奈拉滨的合成工艺改进

中圆药师2010年第13卷第4期 China Pharmacist2010,vl.13N.4ml/10g的伊文思藍(0.5%),腹腔注射0.6%的醋酸溶液引起的家兔毛细血管通透性。短管兔耳草水提物具有显著0.1ml/10g,20min后脱日处死,剖开腹腔生理氯化钠溶液降低毛细血管通透性的作用。冲洗腹腔,每次5m冲洗3次,共15m生理盐水,收集腹腔现代研究表明,短管兔耳草化学成分主要有黄酮、苯丙洗液。2000rmin1,离心10min,吸取上清液590mm测定素苷、环烯醚萜等化合物。黄酮类化合物有抗炎调节免疫光吸收度。结果见表4。TL对醋酸引起的小鼠毛细血管通抗衰老作用,作用机制与其抗自由基或抗氧化有关。本实验透性增加有明显抑制作用,且随剂量增加抑制作用加强。与通过小鼠二甲苯致耳廓肿胀试验、大鼠肉芽肿实验、大鼠鲜空白对照组相比阿司匹林组(200mgkg)和TFL高剂量蛋清致足肿胀试验和小鼠毛细血管通透性增高实验观察短组(100mgkg1)对醋酸引起的小鼠毛细血管通透性增加有管兔耳草总黄酮的抗炎作用。结果表明,局部涂抹不同剂量明显抑制作用(P<00),但TFL高剂量组抑制作用弱于短管兔耳草总黄酮(100,50,25mgkg)均可使小鼠耳片肿阿司匹林组;TL中剂量组(50mgkg2)亦有显著抑制作用胀的程度明显减轻抑制率为2273%~43.13%;可抑制大(P<0.05),抑制作用弱于阿司匹林组;TFL低剂量组(25鼠蛋清性足肿胀,尤其在100mgkg作用显著(P<0.01),mgkg-)对醋酸引起的小鼠毛细血管通透性增加有抑制的优于地塞米松;还能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)性,其中以100mg·kg作用最明显(P<0.01)。在大鼠棉表4THL对酸所致小鼠毛细血管通透性增高的影响球肉芽肿的实验中,不同剂量TL均可减少新生肉芽组织生成,以100mg·kg作用最明显(P<0.01)。综上结果表生理盐水0.274±0046明短管兔耳草总黄酮具有明显的抗炎作用,抗炎疗效以高剂阿司匹林40ThL高剂量0.174±0.051·量组为优,且呈现一定的量效关系TPL中剂量0.187±0.0583l.75鲁考文献TFL低剂量0.244±0.054注:与生理盐水组比校,·P<0.05,"P<0.011杨水吕.藏药志[M]西宁:青海人民出版社,1991.4454503讨论2李冬梅,尹晓飞,蔡大伟淫羊总黄酬急性毒性实验研究[]中国药师007,10(10):1011-1012献报道,藏药短管兔耳草的抗炎药理作用如下:①3徐丘红,李东,万于军等通风方剂颗粒镇痛抗炎作用的实验研究[门]中对大鼠血清性关节肿有预防作用。②对大鼠头部急性充血4潘国庆段鹏弊藏药兔耳草超声提取总黄酮的工艺研究[刀青海师范大性水肿有抑制作用。③对大鼠甲醛性关节炎有预防作用。学学报,2006,3:68-70④对大鼠气囊性肉芽肿有治疗作用。短管兔耳草水提物的5李仪中两药理实验方法[M,上海:上海科学技术出版社,91,398作用与氢化可的松相似,对大鼠气囊性肉芽肿之囊壁的增生6陈奇中药药理研究方法学[M]北京:人民卫生出版社,199.36367及渗出液均有一定的抑制作用。⑤对大鼠棉球肉芽肿增生7 Brunelli C,. Oscon P.,BonP,“a. Evaluation of quality of life in patient有影响。短管兔耳草水提物对大鼠棉球肉芽肿的增生具有(2009-10-28收稿2009-12-15修回)抑制作用,其作用强度与氢化可的松相似。⑥能增强组织胺奈拉滨的合成工艺改进陈磊宗在伟杜有国蒋亮(南京海光应用化学研究所南京21000摘要目的:改进奈拉滨的合成方法。方法:以2·氯基6-氯嘌呤和2,3,5-三0-苄基-1-0-对硝基笨甲酰基D-阿拉伯呋喃糖为起始原料,经取代、氯代、缩合、水解四步反应合威奈拉滨。结果:合成的目标化合物,其结构经核磁共扳氩谱、核磁共振碳谱、质谱及元素分析确证。结论:本方法简化了操作步骤,优化了反应条件,降低了成本,提高了收率。