不同生产工艺对中药添加剂生物活性的影响

2005年第1事| 调查研分不同生产工艺对中药添加剂生物活性的影响曹国文,曾代勤,戴荣国,姜永康,陈春林,周淑兰,翟少钦,刘宗惠,钟正泽,欧秀群,江山(重庆市养猪科学研究院,重庆荣昌402460)摘要:本试验比较了不同工艺制备的中草药添加剂即常规散剂、水煮提取制剂和醇水提取制剂对猪生长性能等影响，结果三种制剂对猪的生产性能、肠道益生茵指数和对猪外周血液T淋巴细胞比值与猪瘟抗体滴度均有不同程度的提高。,其中醇水提取物制剂能显著提高猪的日增重、饲料报酬、肠道益生菌乳酸杆菌和双歧杆菌指数以及T淋巴细胞比值,并能提高猪瘟疫苗免疫后的抗体合格率。常规散剂次之,水煮提取制剂较差。关键词:中草药添加剂;不同工艺;生物活性中图分类号: S817. 19文献标识码:A .文章编号: 1000 -6354(2005)01 -0011-03中草药作为猪的饲料添加剂,不仅能提高生产性能，降1.2 试验方法低饲养成本,而且具有增强免疫、抗应激和保健等多种功能，1.2.1中草药添 加剂制备与添加量且不存在安全和环保问题,因而受到国内外同行的广泛重1.2.1.1常规散剂的制备将中药饮片置 60 C烘干,粉碎,视。但就我国目前研究状况来看,由于对中草药饲料添加剂过80目筛,按比例混合即成,按3%的比例加入饲料中。的开发用资金投入少、研究不深入、工艺水平落后、技术水平1.2.1.2水煎煮法提取物的制备 复方中药饮片 ,加水(首低等,大多仍然停留在传统的配方、配伍、制成粉(散)剂的粗次10倍,2.3次6倍)煎煮3次,每次1 h,过滤,合并滤液,滤制阶段,很少有将其有效成分提取浓缩后制成精专型或复合液加热浓缩至1:1-1:2时,在60~80 C下按10%加入絮凝产品,这不利于现代工厂化生产、药效评价和产品质量标准剂,搅拌5min,置室温过夜,过滤.滤液浓缩至稠膏状,加入的制定与产品质量控制,亦不利于产品的广泛推广和应用。少量载体混合，于60 C烘干,粉碎,过80目筛,分装备用。本试验为筛选产业化生产工艺而设计,为此,我们对经饲喂用时按1% (相当于生药3 g)加入饲料中。试验优选出来的中草药添加剂组方进行了不同工艺制备试1.2.1.3 醇一水提取物的制备 复方中药饮片粉碎成粗验,以确定适宜的生产工艺，为中草药提取物制剂产业化奠粉,加5倍70%乙醇浸泡2 h后回流提取1 h,滤出乙醇液，定基础。回收乙醇,过滤,弃沉淀备用。药渣加水(8倍),于80 C温1 材料与方法浸2次,合并浸出液,过滤,减压浓缩至1:1~1:2时,在60~1.1 实验材料80 C下按10%加入絮凝剂，搅拌5 min, 置室温过夜,过滤,1.1.1设备与仪器 FC- 160全不锈钢高效万能粉碎机滤液与乙醇提取液合并,再减压浓缩至稠膏状,加入少量载(湖南衡阳市制药设备厂生产) ;CTG - 10中草药多功能提取体混合,于60 C烘干,粉碎,过80目筛,分装即成。用时按罐(湖南衡阳市药物机械厂生产) ;MDRP -5喷雾干燥器(无0. 5% (相当于生药1.5 g)加入饲料中。锡市现代喷雾干燥设备有限公司生产);CS101电热干燥箱1.2.2不同中草 药制剂对猪生产性能影响的测定(重庆银河试验仪器有限公司制造);全自动生化测定仪AG1.2.2.1试验设计与饲粮 ,同文献"。I(美国Land Mark Scienifie公司生产);紫外分光光度计1.2.2.2试验动物与饲养管理本 试验在重庆市养猪科学UVIKON923(瑞士BI0 -TEK KONTRON公司生产)。研究院猪场进行,在荣昌县农村选约10 kg断奶日龄相近的1.1.2 主要试剂95%乙醇、肠道菌培养基、戊二醛、甲基健康长白x荣昌杂交仔猪,每组8头,4个重复。经驱虫与免绿及常用化学试剂等(购自重庆市医药公司化学试剂部);壳疫接种后进行正式试验。试验期间,自由采食,自由饮水。聚糖絮凝剂(上海伟康生物制品有限公司出品);猪瘟正向血每天清扫圈舍1次,定期进行消毒。全期试验120 d。凝试剂(中国农科院兰州兽医研究所提供)。1.2.2.3 测定指标及方法 主要测定平均日增重和料重1.1.3 中药组方的确定 根据配方筛选试验结果,结合药比。