关龙胆乙醇提取物抗炎镇痛作用的研究

1562陕西中医2009年第30卷第11期29(12):1685-1686[9]马志茹寰倬斌,电化学法研究枸杞子及黄精对活性[5]曹文捷周英华ET4的眼科研究进展[J国际眼科氧自由基的清除作用[]中国药学杂志,199,34(10);665杂志,20077(3):782-783[6]臊维城,杨淑焕魏承朴,等复明片治疗青光眼150[10]冯亚行气祛痰化浊中药对血小板囊集性红细胞例[J陕西中医,1990,12(11):493变形性及血液粘度作用初探[].福建中医学院学报,19988[7]金昔陆内南五味子木脂素戈米辛J对肝线粒体膜(1):24-26脂质过氧化和超氧阴离子自由基的作用[J].中国药理学通报[11]郑虎占中药现代研究与临床应用[M]北京:学苑2000,16(1):26-28.出版杜,1997:1363.[8]李莉,刘耕陶.五味子酚对氧自由基引起大鼠脑突[12]李洪涛杨英葛根素注射液治疗突发性耳聋触体和线粒体损伤的保护作用[药学学报,199833(2):8例]陕西医学杂志,2004,3(2):165-166(收稿2009-05-13;修回2009-08-12关龙胆乙醇提取物抗炎镇痛作用的研究朴惠顺张红英△延边大学药学院(延吉133000摘要目的:观察关龙胆乙醇提取物的抗炎镇痛作用。方法:采用二甲苯、巴丘油致炎法观察关龙胆乙醇提取物对小鼠的抗炎作用;用冰醋酸扭体法和热板法观察关龙胆乙醇提取物对小鼠的镇痛作用。结果:关龙胆乙醇提取物能显著抑制二甲苯和巴豆油引起的小鼠耳廓肿胀,对热板及和冰醋酸所致小鼠疼痛及扭体反应。结论:关龙胆乙酶提取物具有一定的抗炎镇痛作用。主题词@关龙胆乙醇提取物/药理学提取模型,动物小鼠关龙胆是龙胆科多年生草本植物,包括龙胆( Gentiana(每次3.2.2h),合并滤液,减压浓缩至无醇味,得134.9g浸scabra Bunge)、三花龙胆(G. triflora Pall.)、及条叶龙胆(G.青,备用。manshurica Kitag,),主产于我国东北和内蒙古。春秋采挖,晒2,2关龙胆乙醇提取物对二甲苯所致小鼠耳廓炎症的影干,生用;也可以栽培。以根和根茎入药。其味苦、性寒,具有泻响4取体重1822g的昆明种健康小鼠40只雌雄各半随肝实火清下焦湿热的功效,主治黄疽胆囊炎高血压耳鸣等机分4组即对照组,关龙胆乙醇提取物大剂量(10g/kg)组症口。现代药理研究证明关龙胆具有健胃、抗菌、保肝利胆中剂量(5g/kg)组,小剂量(2.5g/kg)组,每组10只。1次/d静降压[21瘤等作用。本研究正是通过给予小鼠不同剂连续灌胃给药5d,最后1d灌胃给药1h后将二甲苯50μL涂量的关龙胆乙醇提取物来验证其是否具有抗炎镇痛作用旨在于小鼠右耳两面致炎,左耳对照致炎后30min处死小鼠,用为深入开发关龙胆的药用价值提供可靠的理论依据。直径8mm打孔器,取下左右相同部位的耳片,分别称重,以右1实验材料1.1药物及试剂实验用关龙胆采集于吉林,左耳片重量之差(肿胀度)为指标药物组与对照组进行比较经延边大学药学院生药学教研室吕惠子副教授确认为关龙胆结果见表1( Gentiana scabra Bunge)的根为正品,二甲苯,巴豆油,冰醋酸表1关龙胆乙醇提取物对二甲笨所致小鼠其它试剂均用分析纯。耳廓炎症的影响(士s)n=101.2动物昆明种小鼠,体重20士2g,雌雄各半,由延边大肿胀度学医学部动物实验科提供(g/Kg) (mg)1.3仪器旋转式蒸发仪RE52,上海青浦泸仪器厂;恒温对照组15.67士3.0432.16士34416.49±4.57水浴箱HHW,金坛市恒丰仪器厂;恒温干燥箱202型,金坛市大剂量组1013.22±14525.21±6.3811.99±5.784恒丰仪器厂;电子天平BS-24,瑞士制造1.4统计学处理实验数据以王士s表示,采用SPSS11.5统计软件进行方差分析ATHS中国煤化工19312.42士1.4742.7214.55±2.54CNMHG2实验方法与结果2.1关龙胆乙醇提取物的制备称取自然阴干的关龙胆根700g,切碎用95%乙醇回流浸提3次由表1可见,关龙胆乙醇提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有抑制作用,大、中剂量组与对照组相比均有显著性差异(P△延边大学基础医学院(延吉133000陕西中医2009年第30卷第11期15632.3关龙胆乙醇提取物对巴豆油所致小鼠耳廓炎症的影数×100%响取体重18-22g的昆明种健康小鼠40只,雌雄各半表4关龙胆乙醇提取物对冰醋酸所致小鼠机分4组,按表2灌胃给药5d最后ld灌胃给药1h后,将巴疼痛反应的影响(王士s)n=10豆油50?L涂于小鼠右耳两面致炎,致炎后4h处死小鼠,用直扭体潜扭体抑痛率径8mm打孔器,取左右相同部位的耳片,分别称重以右左耳(g/Kg)伏期()次数(%)片重量之差(肿胀度)为指标,药物组与对照组进行比较。