmx1.00μm)毛细管柱;初始柱温150℃,保持7min,以15℃·min升至185℃,保持7min。结果:在确定的色谱条件下组分能基线分离,线性关系良妤。乙二醇与二甘醇的加样回收率分别为101.05%和98.90%,乙二醇与二甘醇定量检测限分别为21.46g…mL!、16.324郾g"mL结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于吐温80中乙二醇与二甘醇的限量测定。关键词:吐温80乙二醇二甘醇气相色谱法检测分析doi:10.3969/jisn.1674-3849.2011.06.041吐温80,其化学名称为聚氧乙烯20山梨醇酐单醇与二甘醇均为吐温80合成中使用的环氧乙烷的油酸酯,为药物制剂中常见的辅料之一。该辅料被收副产物,很可能残留于终产品中,且其具有一定的毒录到中国药典(CP)、欧洲药典(EP)、英国药典(BP)、性。美国药典(USP)、日本药局方(JP)等多国药典。由于本文采用气相色谱法测定吐温80中乙二醇、二其具有较好的助溶作用,在制备难溶性药物的注射甘醇的含量,为注射用吐温80的质量控制和评价提剂时,常用作助溶剂、乳化剂和稳定剂。国内目前有供较科学的依据。多种药物的注射剂中使用该辅料作为助溶剂,涉及化学药品和中药制剂,剂型包括粉针剂、小针和大输仪器与试剂液。该辅料静脉用于人体具有一定的安全性,但临床Agilent6890N气相色谱仪及工作站, Agilent尚应用该辅料的注射剂的过程中,仍可见一些安全7694E顶空进样仪,电子天平(型号: sartorius性问题的报道,如过敏、心动过速等不良反应,在BP21D)。异丙醇为色谱纯。乙二醇(批号:61218)与动物的药理毒理实验中也发现吐温80可能对心血二甘醇(批号:70619)对照品购自上海安谱科学仪器管等系统有一定的影响4,因此应重视该辅料的安有限公司,吐温-80来自江苏晨牌药业有限公司(批全性,应注意对注射用吐温80加强质量控制。乙二号:070403、080401、090801)南京威尔试剂有限公司(批号:20090901、20091019)、英国进口分装试剂(批收稿日期:201007-06号:F081102)。修回日期:201009-25★国家科学技术部国家“973计划(200CB735604):新药制药过程化学机理,负责人:萧伟。★通讯作者:萧伟,本刊編委,研究员级高级工程师,博士生导师,主要研究方向:中药新制剂的研究与开发,Tel:0518-85521956,E-mal:1118 (World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica]世界科学技术一中医药现代化★技术应用二、方法及结果进样,连续进样6次,计算RSD。乙二醇RSD为180%,二甘醇RSD为074%。1.色谱条件6.最低检测限与定量检测限色谱柱: agilent19095N-123HP- INNOWAX取每1mL中含21661乙二醇、20.731二(300m×530μm×100μm)毛细管柱。柱温:程序升甘醇的混合对照品溶液。进样1μL,测定信噪比,计温,初始温度150℃,保持7min,以15℃·min升至算各样品的最低检测限(信噪比3:1)与定量检测限185℃,保持7mn;载气(N流速20 mLmin-,分流(信噪比10-1)最低检测线:乙二醇为6434gmL,比2:1,进样口温度230℃;检测器(FD)温度260℃。二甘醇为4897g·mL-;定量检测线:乙二醇为2对照品溶液的制备21.446μg“mL,二甘醇为16324μg·mL精密称取乙二醇与二甘醇适量,分别加异丙醇7.重复性实验溶解并稀释成每1mL中各含216610乙二醇称取吐温80样品(批号F08102)25g,精密称207.310二甘醇的对照品储备液。FIDI A, (M:SJRDNIV090821\09082117D3.系统适应性实验精密量取对照品溶液与供试品溶液各1μL,按照气相色谱法测定(《中国药典》2005年版一部附录ⅥE)进样,测定,记录色谱图。结果乙二醇、二甘醇保留时间分别为为73m、L如2—:6。1-1-1。18134min,各组分的分离度均大于2.0。另精密量取异丙醇1μ图1乙二醇、二甘醇对照品色谱图进样测定。结果表明,空白对FDIA,(H:09082100.D)测定无干扰,见图1~34.线性关系的考察精密量取混合对照储备液叭98m01.0、2.0、3.0、4.0、6.0、10.0mL分别置10mL量瓶中,加异内醇至50刻度,进样1μL。测定峰面积,以浓度为横坐标峰面积为纵坐3—233-n5-0nn3标,将所得数据进行线性回归。乙二醇回归曲线方程为Y=图2空白溶剂(异丙醇)色谱图1.45524002X-45799586,rFIDI A, (M: SJRDNIVO90821\09082301 D)09993,线性范围21.661~8216610μg“mL;二甘醇回归曲线方程为Y=1.50336405X-7034758519,r=09998,线性范围为20.731-207.310gmL。结果表明,在上述浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。5.精密度考察精密吸取对照品溶液1μ图3样品色谱图[World Science and Technology/Modemization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica)111920II第十三卷第六期★Vo.l3No.6定,加异丙醇稀释至10mL,摇匀表1回收率试验结果进样1μL。重复测定6次,计算编号RSD,结果乙二醇RSD为146%,二甘醇样品含量()191901919019190191.9019190191%0甘醇RSD为1.23%。乙二醇样品含量(μg)27740277402774027740277.40277408.稳定性实验二甘醇加入量(1969519695196951969519695196.95称取吐温80样品(批号:乙二醇加入量(g)33249232492324923249232492F08102)25g精密称定加异内醇二甘醇测得量(吗)389563891038231383.6738684稀释至10mL,摇匀。