试验猪于试验结束时的早上8: 00后空腹称重计算全期物来源的广泛性和尽量不与人争药源的原则,本试验选择平均日增重和料耗情况,然后计算料重比。杜仲叶、女贞子、山楂等多种中药组成。杜仲叶、女贞子收1.2.3_不同中草药制剂对猪肠道菌群影响的测定试验自荣昌农村,其余购自荣昌县长寿中药行,经鉴定均为地道35 d中国煤化工主要肠道菌系大肠杆中药材。菌、肠fYHCNMH G1.2.4个同中草约啊创对陌珊肥和1A液免疫影响的测定1收稿日期:2004-07 -091.2.4.1猪外周血 T淋巴细胞的测定,参照文献介绍的方项目来源:重庆市攻关项目作者简介:曹国文(1956-)，男，高级兽医师，主要从事中普药、中法)]进行。1.2.4.2猪瘟抗体的测定 ,参照使用说明书进行。药添加剂和动物微生态制剂研究。005年第1期V中算唐涯药杂点FFBTM调查研究表1不同剂型 中草药添加剂对育肥猪生产性能影响试验结果项_E常规散剂组水提取物醇水制剂抗生素组对照组猪数/头8平均始重/kg11. 45 +0.3911. 58 +0.4511.65+0.4111.92 +0.4511. 50+0.41平均末重/kg93.63 2.8989.90 +3.2494.76+2. 1889.87 +2.5287.44+1.82平均日增重/g673.57 +22. 83.642.01 +23. 62681. 28 +15.93*638. 86 +21.25622. 4415.92"料重比/kg3.243.293.163.53.52注:肩注不同小写字母表示差异显著(P <0.05),2试验结果对照组比较有显著性差异(P <0.05)。饲料报酬分别比对照2.1生产性能测定结果组提高7.95% .6.53%和10.23%,比抗生素组分别提高不同剂型(常规散剂、水煎提取物、醇-水提取物)中草7. 43% .6. 00%和9.71%。药添加剂对育肥猪的生产性能影响，试验结果见表1。2.2肠道菌群测定结果表I结果表明,所筛选出中草药添加剂的不同剂型(常试验35d后,三个中药添加剂组和对照组猪肠道菌群中规散剂、水煎提取物和醇水提取制剂)均能提高猪的生产性主要菌系大肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌和双歧杆菌的变化,结能，日增重分别比对照组提高8.21% 3. 14%和9. 45% ,比抗果见表2。生素对照组分别提高5.43%、0. 50%和6.64%。醇水制剂与从表2可以看出，中药常规散剂组、水煮提取组和醇水表2猪肠道菌群的变化菌种水煮提取组醇水提取组大肠杆菌/10*个.1. 79 +0.51°11. 92 +0.6511. 99+3.8223.2+1.24*肠球菌/10°个.g-'1.17 +0.40*2.87 +0.702.62 +0.924.84 +0.916乳酸杆菌/100个.g'7.67 +1.64*5.68 +2.457.58+1. 10*1. 62 0.61"双歧杆菌/109个.g-16.03 +0.32".5.43+1.59"8.70+1.19°.1.16 +0.05注:表中n=6;肩注不同字母表示差异显著(P <0.05 ) ;肠逍菌群数量用Logloctu/g粪样表示。提取组粪便中的大肠杆菌与肠球菌数均低于对照组,尤其是水提取物和抗生素各组的猪瘟抗体合格率均高于对照中药常规散剂组与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。组。尤以醇水制剂组较高。中药各组粪便中的乳酸杆菌和双歧杆菌数均明显高于对照3讨论与结论组,其中常规散剂、醇水提取组的乳酸菌比对照组显著提高3.1不同工艺制备中草 药添加剂对育肥猪生产性能影响(P <0.05)。中药各组的双歧杆菌与对照组相比均呈显著性试验结果表明,我们研制的中草药常规散剂、水煎提取差异(P<0.05)。物和醇水提取制剂均能提高猪的生产性能,但仅醇水制剂与2.3 细胞和体液免疫测定结果对照组比较有显著性差异(P <0.05)。