结果对照组140.4士31.8831.6士3.50见表2大剂量组10166.7士6032423.9士10.33424.4表2关龙胆乙醇提取物对巴豆油所致中剂量组5405.6±339.24▲8.8±6.49▲72.2小鼠耳廓炎症的影响(士s)n=10小剂量组2.5250.5±236.7023.9±6.664肿胀度与对照组比较△P<0.05;▲P<0.01(g/Kg) (mg)对照组13.96士0.9932.15±3.3818.2±2.72由表4可见,与空白组比较关龙胆乙醇提取物大、中、小剂大剂量组1012.70±1.0322.47士2.979.77±2.98▲量组扭体的潜伏期和次数有统计学意义(P<0.05或P<001),抑痛率分别为24.4%,72.2%24.4%中剂量组512.58±1.8326.87±4.3814.29±3.11△3讨论关龙胆是常用的中药,味苦、性寒,具有泻肝小剂量组2.513.57±0.8126.26±4.1612.99±3.45△实火清下焦湿热的功效口,主治黄疸胆囊炎、高血压、耳鸣等对照组比较△P<0.05;AP<0.01症;二甲苯具有中等毒性,可经皮肤直接引起毒性反应,直接由表2可见,关龙胆乙醇提取物对巴豆油所致小鼠耳廓肿涂布于小鼠耳部可引起炎症,引起小鼠耳廓血管扩张,使耳廓胀有抑制作用。大、中、小剂量组与对照组相比均有显著性差异充血红肿,产生炎症反应。巴豆油是一种剧毒的非食用油,为黄(P<0.05)色或黄褐色液体,有粘稠性,透明,有辛灼的香气可经皮肤直接24关龙胆乙醇提取物对小鼠热板所致疼痛的影响取引起毒性反应故直接涂抹也可引起炎症,这种物质可引起小体重1822g的雌性小鼠,用超级恒温水浴调节至55士0.5℃鼠耳廓血管扩张,使耳廓充血红肿,产生炎症反应。关龙胆乙醇测定其正常痛阈。以小鼠舔后足为阳性指标。反应过敏(小于提取物能明显减轻二甲苯和巴豆油所致小鼠耳廓肿胀度,说明5)或过于迟钝(大于30s)者弃之不用取痛阈合格小鼠40只,它具有抗急性炎症作用。三个剂量组与对照组比较均有显著性随机分成4组,给药方法剂量同2.3。于末次给药1h后将小差异,并三个剂量组之间有一定的量效关系;镇痛实验采用扭鼠再放入铁槽内(温度同上),观察小鼠舔后足的潜伏期及1体法、热板法,上述实验结果表明,关龙胆乙醇提取物能明显延min内的舔后足的次数间隔5min后再记录1次,取平均值,长冰醋酸和热板所致疼痛的潜伏期,减少因疼痛而产生扭体和计算抑痛率;结果见表3。抑痛率=空白舔后足次数药物舔足的次数,从而证实关龙胆乙醇提取物有明显的镇痛效果后足次数/空白舔后足次数×100%此外,其抗炎镇痛作用的有效成分、作用原理及作用部位尚需表3关龙胆乙醇提取物对热板所致小鼠进一步探讨。疼痛的形响(亚士s)n=10参考文献量甜足潜伏[1]杨书彬,王承龙胆化学成分和药理作用研究进展(g/Kg)期(s)次数]中医药学报,2005,33(6):54-56对照组14.60士65.90±2.18[2]宋立人洪恂,丁绪亮现代中药大辞典上册[M大剂量组1025.9士184043.30±1.89△北京:人民卫生出版社,2001中剂量组516,9士5.715.00±1.2515.8[3]谢观.中国医学大辞典第四册[M]北京:中国书小剂量组2.514.8土7.765.20±19311.8店出版社,1988[4]戴贵东,闫琳余建强,等伪麻黄碱镇痛、抗炎作与对照组比较,△P<0.05用的研究[].陕西医学杂志,200332(7):641-642由表3可见,与空白组比较关龙胆乙醇大剂量组舔后足的[5]黄登飞,白正发。愈骨灵胶囊抗炎镇痛的实验研究潜伏期和次数有统计学意义(P<0.05),其抑痛率分别为44.].陕西中医,2005,26(1):1257-1258%15.8%11.8%2.5关龙胆乙醇提取物对冰醋酸所致小鼠疼痛反应的影[6]陈奇中药药理研究方法学[M]北京:人民卫生出版社,1993:356响(取40只小鼠雌雄各半随机分为4组。大、中小剂量[7]徐叔云卞如濂陈修.药理实验方法学[M].北组对照组,分别给予10,5,2.5g/kg的关龙胆乙醇提取物,同京:人等容量的蒸馏水续灌胃给药5d于末次给药1h后腹腔注射中国煤化工06%冰醋酸(0.1mL/0g),观察扭体的潜伏期及15min内及抗藪HCNMHG物抗炎镇痛耐缺氧4,25(11):1043-1044.扭体次数,计算抑痛率。结果见表4(收稿200902-13;修回200905-16)抑痛率=空白扭体次数药物组扭体次数/空白组扭体次