乙醇对大鼠胃粘膜的影响

sSN1009-3079cN14-1019/R世界华人消化杂志2000年3月第8卷第3表2不同阻断剂对NOS活性及NO合成水平的影响程度持续至损伤后24h.NO组织NO胃液胃粘膜损伤后PIK和NOS活性呈现相似的变化规律,应(mxg蛋自-min-1)mmg蛋自-min-1)(p①)用PIK选择性抑制剂使胃粘膜NOS活性、组织和胃液NO水3.L2±0.53平分别下降了254%,22.5%和19.3%.表明PIK可能参与DC组6.89±0.511960±288394.79±22,13°D+T5.140.37±2.35b318.78±26.48bO合成的调节.但PIK激活后导致细胞内NOS活性变化的P<0.01,ws其余各组,P<0.01w对照组机制仍不清楚,推测PTIK激活后导致细煦内Ca2浓度增高可触是其重要的桃制之一,因为细胞内Ca2浓度增高是受体型3讨论PTK激活后细胞内第二信息传递者,而细胞内NOS活性的提冒粘膜在受到一定程度的损伤性刺激后,可启动快修复机高有赖于细胞内Ca2+浓度的增高(·9,NS激活后合咸№O增制使胃粘膜迅速恢复其完整性,以避免损惭向深层发展,这是加,而NO反过来又对细胞内Ca2浓度起负调控作用,因而生胃粘膜抵抗疾瘸的亠种重要的屏障能力(1,2).胃粘膜快修复机长丙子受体的激活、O的合成、以及Ca2稳态组成细胞内信制主要表现为损伤区周围或深部活细胞的迁移,由于不需要号传导的一个复杂的调节网络4DNA的复制和蛋白质的合成,只需要对细胞内一系列功能蛋白胃粘膜表达有多种生长因子多肽,而且有结构型NO6商表质的适当修饰即可完成,因而是一种快速的反应,但这种机制达,在胃粘膜损伤后,PTK和NO出现迅速的反应性变化,表明仍不甚濟楚3-61.在胃粘膜损伤修复过程中,生长因子多肽参PIK和NO共同促进了损伤后胃粘膜上皮的快速修复.由于与其调节,而蛋白酪氨酸激酶(PTK)是生长因子受体胞内区行PIK对NO的合成有一定的影响,PIK的作用可能在一定程度使信号传递的一个主要的功能部分,其活性变化必然对胃粘膜上通过影响NOS的活性以及NO合成而完成,但其深层机制有修复異有重要影响,但其机制仍不清楚2待进一步研究本文结果表明,胃粘膜损伤后,PTK活性发生显著变化,而且这种变化主要发生于胃粘膜修复的早期.损伤后30min呈短参考文献暂下降,可能是因为损伤性因素仍然大于修复性因素,1h后开Relan NK, FLigiel SEG, Dutta S, Tureaud ], Chauhan DP, Majumdar APN始上升,并在3h内迅速达到峰值,提高的幅度为160.69%.虽4Lb,19577m6k然在胃粘膜修复的中后期,PTK活性逐渐降低,但其活性较基2 Playford R. Peptides and gastrointestinal mural integrity. Gut, 1995: 37: 595础水平增高一直持续至48h,表明PIK可能参与胃粘膜完鏊性3Pmw山H,CwmP,. liam 5. Present views on restitution of gastrointestina修复的整个过程,而损伤后24hPIK活性二度增高可能是由4 Moncada s, Palmer RM, Higgs EA. Nitricysiology, pathophysioks于多种生长因子表达增加的结果这一时期PTK活性再度增5 Tepperman Bl, Voula bl, Soper Br. Effect of neutropenia on gastric mu高的主要作用可能是加速细胞增殖,可能还有促进分化的作and mucosal6 Kooturek SK, Konturek PC. Role of nitric oxide in the digestive system我们在胃粘膜组织匀裳中检测到NOS活性8,并且在胃7Ax时, Malooententi-Wilson C,oBwE.oian粘膜中度损伤性刺激后可诱发NOS活性发生与PTK相似的变ischemia-reperfusion injury by nitric oxide generators. Dig Dis Sci化,在损伤后的早期迅速提高,并且NO的合成增加.组织NOs8 Coskun t, Yegen BC, Alican i, Peker o, Kurtel h. Cold restraint strese- induccd活性和NO以及胃腔内的NO水平在胃粘膜损伤后3h达到峰stric mucosal dysfunction: ole of nitric oxide. Dig Dis Sci, 1996441: 956-9639 Gyres K. The role of endogenous nitric oxide in the gastroprotective action of值,上升的幅度分别为118.5%,123.2%和130.15%,其增高的orpine. EurJ Pharmacol, 1994: 255: 33-37ISSN100-3079CN14-1019/R世界华人消化杂志,20008(3):355·研究快报·乙醇对大鼠胃粘膜的影响灌注入胃能引起全胃肠道(以胃为主)的粘膜病变,并廷缓实验动物急性胃粘膜病变的自然愈合4-8).