乙醇沉淀法提取茶花多糖的研究 乙醇沉淀法提取茶花多糖的研究

乙醇沉淀法提取茶花多糖的研究

  • 期刊名字:蚕桑茶叶通讯
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  • 论文作者:江新凤,高其璋,杨普香,李文金,刘彩霞,张瑶
  • 作者单位:江西省蚕桑茶叶研究所
  • 更新时间:2020-03-23
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论文简介

2013年第5期蚕桑茶叶通讯乙醇沉淀法提取茶花多糖的研究江新凤高其璋杨普香李文金刘彩霞张瑶(江西省蚕桑茶叶研究所330202)摘要:以荼花为硏究对象,以水为溶剂,在一定的条件下提取茶花多糖,提取液用乙醇进行沉淀,选取沉淀剂用量、沉淀时间、离心时间和提取次数4个因素做单因素试验,然后以离心时间、乙醇加入量、沉淀时间、提取次数作为因素,进行正交试验,来确定乙醇沉淀法提取茶花多糖的最佳工艺条件。乙醇沉淀法的最佳工艺条件为:浓缩液:沉淀剂为1:3、沉淀时间为6h,提取次数为2次。关键词:乙醇;沉淀法;茶花;茶多糖;茶花多糖茶花是茶树的重要组成部分,近几年来对茶花时间为2h,提取温度为90℃。提取液采用100目滤研究发现茶花多糖与茶叶多糖的许多性质类似。布粗滤,得到的上清液再用1000目滤布过滤。清本硏究旨在确定乙醇沉淀法提取荼花多糖的最佳工液300oκmin离心15πi,将两次水提液合并浓缩,艺条件浓缩温度60℃,浓缩至150mL,加2倍量体积分数的1材料与方法95%乙醇沉淀,3000r/min离心10min后去除上清液,重复3次,取沉淀烘干即得粗茶花多糖1.1材料1.2.3标准曲线的绘制硏究材料:安吉白茶茶花,采自江西省蚕桑茶叶精确称取葡萄糖标准物质0.100g,加去离子水硏究所生态观光茶园,新鲜茶花经杀青后烘干备用。溶解,定容至250mL。配制成0.4mgmL的标准品主要试剂:95%乙醇贮备溶液。然后分别移取0、0.1、0.2、0.3、0.4主要仪器:AL-204电子天平,由梅特勒-托利0.5mL标准品贮备液加入具塞试管后,再用蒸馏水多仪器(上海)有限公司生产;UV-9600紫外可见定容至1.0mL。则各管中葡萄糖的浓度分别为0、分光光度计,由日本岛津公司生产;玻璃仪器气流烘0.04、0.080.120.160.20mg/mL干机,由陕西常仪实业公司生产;TD5M台式离心在配置好的各管中加入蒽酮一硫酸试剂4mL机,由长沙湘智离心机仪器有限公司生产;微波炉,立即摇匀,置于冰水中,之后于沸水浴中加热7min烘箱,粉碎机,由吉首市中诚制药机械厂生产;RE用冷水迅速冷却,放置10mn2,于620m处测定吸5203A旋转蒸发仪,由上海振捷试验设备有限公司光度(A。横坐标为葡萄糖浓度(C),纵坐标为吸生产;S邗B-3循环水多用真空泵,由郑州杜甫仪器光度,得出标准曲线及回归方程。厂生产。1.2.4粗茶花多糖得率计算1.2方法称取粗茶花多糖固体1g,用水溶解,定容到1.2.1茶花处理150mL,吸取1mL测定吸光度。样品中茶多糖得率摊晾:新鲜茶花均匀放置,摊平,摊放厚度5cm,计算方法如下失水20%后杀青。粗茶花多糖得率(%)=[(C×V×f)/(W杀青:微波烘青,茶树花摊放均匀,微波炉调至10°)]×100高火,5min后取出茶树花。其中,C为茶花多糖提取液中葡萄糖浓度(mg/干燥:电热恒温鼓风干燥箱,定温90℃,烘至足mL);V为茶花多糖提取物体积(mL);W为茶花的干。粉碎备用。质量(g);f为换算因子。2.2茶花多糖制备1.3试验设计桑茶叶总第167期条件下,设置沉淀剂为浓缩液的1倍、2倍和3倍,高,但2倍体积的95%乙醇用量效果最佳。探讨沉淀剂用量对茶花多糖得率的影响。沉淀时间对茶花多糖得率的影响:其他条件相同情况下,设置不同的沉淀时间为2h、6h和12h探讨沉淀时间对茶花多糖得率的影响。提取次数对茶花多糖得率的影响:设置提取次数为1次、2次和3次,其他条件相同情况下,探讨提取次数对茶花多糖得率的影响。1.3.2正交试验设计在单因素试验的基础上,利用SFS17.0进行正95%乙醇用量(倍)交试验设计,设计见表1,以茶花多糖得率为考察指图2沉淀剂用量对茶花多糖提取效果的影响标,确定茶花多糖最佳工艺条件。2.2.2沉淀时间的影响表1茶花多糖提取工艺正交试验试验结果显示,浓缩后的茶花多糖提取液,加入水平沉淀剂用量(A)沉淀时间(B)提取次数(D)等体积的沉淀剂后静置2h,6h和12h后,2h沉淀时间制得的茶花多糖含量最高,2h和6h沉淀时间,1浓缩液1倍1次所得的产物稍少,但差异不明显。具体如图3所示。2浓缩液2倍3浓缩液3倍12h次2结果与分析定霹2.1葡萄糖标准曲线绘制以葡萄糖质量为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,见图1,得到线性回归方程y=7.8071x6001243,R2=0.9995。沉淀时间(h)图3沉淀时间对茶花多糖提取效果的影响y=7.8071x-0.01242.2.3提取次数的影响R=0.9995赵米誉试验结果显示提取次数越多,越有利于茶花多糖的制得。具体如图4所示:0.50.040.080.120.160.2葡萄糖浓度(mg/m1)图1葡萄糖标准曲线2.2单因素试验结果2.2.1沉淀剂用量的影响沉淀剂用量(试验中采用95%乙醇为沉淀剂)提取次数(次)2013年第5期蚕桑茶叶通讯33图4提取次数对茶花多糖提取效果的影响为沉淀剂用量>沉淀时间>提取次数。乙醇提取茶花多糖的最佳工艺条件为2.3正交试验结果与分析A3B2C2,即浓缩液:沉淀剂=1:3,沉淀时间为6h由表2可知,各因素对茶花多糖提取率影响的提取2次,在此条件下,重复提取三次,得到茶花多大小顺序为A>B>C,即影响茶花多糖得率的因素糖的平均值为10.37%。表2I9(33)正交试验结果试验号沉淀剂用量A沉淀时间B提取次数C得率%27.09367.3481:39.426.7.0137.497.5378.1837.8038.8637.6337.5302.4331700.3063结论时,得出的较优提取条件为:浓缩液:沉淀剂=1:3,沉淀时间为6h,提取2次。通过对采用不同提取工艺的茶花多糖得率进行硏究,同时综合考虑工艺的经济性和茶多糖得率,确参考文献定较优的提取茶花多糖方法为乙醇沉淀法,为茶花]周国兰,喻云春胡华健,等茶花与茶叶常规生化成分多糖的进一步研究和开发提供依据。以茶花为原分析研究[J].茶叶,2000,35(2):85~86料,用蔥酮-硫酸法测定茶花多糖的含量,通过单2]阚建全食品化学M.北京:中国农业出版社,202因素试验分别研究沉淀剂用量、沉淀时间、提取次数

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