饲料报酬亦分别比常2.3.1 T 淋巴细胞测定结果(%)中药各组与抗生素 和空规散剂和水提取物有较大提高(2.1% -3.5%)。从生产性白对照组T细胞检测结果为常规散剂:43.69 +2. 53;水提取能看,醇水提取制剂明显优于常规散剂和水煮提取制剂,这物:42. 04 +3. 70;醇水制剂:48.94 +2.85 ;抗生素组:43.44土可能是因为醇水分步提取，能最大限度提取其有效成分(尤2.79;对照组:38.40+2.44。其是黄酮类化合物),加之温度不超过80 C ,减少了活性的试验结果表明,中草药添加剂和抗生素组与空白对照组损失,从而产生良好的促生长性能。水煮提取物的促生长效相比,中草药添加剂和抗生素均有提高T细胞的百分比的趋果明显差于另外两组，可能是有效成分提取不全和长时间煮势经SPSS分析软件分析处理,醇水提取物组与水提敢物沸的持续高温造成部分活性丧失的缘故。组、土霉索组和粉剂组与对照组相比差异显著(P <0.05),而3.2不同工艺制备中草药添加剂对断奶猪肠道菌群的影响醇水提取物组与对照组相比差异极显著(P <0.01),其余处从研究结果可以看出,我们研制的中草药添加剂(常规理组间无显著性差异。表明中草药添加剂与适量抗生素(.土散剂或提取物制剂)对猪肠道中大肠杆菌和肠球菌均有一定霉素)可以提高猪的细胞免疫功能,尤以醇水I艺制备的中的抑制中国煤化工1相比具有显著性差草药添加剂效果明显。异(P<于常规散剂组,这可2.3.2猪瘟抗体测定 接种猪瘟兔化弱毒疫苗35 d后能是由:MHCN M H G性成分(挥发性部12采血,分离血清以正向血凝试验测定猪瘟抗体,抗体滴度分)所致。但中药各组均能促进肠道内有益菌如乳酸杆菌、达1:16或以上为免疫合格。结果抗体合格率分别为常双歧杆菌的增殖,其中常规散剂和醇水提取组的乳酸菌比对规散剂75. 0% ;水提取物62. 5% ;醇水制剂87.5% ;抗生照组显著提高(P <0.05)。中药各组的双歧杆菌与对照组相素组所方数搪照组50. 0%。中药散剂、水煮提取物、醇比均呈显著性差异(P <0.05)。大量研究证实,乳酸菌和双2005年第1期V中冀厦隆荡点RRKMt调查研究妥曲珠利在鸡组织内的残留研究王学红,梁剑平,华兰英,牛建荣,史彦斌,吕嘉文,崔颖,尚若锋(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业 部新兽药工程重点实验室,甘肃兰州730050)摘要:研究鸡单剂量喂服(50 mg/kg●d, 100mg/kg.d,连服2 d)妥曲珠利后在肝脏、肾脏、肌肉组织中的残留量,以便制定妥曲珠利预混剂的休药期。用乙腈-乙酸乙酯(3/2, v/v)提取组织中的药物，利用高效液相色谱法测定组织中妥曲珠利的浓度。试验结果表明， 100 mg/kg饲料添加妥曲珠利在鸡体内休药期为14 d, .50 mg/kg时休药期为8d。该结果与农业部制定的无公害食品饲养兽药使用准则中所规定的75~ 100 mg/kg鸡饮水妥曲珠利的休药期一致。关键词:妥 曲珠利;鸡;组织残留;高效液相色谱法( HPLC)中图分类号: S859.7文献标识码:A .文章编号: 1000 - 6354(2005 )01 -0013 -04妥曲珠利(商品名位Baycox)是德国拜耳公司于20世纪内的多种原虫。其中对柔嫩堆型、毒害布氏、巨型、和缓等80年代开发的三嗪酮类抗球虫药物.可有效杀灭包括球虫在艾美耳球虫的抗球虫指数均超过180,属高效抗球虫药物。由于其杀虫效果好，毒性低，在欧洲、日本、加拿大等应用广收稿日期:2004-07-22泛。目前,我国上海新亚药业已成功的合成妥曲珠利,其各作者简介:王学红(1975-),女,研究实习员，主要从事药物提取研究。项化学指标均达到国外水平。为了较全面地了解国产妥曲歧杆菌的生理功能与动物机体的生命活动息息相关(!。这本试验结果证明,不同T.艺制备的中草药添加剂,其生些益生菌在胃肠道增殖后.能大量合成维生素,增加营养,辅物活性有异。