关键词奈拉滨;合成;工艺;改进中图分类号:TQ464.6文献标识码:A文章编号:1008049X(2010)04050503Improve the Synthetic Method of NelarabineChen Lei, Zong Zaiwei, Du Youguo, Jiang Liang( Nanjing Haiguang Institute of Applied Chemistry, Nanjing 210009, China)ABSTRACt Objective To study on synthesis of Nelarabine by improving method. Method: Nelarabine was synthesized startingfrom 2-amino-6-chloropurine and 2, 3, 5-Tri-0-benzyl-1-0-(4-nitrobenzoyl)-D-ar-abinofuranose via four steps, including permutationchlorination, condensation,hydrolysis Result: The structure of the target compound was confirmed byH-NMR, C-NMRental analysis. Conclusion: This optimal synthetic procedure with lower cost and higher yield is worthy to have a furtherKEY WORDS Nelarabine; Leukemia; Synthesis; Process improvement中国煤化工奈拉滨( Nelarabine,1)化学名为2氨基9B-D-阿拉伯呋喃糖HCNMH GLaxoSmithKline)公司通讯作者:陈磊Te:(025)51198987E-mal:akcl2008@163.cmwww.zgy8.org研究报告研发,2005年10月获得美国FDA的快速批准,成为治疗至甲醇钠(23g,413mmol)和甲醇400m,搅拌并升温至60少对两种化疗方案无反应或治疗后复发的急性T细胞淋巴℃,于60~65℃反应1h。TLC检测反应完全后转入单口瓶母细胞性白血病(TAL)和T细胞淋巴母细胞性淋巴瘤(T中浓缩至干。残余物中加入200m水,搅拌0.5h,加人二BL)新药,20年在美国正式上市。奈拉滨是T淋巴细氯甲烷萃取合并有机相依次用1 molL HCI洗至pH胞选择核苷的类似物,是水溶性脱氧鸟苷的类似物anaG的3,饱和碳酸钠溶液洗至pH7~8,再饱和氯化钠溶液洗至中6甲氧基衍生物,已证实核苷类似物作为治疗血液系统肿瘤性,有机层尤水硫酸钠干燥,过滤滤液浓缩至干,得到(3)的细胞毒药物疗效显著。araG的前体药物奈拉滨已被证明(17.6g,106mmol)收率:90.3%TLC:乙酸乙酯:甲醇=6:1,可有效治疗T淋巴细胞急性白血病。在体内奈拉滨分解R物=0.7,Rf料2)=0.9为anG的类似物在白血病细胞内经过磷酸化后速转化2.22’,3’,5∵-三0苄基1氯-阿拉伯呋喃糖的合成(5)为 ara-GTP,抑制DNA合成并引起细胞凋亡1。于1L三口反应瓶中加入(4)(40.5g,71.2mmol)、氯化奈拉滨的合成路线已见文献报道,虽然文献公开氢二氯甲烷溶液500ml,磁力搅拌下,冰水浴保温10℃左了奈拉演的制备工艺,但该工艺方法以2氨基6甲氧基嘌右反应4h,TC检测反应完全后,过滤,浓缩蒸除溶剂得到呤和尿嘧啶阿糖苷为原料,使用生化方法得到月标产物奈拉溶液(5)(27.8g,63.4mmol)收率:89.1%TC:三氯甲烷:滨,该方案的难点在于菌种较难得到,反应时间较长,反应条石油醚=5:3,R=0.4,RG4=0.6。件较苛刻。国内专利公开了合成奈拉滨的方法,以6氯232氯基6甲氧基9B-D-(2,3',5·三0苄基阿拉伯鸟苷为原料,经6步化学合成将呋喃核糖构型转化为阿拉伯糖制得奈拉滨虽然合成路线原料易得到价格合适但实验呋喃糖基)嘌吟的合成(6)步骤多需在此基础上进行工艺优化研究简化操作,提高收于500ml三口反应瓶中加入(3)(9.9g,60mmol)、四氯率也是当前迫切需要解决的问题。文献合成步骤较长,操化锡300ml,室温搅拌40min,10℃左右慢慢滴加(5)(278作繁琐收率偏低不利于工业化生产。参考文献对2,3,g,63.4mmol),1h内滴毕室温反应1h,TC检测反应完5-三0苄基-1-0-对硝基苯甲酰基D阿拉伯呋喃糖进行氯毕,过滤滤液浓缩蒸除溶剂,残余物中加人100m二氯甲代制备中间体2,3,5·三0苄基-1·氯阿拉伯呋喃糖参考报烷溶解水洗,有机层无水硫酸钠干燥,过滤滤液浓缩至干,的工艺路线并在实验过程中对奈拉滨的合成工艺进行了得(6)(285g,50.3mm)直接用于下步反应。收率:改进以2氨基6氯嘌呤和2,3,5三0苄基10对硝基苯838%TC:二氯甲烷;甲醇=5:1Rr=0.6,B(料,经取代、氯代、缩合水解四步反应合成奈拉滨,总收率达23%。在水解步骤中,2.4奈拉滨的合成釆用5%PdC催化,缩短了反应时间,提高了收率。此工艺于500m三口反应瓶中加入甲酸铵(41.2g,653.9操作方便,适合工业化生产。