本实验试图探讨口苏红1曹之宪2林兆鑫800mL/酒精灌注法所诱发的动物胃粘膜损害的发病机制,ubject headinthanol; gastric mucosa/ pathology;以便指导临床tumor necrosis factor主题词乙醇;胄粘膜/病理学;肿瘤坏死因子1材料和方法众所周知,正常胃粘膜的完整性是由攻击因子与防御因子1.1材料选择健康♀SD大鼠,体质量190g~230g每组16的动态平衡来维持的,一旦这一平衡遭受破坏就会导敦粘膜损只~18中国煤化工分别胃内灌注蒸馏水(正害1-3.据报道,各种损伤因子如酒精(ETOH)、消炎痛(M)经常组)CNMHG4g,酒精组),随后自由进食及水,了山医科大学孙逸仙纪念医院消化内科12方法2香港大学医学院药理系1.2.1胃粘膜病变及浆膜血流量测定上述处理72h后,经乙香港大学玛丽医院胃肠肝病内科项目数数据接受日期199126醚麻醉,开腹暴露胃,用漱光多普勒仪在大鼠腺胃测定浆膜血收稿日期流量(GSBF)后离断胃,并暴露岩膜面,釆用四方格法计算粘膜ssN1009-3079cN14-1019/R世界华人消化杂志2000年3月第8卷第3期损伤面积(mm2),然后分别计算每组血流及损伤面积,并刮取胃本实验结果表明,试验组PGE2水平均显著高于对照组(P粘膜层组织迅速置入液氮后转入一70℃低温冰箱保存,用于测<0.01),但仍未能提供有效保护作用,说明酒精所致大鼠胃粘定粘膜MPO,FGE2及TNFa水平膜损害尚存在其他机制.据报道山,9,13ETOH诱导的粘膜病1.2.2胃粘膜PG2测定釆用放射免疫学方法,按碘标记蚋变与粘膜静脉收缩、GMBF降低有关,而且其损伤程度与FGE放免试剂盒( Amersham International PIC)要求操作,用y-GMBF呈负相关[13].s]. Konturek et al6发现乙酰水杨酸可引烁仪测放射性QHM,并换算为:{g/mg上清蛋白起剂量依赖性急性胃粘膜瘸灶增多并伴PM增加、血液PCs1.2.3胃粘膜MPo活性测定取冻存胃粘膜层组织称重,在降低,但重复试验诱发粘膜的适应性改变,此时粘蒺血流增加、4℃下制成匀浆,收樂上清液,用 BECKMAN DC650分光光度BGF及细胞增殖均显著升商,而PMN明显减少.本实验结果仪测定其在437mmOD值,井换算为酶活性单位(IU/g上清蛋未发现800mL/ L ETOR对浆膜血流有影响,可能与酒糟浓度、剂量、作用时间及测定GSBF时的部位有关1.2.4胃粘膜mTNFα测定按 Factor- Test-XTM Mouse Tsuboi et al11究发现非甾体类消炎药能促进人淋巴TNF,酶标仪免疫试剂盒( genzyme,USA)操作,用 BIO-RAD细胞合成TNF2本实验两组TNFa水平无差异,提示可能MDEL3550徼孔板读数仪测定其450mm的吸收峰,再换算为TFa并非ETOH损伤粘膜的机制或与所给酒精的剂量、疗程/mL上清蛋白不足以引起粘膜TNF水平的改变,值得进一步探讨统计学处理参数以均数土标准差表示,两组均数的显著与正常组比较,除SBF,TVF。无明显变化,试验组粘蔑损性检验用t检验,以P<0.05为显著性水准伤面积显著增加伴有粘膜MPO活性及PGE2水平明显升高(P<0.01),提示800mL/ L ETOH所致的损伤与PMN活化、浸润2结果等攻击因子增加有关,而与内源性防御HGE水平无关2.1800 mL /L ETOH对鼠胃粘膜损伤的影响(表1)22酒精对鼠GSF,PGF2,MP及TNFa的影响(表2)4参考文献I Robert A, Neaamis JE, Lancaster C, Hanchar A. Cytoprotection by表1鼠胃粘膜损伤的改变x±sNaOH, Hypertoric NaC, and Thermal Injury. Gastroenterology, 1979: 77:433对照组0.00±0.002 Rainford KD, Mechanisms of gastrointestinal toxicity of nonsteroidal anti酒精组flammatory drugs. SandJGtro,1989;24(Sup163):9-163 Lacy ER, Ito S. Microscopic analysis of ethanol