分别在乙二醇测得量(叫60949600.36599406056461230,3,6,9,12h进样1μ,计算甘醇回收率(%)999010036100.13966897379898RSD。乙二醇RSD为2.19%,二甘乙二醇回收率(%)1022099409910101.021030910147醇RSD为3.17%二甘醇回收率平均值(%)98909.回收率试验称取吐温80样品(批号:乙二醇回收率平均值(%)101.05F081102)25g,精密称定,加异丙二甘醇RSD(%)1.56醇稀释至10mL,摇匀。吸取5mL,乙二醇RSD(%)155分别精密加入对照品溶液适量,再表2样品测定结果加异丙醇定容至10mL,吸取1μL。乙三醇含量三甘酶含量两者总含量进样测定,平行6份,计算结果见厂家批号%表1。南京威尔试剂有限公司20090901<0.0086<0.0065<001510.样品测定南京威尔试剂有限公司<00086<0.0065<0.015(1)供试品溶液的配制。苏展牌药业有限公司070401003000180048精密称取6批供试品适量,加异江苏晨牌药业有限公司0804010.02100160037丙醇溶解并稀释制成每1mL中含江苏展牌药业有限公司090810.025001050mg的溶液。英国进口分装试剂Fo81102001300170030(2)测定。精密量取对照品溶液(乙二醇86644μg·mL、0.25%。可以将注射用吐温80中乙二醇与二甘醇的二甘醇82.924gmL)与供试品溶液各1μ,按照总含量控制在0.10%以下较为妥当。气相色谱法测定(《中国药典》2005年版一部附录Ⅵ参考文献E)进样测定,结果见表21 Munoz A, Karla P, Gallay P, et a. A randomizedhemodynamic compar-、讨论ison of intravenous amiodarone with and without Tween 80. Eur heartJ1988,91422148该方法的精密度、重复性加样回收率良好,12h2 Sicart M.,Bee. Choussat A, et a. Hemodynamic effects of intra内稳定性较好,测定结果准确可靠,符合分析测定的venous amiodarone in humans. Arch Mal Coeur Vaiss, 1977, 70:要求。本文采用HP-5、HP-1毛细管柱时,乙二醇与二3 Levy M. Dupuis L. Parenteral nutrition hypersensitivity. J Parenter甘醇各成分之间均不能完全分离,结果以HP-INEnteral nutr,199142132215.NOWAX毛细管柱分离最理想。此外,按照欧洲药典4王宁周远大杨辉等吐温80对大鼠心血管系统作用的影响中国药房,2004,15(5)272-274.的要求,乙二醇与二甘醇的总含量不超过025%。从5冯文字肖顺汉刘明华等含吐温80中药注射剂对不同动物的过实验结果来看,乙二醇与二甘醇的总含量远远低于敏反应泸州医学院学报.2003092-4Determination of Ethylene Glycol and Diethylene Glycol in Tween 80Shen Juan], Zhang Qiao/, Guo Ying/ 2, Bi Yu'an Ma Fangyu 2, Miao Hongwei, Xiao Wei.21120 [World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia MedicaJ世界科学技术—中医荮现代化★技术应用1. Jingsu Kanion Pharmaceutical Co, Ltd, Lianyungang 222001,China,2. State Key Laboratory of New-tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process, Lianyungang 222001, China)Abstract: Determination method of ethylene glycol and diethylene glycol in Tween 80 was established. The separation was performed on Agilent 19095N-123 HP-INNOWAX (30.0 mx530 umx100 m) chromatographic columnThe mobile phase was N2. The initial temperature was 150C and kept for 7 min. Then the temperature was promot-ed 15C/min until reach 185C. The result showed that the linear range of ethylene glycol and diethylene glycol wasgood. The average recovery was 101.05%and 98.90%, respectively. The quantitative determination limit was 21.446g/mL and 16. 324 g/mL for ethylene glycol and diethylene glycol, respectively. It is concluded that the method wassimple, sensitive, accurate and suitable for simultaneous determination of both thylene glycol and diethylene glycolin Tween 80Keywords: Tween 80, ethylene glycol, diethylene glycol, gas chromatography, determination(贲任编辑:李沙沙,責任译审:王晶)[World Science and Technolog/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica]1121