工艺合成路线如图1。mmol)5%钯炭催化剂4.12g和甲醇206ml,通入N2,搅拌并升温至40℃,滴加(6)(28.5g,50.3mmol)与甲醇285ml配成的溶液,1,5h滴毕,保温反应2h,TC检测反应完全后趁热过滤滤液浓缩残余物加入甲醇搅拌并加热至回流,趁热过滤滤液减压浓缩至干,残余物搅拌下加入无水乙醇、乙醚冷却放置析晶,过滤固体用无水乙醇洗涤,干燥NO, CH? CL+得白色粉末状固体(1)。(51g,34.2%)mp:201.2-203Bno oBn℃(文献mp:209~217℃),TC:乙酸乙酯石油醚:甲醇=21:1,Rf宀w=0.5,R原料(6)=0.9。纯度94%(HPLC法)。元素分析(C1H15N,O3),理论值(%):C44.44,H5.09,NN2.cH3OH、H223.56,026.91;实测值(%):C4.52,H5.09,N23.5,05%Pd/C, HCOO NH42689。HNMR(300MHz, DMSO-D)8:7.9(8,H,嘌呤环),6.41(s,2H,嘌呤环氨基),6.14-5.50(b,H,呋喃糖环),5.06(t,H,呋喃糖环),4.06~4.11(m,2H,呋喃糖环),图1奈拉滨的合成路线4.00(8,3H,呋喇糖环甲氧基),3.76~3.79(m,H,呋喃糖1仪器与试剂环),360-3.70(m,2H,亚甲基)。CNMR(500MHz,DM1H-NMR谱以DMsO为内标,13cMMR以DMS0-d6为S0-D6)8:160.74,159.94,154.19,139.6,113.38,84.42(嘌溶剂和内标。美国 Perkin-Elmer公司的240C型元素分析呤环);83.58,5.70,75.53,61.17(呋喃糖环);53.34仪;zF6型三用紫外线分析仪;YRT3熔点仪(温度未经校(-0CH3)。MS(m/2):29827(M+)。验);所用主要原料与试剂:2氨基6氯基嘌呤(江苏省金坛3讨论市茂盛助剂厂,纯度99%);2,3,5-三0.苄基10-对硝基苯在制备奈拉滨的过程中,本工艺做了如下的改进:①水甲酰基D阿拉伯呋喃糖(南京祥兆工贸有限公司,纯度解反应中通△N,作保护使体系隔绝空气避免结构发生键99%);5%P山C(上海化试集团),其他试剂均为分析纯断裂中国煤化工气使体系均相而是2实验与结果加入2.12-氯基6甲氧基喋呤的合成(3)CNMHG完全将苄基转换成3,回收的钯炭催化剂于500ml三口反应瓶中依次加入(2)(20g,118mml)、(集中给厂家处理)可以重复利用3-5次(对产品反应没影中圆药师2010年第13卷第4期 China Pharmacist2010,vol.13N.4根痛平胶囊的质量标准研究黃荣增(湖北中医学院中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室武汉430065)孟军华(武汉市三医院)吴娟(湖北中医学院摘要目的:建立根痛平胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱法对该制剂中的葛根和牛膝进行鉴别,采用高效液相色谱法测定制剂中芍药苷的含量。色谱柱:迪马C1(250mmx4.6mm,5μm);流动相:甲醇0.05mol·L'磷酸二氬钾水溶液三乙胺(28:72:0.5);流速:0.8ml·vmin';柱温40℃;检测波长为230mm。结果:薄层色谱斑点清晰,重现性好;芍药苷的平均加样回收率为98.46%,RSD为1.3%(n=6)。结论:该方法准确可靠,重复性好,为根痛平股震的质量控制和评价提供了依据。关键词葛根;牛滕;芍药苷;根痛平胶囊;质量标准中图分类号:TQ460.72文献标识码:A文章编号:1008449X(2010)04050703Study on Quality Standard of Gentongping CapsulesHuang Rongzeng( Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Resource and Compound Prescription, Hubei College of TCM, Wuhan430065, China)Meng Junhua(Third Hospital of Wuhan ) Wu Juan( Hubei College of Traditional Chinese Medicine)ranches Root were identified by TLC, and the content of peoniflorin was determined by HPLC. The Diamonisil Cu(250 mm x4.6ABSTRACT Objective: To establish the quality standard for gentongping capsules. Method Kudzuvine Root and Thvotoothed Ac5 Hm)analytic column was used and the mobile phase was mixture of 0.5% triethylamine/methanol(28%)and 0. 