damage to rat gastrP<0.01,w对照组4 Wang JY, Yamasaki S, Kojitakeuchi, Okabe S. Delayed healiastric ulcers in rats by indomethacin. Gastroenterology, 1989: 96: 393-402表2800mL/ L ETOH(8mL/kg)对大鼠胃粘腰的影响5 Cjihara Y, Okabe S. Mechanisn by which indomethacin delays gastric ulcerdng/g)6 Konturek s], Braowowski T, StschuraJ, Dembinski A, Majika ] Rule uf gastricooxd flow, neutrophil infiltration3783±04391208±79,1051030962.67t797 Kvietys PR, Twohig B, Danzel J, Specian RD, Ethanol-induced injury to the rat4P<0.01,vs对照组hine oxidase- derived radicalsGastroenterology, 1990: 98: 909-9208 Eastwood GL. Progress in gastroenterology. gastrointestinal epithelial renewal3讨论serology,1977;72:962-975大量的临床与实验证据表明,酒精可诱发胃粘膜急性损9 Wallace JL.. Nonsteroidal anti-infammatory drugs gastropathy and cytoprotectionthogenewis and mechanisns re-examined. Snd Jof Ga伤3,12),但其确切的发病机制尚不清楚.PMN被认为参与其损(Sul192):3-810 ALcan I, Coskun T, Coxak A, Yegen BC, Oktay S, Kurtel H. Role of伤机制,FGs减少则解除其对PMN活化的抑铜,PMN的粘膜phils in indamethscin-induoed gastric mucosal lesions in rats. In/amm Res浸润增加并进一步獰放MPO、氧自由萎、活性氧化代谢产物如u1:061,hmM,hs.hK. nonsteroidal超氟化阴离子(O2-)、蛋白酶并粘附于血管内皮造成大血管闭flammatory drugs differentially regulate cytokine production in human塞等方式导致粘膜损伤.正常粘膜细胞对损伤有一定抵抗能mphocytes up-regulation of INF, IFN-y and IL-2 in amtrast to down1995;7:372-379力,所以PMN与靶细胞的比率必须达到一定的非生理性水平12 uth PH. Gastric blood flow in ethanol injury and prostaglandin cytoprotection(>20:1),才能引起损伤,如同时存在其他炎症递质和细胞介13ChCH, hen bw,HbCS,KoJ,Lmn. Assessment of hemodynamic素,则该比率可以降低,而非活化的PMN几乎不引起胃粘膜上pectrophotometry: effects of ethanol and prostaglandin Ez under ischemic and皮细胞损伤.超氧化歧化酶(SOD)则可通过分解翅氧化阴离子conditions. Digestion, 1994: 55: 389-39414 Santucci l, Fiorucci S, Brunori PM, D Mitten? FM, Chiorean M, Morelli A.(O2)为过氧化氢和氧,对PMN介导的粘膜损伤有保护作mor necrosis factor a receptor- antagonists proteet against in用69115.本实验结果提示,800mL儿 L ETOH引起粘膜atric mucosal injury in rats. Gastroenterology, 1995: 108( Suppl AprilMPO活性显着增加(P<0.01),支持PMN活化及释放的MPO15KolR, Kopatsis A, Fligiel SEG, cranko,R, Callewaert D, Neutrophil参与胃粘膜病变的形成中国煤化工s,131CNMHG