灭菌sterilization
仅要求杀死物体内部或表面的病源微生物营养体的过程则称为消毒。
灭菌方法 可分物理和化学两大类,物理方法又有加热、辐照和过滤等。加热法有:①干热,采用火焰或热空气(一般为160℃,2h),适用于器皿的灭菌。②湿热,采用饱和蒸汽(一般为120℃,30min),适用于培养基及发酵设备的灭菌。辐照是采用紫外线、γ射线等,适用于室内空气、器械及成品的灭菌。过滤是采用纤维状或微孔过滤介质,适用于流动空气、不耐热液体、饮用水的灭菌。化学方法采用甲醛、环氧乙烷、过(氧)乙酸等对局部空间及器皿进行灭菌;采用高锰酸钾、石炭酸、漂白粉、新洁而灭等对器械、皮肤、污染物等进行消毒。
以上各种灭菌方法中,除了过滤是机械作用外,其他都属菌体蛋白质变性的结果。
工业培养基的灭菌 工业上一般都采用湿热法进行培养基的灭菌。蒸汽灭菌具有效果好(穿透性强;冷凝时放出大量潜热;在有水分情况下蛋白质易于变性)、价格低廉、操作方便等优点,特别适用工业上大规模制备无菌培养基。工业灭菌有分批及连续两种操作方式:
①分批灭菌 将待灭菌的培养基置于发酵罐内,用蒸汽通过罐的夹套或蛇管间接加热至90℃,然后将蒸汽直接导入发酵罐,使其升至一定温度和保压一定时间(一般为120℃,30min),然后将其冷却至一定温度,以便接入菌种开始发酵。分批灭菌的优点是不需要另加设备,在培养基灭菌的同时,也对发酵罐及附属管道进行了灭菌。缺点是培养基中有效成分破坏较多,发酵罐的非发酵时间占用较长。
②连续灭菌 是将待灭菌的培养基预热后,用泵连续打入蒸汽加热器(图1),




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