5% triethylamine/0.05 mol-L- potassium dihydrogen phosphate water(72 %) The detection wavelength was set at 230 nm. Result: The TLcere clear and reproducible. Therecovery rate of peoniflorin by HPLC was 98. 46% and RSD was 1. 3%(n=6). ConcltThe method is reliable and accurate with high reproducibility. It can be used for quality control of gentongping capsulesKEY WORDS Kudzuvine Root; Twotoothed Achyranthes Root; Peoniflorin; Gentongping capsules; Quality standard根痛平胶囊(自制制剂)由白芍、伸筋草、狗脊、续断、葛有限公司);AT-201电子分析天平(d=0.01mg,瑞士)。芍根、牛膝等中药材制成,规格为每粒装0.3g(约相当于原生药苷对照品(供含量测定用,批号:0736-20020)、葛根素对药0.85g),具有活血、通络、止痛的功效,用于风寒阻络所致照品(供含量测定用,批号:075220009)及牛膝对照药材的颈椎病。本文参照有关文献,HPLC法测定该制剂中芍药(供鉴别用,批号:1066200203)等均由中国药品生物制品检苷的含量,采用TLC法鉴别葛根和牛膝1361,为控制该定所提供;硅胶C(青岛海洋化工厂),甲醇(色谱纯,上海振制剂质量提供可靠的实验依据。兴),水为双蒸水,其他试剂均为分析纯。1仪器和试药2方法与结果zF22三用紫外分析仪(上海安亭电子仪器厂); Dionex-2.1薄层色谱鉴别P80液相色谱仪,UvD170U检测器,四元低压梯度泵,2.1.1葛根取本品10粒,倾出内容物,加乙醇30mlHKJz2830171BAF戴安变色龙高效液相数据处理系统(美声处理30min,滤过,滤液水浴蒸干,残渣加乙醇lml使溶国戴安公司);SK5200H超声波清洗机(上海科导超声仪器解,作为供试品溶液。按处方除去葛根,制备阴性样品,取阴通讯作者:黄荣增Tel:(027)65056187E-mail:hr09@163.comleooocoooeoeoeoeoeoeoeoeoeoeoooooooooooooooooooeoeoooeoeoeoeoeoeoeoeoooooeoeoooooooooc响);③粗品只需重结晶一次,产品的纯度就能达到994%2 Parker WB. Secrist JA, Waud WR,aa. Aurine nucleoside analogues in devel以上;④总收率提高至23%,且操作简便,适合工业化生产opment for the treatment of cancer[J]. Curtin Investig Drugs, 2004, 5(6): 592唯一不足就是起始原料价格偏高,增加了患者的经济负担3 Krenitsky TA, Kozalka GW,Jooem LA, et a. Antiiral Compoun[ P].EP: 0294114在今后将继续对奈拉滨的工艺进行研究改进,使之能降低A2.198806527成本减轻患者经济鱼担4 Averett DR, Wilson, D, Krenitsaky TA, e al. Heterocyclic compounds [P]. wo90456A1,19064,目标化合物的结构经 MS-FAB、元素分析HNMR、C5颗群,孙学伟徐存震一种条拉腐的合成才法[P中国专利MR予以确认200716 Grit中国煤化工urine deriative[P]. EP考文谳YHCNMHG2012修圆)1朱尔佳梁可张浩等治疗T淋巴细胞白血病新药—奈拉滨的研究进展[J新药指南2007,12(69):7475