聚乙二醇化干扰素治疗慢性丙型肝炎

152●Foreign Medical Sciences Section on Pharmacy 2002 Jun; 29(3)聚乙二醇化干扰素治疗慢性丙型肝炎骆晓梅,彭涛编译王林校(军事医学科学院放射医学研究所,北京100850)摘要:将聚乙二醇(PEG)化学连接于治疗蛋白质能增加血浆半衰期、减少毒性、增强药物的稳定性和溶解性。PEG 结合蛋白质通过减少免疫系统发现和攻击外源物的能力以增加其治疗效果。由活化的PEG单体与蛋白质偶联制备PEG蛋白结合物,这种偶联策略有多种选择。PEG 化干扰素-a用.于治疗慢性丙型肝炎病毒性感染已进行了大量临床研究工作,并获得肯定的疗效。已有3种PEG蛋白结合物被FDA批准,临床应用于治疗严重的复合性免疫缺陷病和治疗各种白细胞增多症。关键词:慢性丙型肝炎;干扰素-a; 聚乙二醇结合物中图分类号: R978.7; R512.6* 3文献标识码: A文章编号: 1001-0971(2002)03-0152-031聚乙二醇蛋白质结合物结合的PEG单体的屏障能力可以减少或除去蛋白聚乙二醇(PEC)结合物是为增强治疗蛋白的释的免疫原性。但对蛋白结构认识的不足和对PEC药于20世纪70年代得到了发展。PEG 结合物在药单体位点的选择性不高有可能会阻碍蛋白质免疫原代动力学和药效学方面的改善促进了肿瘤学和传染性的除去。-般的途径是将PEG单体与蛋白表面病学在治疗领域的应用。无论蛋白和非蛋白分子都赖氨酸连接可得到期望的结果。与此特性相似，能与PEG连接,但研究的重点主要集中于PEG蛋白PEG单体的屏障效应可使PEG连接蛋白水解敏感结合物。PEG 结合物通过增加蛋白质的分子量,减性降低,在使用高分子量分枝结构的PEG分子时，少了药物的排泄,从而减少了服药频率。结合后热这些效应特别强。将PEG单体与小分子蛋白质连稳定性和pH稳定性的提高,促进了蛋白质半衰期接可形成一个更大的PEG蛋白结合物,它将减少肾的延长。PEG 结合物还可减少蛋白质的免疫原性并脏的清除率。上述这些性质均涉及增加了蛋白质的保护其免于蛋白分解而降解。由于减少了因每日多循环半衰期。PEG蛋白在体内还表现出分布的变次给药所致血药浓度的波动,药物的毒性得到降低。化，皮下注射时其吸收取决于PEG单体的分子量。多年来,在食物、化妆品和药物领域应用的经验已确证PEG无毒。PEG具有低免疫原性已得到许2聚乙二醇结合物的化学多研究的支持。一个有趣的例子是兔在极端的条件将PEG单体与蛋白质偶联,首先需要活化的下产生了抗PEG抗体。但此免疫应答无临床意义,PEG,即将末端羟基转变为易于与同蛋白表面官能因为没有实例表明人注射PEC结合蛋白可产生抗团反应的基团。最常用的方法是将PEG单体上的PEG抗体。研究了不同分子量PEG单体的清除作官能团活化为可以与赖氨酸和N端氨基反应的官用,结果表明PEG的清除不涉及结构的改变,其清能团。典型的是使用单官能团PEG(mPEG),因为这除率与分子量成比例。其中低于约20 ku 分子量的种聚合物能抵抗交联和聚合。分子经肾脏清除，由尿液排出。更高分子量的PEG赖氨酸取代以及PEG分子量的不均匀性在分子经肾脏清除速度很慢,随着PEG分子量的增PEG蛋白药学中很重要。通常需要建立一种特殊的加，肝脏的清除速度亦将增加。药学方法进行测定和复核。但在某些情况下,可以PEG蛋白结合物的性质与许多天然聚合物相减少或除去取代位点的不均匀性。中国煤化工主要问题是mPEG中似，因此可展现出许多期望的特性,所有这些作用都依赖于结合PEG 的单体的分子量。常观察到PEG经常MHCNMHGH)。一些制造商生连接对小分子药物的溶解度具有显著影响。共价键产出含低比率二醇的mPEG,但这些杂质总是存在。二醇的含量高达10% ~ 15%。二醇的活化导致双收稿日期:2001-12-28官能团的混杂,它可产生交联和聚合。二醇的出现国外医学药学分册2002 年6月第29卷 第3期153●来自于催化环氧乙烷聚合生成mPEG过程中的水污限的分布体积。这使得给药方式更为简便(一周1染,在制备高分子量mPEG中即便使用更低浓度的次,非修饰的IFN-a为一周3次)。现已获得PEG(40甲氧化物作为诱发剂，在这个反应中水污染和二醇ku)IFN-2a的临床结果。