常规散剂用量大,吸收利用不完全,质量难于助食物消化,促进宿主代谢,抑制蛋白质腐败、有助于恢复和控制;水煮提取物从促生长性能、对肠道有益菌的作用以及保持正常胃肠道功能,增加胃肠蠕动,促进消化和吸收,提高对细胞和体液免疫的影响来看,虽有作用,但均不如常规散增重和降低料耗,增加经济效益。中草药添加剂其有效成分剂和醇水提取制剂;醇水制剂无论是在促进猪只生长和肠道主要为有机酸(绿原酸、齐墩果酸、山楂酸)、多糖和黄酮类有益菌的增殖,还是提高猪外周血T淋巴细胞比值和猪瘟抗等,这些化合物可能通过对肠道中益生菌的增殖,从而实现体合格率方面则明显优于常规散剂和水煮提取物,且用量对动物机体免疫力的增强和生产性能的提高。小，质量易控,适宜推广。3.3不同工 艺制备中草药添加剂对猪细胞和体液免疫的影响参考文献:本试验用酯酶染色法测定了试验各组外周血液中T淋[1]戴荣国,曹国文.曾代勤,等。中草药添加剂的组方筛选巴细胞百分率,用猪瘟正向血凝试验测定了试验各组接种猪试验[J].四川畜牧兽医,003.,11):26 ~27.瘟疫苗的抗体升长情况。结果表明,3%粉剂能显著的提高[2]朱玉兰,张明伟,何明清,等.20种选择性培养基的制备猪只T淋巴细胞百分率,醇水提取物能极显著的提高T淋巴方法[A].四川农学院科研处情报室。幼龄畜禽腹泻与细胞百分率,说明该添加剂能增强细胞免疫功能。不同T.艺促菌生菌群调整疗法研究专集[ C].1984,49 ~55.制剂其增强效果不一，醇水提取物组(低浓度组)明显优于[3] 徐叔云,卞如濂,陈 修,等。药理试验方法学[M].北其它T艺和浓度组。猪瘟抗体合格率测定结果证实,中药散京:人民卫生出版社,1982.剂、水煮提取物和醇水提取制剂各组均有提高猪瘟抗体合格[4]赵红霞,詹勇,许梓荣. 乳酸菌的研究及其应用[J].率与增强体液免疫功能,且以醇水制剂组较好。江西饲料,2003,(1):9-12.Effects of different production craft on Chinese herbal additive biological activityCAO Guo - wen,ZENG Dai -qin, DAI Rong - guo,JIANG Yong - kang ,CHEN Chun - lin,ZHOU Shu - lan,ZHAI Shao - qin,uU Zong 0 hui ,ZHONG Zheng - ze,0U Xiu - qun,JIANG Shan( Chongqing Swine Science Academy Rongchang chongqing 402460 .China)Abstract: In this experiment, the efets of the dfferent production e中国煤化Ilcoboal -water - abstrac) on Chinese herbal aditive in pigs were studied. The resutls showed;YHC N M H G! probiotioss index,13peripheral blood T lymphocyte ratio and antibody titer of swine fever were raised in three preparations，but, daily gain, feed re-ward, intestinal Lactie acid bacteria and Bifidobacterium' index, T lymphocyte and antibody qualified rate of swine fever were raisedsignificanly in the acohol - water - abetract preparation group, powder preparation group taking second place,Key words: Chinese herbal additive; diferent craf; biological activity ;ffc