曾进行了开放式和平行服的形成依然是非常严峻的问题。而且由于二醇链可用剂量的全球多中心II期临床试验。531 名患者随以在任何一端连接,因此污染的二醇比所期望获得机每周1次给予PEG(40 ku) IFNa-2a ,剂量为180的mPEG具有更高的分子量。μg,持续48周(n=267)或给予每周3次非修饰的PEG结合物化学的-一个特征是二醇和其产生的IFNa-2a,每次6 MIU持续12周后改为每周3次每次双官能团的PEG是不可除去的。因此在终产品中3 MIU再持续36周(n=264)。结果显示,在48周.存在一些蛋白交联相应产物需设法除去。另一种可PEG(40 ku) IFNa-2a与非修饰的IFNa-2a 相比较,前选择的方法是纯化活化的PEG试剂并除去双官能者表现出较强的病毒学应答反应(69%对28%,P=团物质。这种途径的优点是能减少昂贵的蛋白质的0.001),在72周有持续的病毒学应答反应(39%对损失。19%,P=0.001)。在271名慢性HCV患者和组织活检为肝硬化或桥接纤维化的患者中进行了另一项3聚乙二醇化干扰素-a开放随机的平行剂量临床研究。病人随机接受48慢性传染性丙型肝炎病毒(HCV)感染是- -种流周IFNa-2a每周3次每次3MIU的治疗(n = 88)或每行广泛的疾病,可致肝硬化和肝细胞癌。干扰素周1次PEG(40 ku)IFNa-2a ,剂量为90 μg( n = 96)或(IFN)-a蛋白已经广泛用于治疗HCV ,但单用IFN180μg(n=87)的治疗,随后是24周的非治疗期。.治疗仅有少量患者产生持久的作用。这可能是由宿接受剂量为180 pg PEG(40 ku) IFNa-2a组治疗的患主的多样性、病毒因素以及IFN不良的药代动力学者到48周结束时44%有病毒学应答反应( P=因素所造成。尤其是单次皮下给予IFN后血清浓度0.001,与IFNa-2a相比),而且30%的患者在72周有在24h以内就降到检出限以下。这样即使治疗方持久的病毒学应答反应(P=0.001,与IFNa-2a 相法需要每周皮下注射3次IFN,但病毒在药物没有比)。在88名接受IFNa-2a每周3次每次3MIU治处于治疗有效的浓度时还是在复制。IFN 加利巴韦疗的患者中,在48周仅14%有病毒学应答反应,至林治疗HCV可以增加持久病毒学应答的患者数目72周8%有持续的病毒学应答反应。.(从38%增至43%)。但这种应答的增加伴随着高众所周知,IFN和抗病毒药物利巴韦林联合治不良反应的发生率,使得- -些患者终止了治疗。疗比单独用IFN治疗会提高疗效。因此希望提高疗IFN的PEG化改善了药代动力学特性,因此药效而将PEC(40 ku)IFNa-2a与利巴韦林合用治疗,这效学也相应得到了提高。曾临床评价了5 ku分子引起人们的兴趣。这类临床试验正在进行之中,并量的mPEG交联的1IFNa-2a治疗慢性HCV患者的效且在20名患者中已经完成PEC(40 ku)IFNa-2a 加利果。每周给予该药的剂量分别为15,45,90和135巴韦林治疗的一项小规模试验。在20名患者中9puy,没有发现比每周用300万国际单位(MIU)的未修名观察到持续的病毒学和生物化学应答反应。感染饰IFNa-2a有增强的效果。最近对由分子量为40HCV基因1型的16名患者中5名有持续的病毒学ku的分枝结构的PEG与IFNa-2a交联而成的应答反应,并且所有4名感染其他基因型HCV的患PEGIFNa-2a进行了临床评价。这些试验的的结果者也产生了上述反应。令人振奋。此外最近欧盟和美国批准- -种分 子量为PEG使用mPEG-SC12000为原料制备分子量1212 ku的线性PEG化的IFNa-2b 用于HCV治疗。ku的线性PEG化IFNa-2b技术( PEG IFNa-2b)已获研究还表明,分子量为40ku的PEG化IFNa-2a得专利。这项工作的特别之处是,在低pH(约pH=可能具有期望的药代动力学特征和活性。特别是预5)条件下经由一个可水解的不稳定链与组氨酸偶联测其稳态血药浓度为常数。实际上,试验结果证实中国煤化工的结果表明，PEG化一周1次的皮下注射血药浓度几乎不变。用PEG2-IFNaYHCNMHG的IFNa2b每周给药NHS40000进行PEG化后与原始的IFNa-2a 相比，肾3次进行比较,在最佳剂量为1.0 μg*kg~ '时,在PEG廓清率减少到1%，清除半衰期为77 h,原为9 h。化IFNa-2b组297名患者中25%有持续的HCV清除PEG(40 ku)IFN-a经皮下给药显示出持续吸收和有作用, 而在IFNa-2b组303名患者只有12%显示出154●Foreign Medical Sciences Section on Pharmacy 2002 Jun; 29(3)持续的病毒清除作用(P <0.001)。最近报道了涉度复合性免疫缺陷病(SCID),这种疾病与一种腺苷及1530名患者的Ml期临床试验结果,表明PEG脱氨基酶( ADA)遗传缺陷病有关。在培加酶出现之IFNa-2b 组对病毒应答反应比IFNa-2b 与利巴韦林:前,SCID患者用含有ADA的红细胞进行部分交换合用组高,虽然两组差值仅为7%。输血治疗。这些换血疗法使得患者处于铁负荷过多基于所得试验数据,很明显PEG 化的IFNa-2b和与静脉注射有关的病毒性感染的危险中。培加酶和PEG(40 ku)IFNa-2a 与未修饰的IFNa-2b 和IFNa-每毫升中ADA活性大约比红细胞高1800倍,因此2a相比分别具有更好的效果。具有较高分子量和药物产生的ADA活性浓度比部分换血高。培加酶分枝结构的PEG化1FNa-2a 可能比较低分子量的可用于治疗急性淋巴细胞白血病、急性成淋巴细胞PEG化IFNa-2b有更好的药代动力学和药效学性白血病和慢性髓性白血病。天然的门冬酰胺酶化合质,每周1次给药即可维持足够的血清IFN浓度,这物与高变态反应和缩短自身中性抗体半衰期的发展使得更多很难治疗的患者也能获得改善的持续应答有关,难以维持有效的血浆浓度。培加酶能减少酶反应。尚需要在PEG(40 ku)IFNa-2a和PEC化IFNa-诱导的免疫反应倾向,这样就允许对天然酶有高过2b之间进行直接的临床试验。已经清楚的是,总体敏症的患者接受培加酶治疗而不产生过敏反应。.上PEG结合物治疗蛋白都是有益的,并且IFN的FDA还批准了用于治疗Kaposi肉瘤的PEG结合的PEG结合物在不断增长的被诊断为HCV感染的人多柔比星脂质体和用于肺部手术密封剂的PEC-丙群中有希望能够增加治疗的成功率。交酯~乙交酯-丙烯酸酯。尚有一些重要的PEG结合蛋白正处于临床试验的最后阶段,包括治疗肢端肥4其他PEG药物结合物大症的PEC-生长激素受体拮抗剂、自由基清除剂、一些PEG蛋白结合物已被美国FDA批准用于血液衍生药物、抗肿瘤药、心血管药物和抗原药物。临床或临床研究中。培加酶是1990 年批准用于重预计某些将在近年得到批准。人工病毒载体吴波'编译仲伯华'王嘉玺2审校(军事医学科学院1. 毒物药物研究所，2.基础医学研究所，北京100850)摘要:基因传递十分复杂,使用简单的载体分子难以完成。模拟病毒的重要性质,设计合成多组分载体。有些解决方法,如递送细胞锚定分子或正常功能的内源性核输入机制是直接拷贝自细菌和病毒的作用过程;另一些方法具有原创性,如由去污剂二聚体化进行单分子基因组浓缩,或由质子吸附作用引发核内体的破裂,这些效应是天然的细胞侵袭者所不具备的。所有这些功能组分有待装配成一种独特的超分子系统,即“人工病毒”。关键词:人工病毒;基因传递;合成多组分载体中图分类号: Q782文献标识码: A文章编号: 1001-0971(2002)03-0154-041简介的胞内转运,使数十亿的基因拷贝中最多只有少数基因治疗依赖于核酸载体。病毒的多样性可以几个能够到达靶细胞核。满足临床上对基因传递的大多数要求。但病毒和宿主平行进化,使外源性蛋白颗粒及受感染的细胞成2 DNA 浓缩中国煤化工杂的多阶段过程,为免疫系统的有效靶位。合成的超分子载体,可以需要多AHC N MH心无- -例外地均设计不含有多肽,甚至带有惰性的衣壳层,藉此逃避是阳离子多聚物,可以诱导DNA聚集。把线状的多数的免疫识别。但是,不利的生物分布以及无效DNA分子转变为紧密的微粒,提高了化学和物理稳收稿日期:2002-02-01定性。质粒DNA被阳离子性的脂质体或多聚物压